黑龙江省教育厅资助项目(11531431)
- 作品数：2 被引量：6H指数：1
- 相关作者：孙晓杰郭红艳樊丽刘秀财于英君更多>>
- 相关机构：齐齐哈尔医学院黑龙江中医药大学中国医学科学院肿瘤医院更多>>
- 发文基金：黑龙江省教育厅资助项目齐齐哈尔市科技局指导项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 蛋白激酶SGK2α在大肠杆菌中的表达纯化及抗体制备被引量：1
- 2010年
- 目的该研究通过SGK2α基因的克隆、原核蛋白表达以及纯化,制备抗SGK2α抗体,为进一步研究SGK2α蛋白的生物学功能奠定基础。方法利用原核表达载体PGEX-4T-3构建重组质粒,并在大肠杆菌中通过IPTG诱导表达;亲和层析法纯化重组蛋白;以纯化的重组蛋白为抗原免疫新西兰大耳白兔制备抗SGK2α多克隆抗体,ELISA方法检测抗体效价,免疫印迹法检测抗体的特异性。结果构建了PGEX-4T-3-SGK2α原核表达质粒,经原核表达和亲和层析获得GST-SGK2α融合蛋白,蛋白纯度在90%以上;利用GST-SGK2α融合蛋白制备多克隆抗体,抗体效价阳性且具有较强的特异性。结论利用原核表达的GST-SGK2α融合蛋白成功地制备了抗SGK2α多克隆抗体,可用于免疫组织化学和免疫印迹检测以及功能研究。
- 孙晓杰周启兵赵玫李珅吴琦郭红艳黄常志
- 关键词：重组蛋白纯化多克隆抗体
- 血清糖皮质激素调节蛋白激酶3过表达对乳腺癌细胞凋亡的影响被引量：5
- 2012年
- 目的探讨血清糖皮质激素调节蛋白激酶3(SGK3)基因过表达对乳腺癌细胞凋亡的影响。方法构建pEGFP-N1-SGK3重组质粒,用载体质粒pEGFP-N1和重组质粒pEGFP-N1-SGK3转染乳腺癌MCF7细胞;MTT法观察转染细胞的增殖情况,流式细胞术分析细胞凋亡情况,RT-PCR检测凋亡相关基因表达。结果利用pEGFP-N1-SGK3质粒转染乳腺癌MCF7细胞,建立表达SGK3蛋白的细胞系;通过细胞增殖实验发现,SGK3的过表达可促进MCF7细胞增殖;流式细胞术分析显示,外源性SGK3可抑制MCF7细胞凋亡的发生,并影响凋亡相关基因bad、bcl-xl的表达。结论 SGK3的过表达可抑制乳腺癌MCF7细胞凋亡。
- 郭红艳孙晓杰刘秀财樊丽于英君
- 关键词：乳腺癌细胞凋亡
