甘肃省新药临床前研究重点实验室开放基金(GSKFKT-0703)
- 作品数：5 被引量：11H指数：2
- 相关作者：陈新年张妮白德成崔南李爱娟更多>>
- 相关机构：兰州大学兰州大学第二医院甘肃省新药临床前研究重点实验室更多>>
- 发文基金：甘肃省新药临床前研究重点实验室开放基金甘肃省自然科学基金国家大学生创新性实验计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 脑外伤大鼠血液黏度、气体变化及其相关性研究
- 2011年
- 目的:探讨脑外伤大鼠血液黏度和气体短期内的变化规律及其相关性,探寻其变化规律并分析变化原因。方法:通过大鼠脑外伤模型检测大鼠脑外伤后不同时间点右心房混合静脉血血液黏度和血液气体的变化。结果:脑外伤后血液黏度和对照组比较显著增高(P<0.05),在伤后30 min、1 d出现2次高峰;血液pH值在伤后30 min、1 d出现2次低峰,PCO2在伤后30 min、1 d出现2次高峰,PO2在伤后出现下降,12 h达到低峰。结论:脑外伤可致血液黏度增高、血液pH值下降、PCO2升高、PO2下降。
- 赵秉江何晓东白德成
- 关键词：脑外伤血液黏度血液气体
- 大鼠β-防御素-2的重组表达及抗菌活性检测被引量：4
- 2010年
- 目的构建大鼠β-防御素-2(rBD2)基因的真核表达载体pCAGG-rBD2,并转染小鼠纤维母细胞(L929),为解决细菌耐药性问题提供进一步的实验基础。方法以大鼠肺组织总RNA为模板,采用RT-PCR的方法获得β-防御素-2基因cDNA,将其克隆到pGEM-T Easy载体并构建含有目的片段的真核表达载体pCAGG-rBD2,经脂质体介导转染L929细胞,通过RT-PCR和Western blotting检测目的基因表达情况。结果成功克隆并构建了含有目的基因rBD2的真核表达载体pCAGG-rBD2,转染pCAGG-rBD2的细胞中检测到了rBD2基因在转录水平和蛋白水平的表达,其细胞培养的上清液对金黄色葡萄球菌具有杀灭作用。结论防御素在真核表达系统的成功表达,为进一步开发高效能杀灭耐药性致病微生物的多肽类新药提供实验基础和理论依据。
- 李爱娟张妮陈新年
- 关键词：基因转染真核表达生物活性
- LPS诱导L929细胞β防御素2和schlafen-2基因的表达及其信号转导被引量：2
- 2010年
- 目的:通过研究LPS对于小鼠成纤维细胞(L929)β防御素(defb)和schlafen(slfn)基因表达的影响及其信号转导通路,探讨纤维细胞对病原微生物的防御作用。方法:LPS(200ng/ml)处理L929细胞2、4、6小时,提取细胞总RNA,用RT-PCR和荧光定量PCR的方法检测defb1,2和slfn1,2,3基因表达;应用Westernblot的方法检测了defb2蛋白的表达。NF-κB和P38MAPK两种信号转导通路的化学抑制剂BMS345541和PD169316检测defb2和slfn2基因表达的信号转导通路。结果:LPS能诱导小鼠成纤维细胞defb2的表达,并增强slfn2的表达;P38MAPK和NF-κB信号转导通路调控小鼠成纤维细胞defb2和slfn2的表达。结论:在感染时,小鼠成纤维细胞可能通过诱导defb2的产生而发挥抵御病原微生物的作用。
- 张妮房晓楠崔南陈新年
- 关键词：信号转导
- 血黏度增高致脑细胞膜电位及线粒体膜电位变化被引量：4
- 2009年
- 目的探讨血黏度增高致大鼠脑组织慢性缺血、缺氧后脑细胞膜电位和线粒体膜电位的变化。方法采用高分子右旋糖酐法建立血黏度增高大鼠模型,用血液黏度仪检测全血黏度;以DiBAC_4(3)和罗丹明123为细胞膜电位和线粒体膜电位的荧光指示剂,激光共聚焦显微镜观察并测量血黏度增高大鼠脑细胞悬液中细胞膜和线粒体膜电位荧光强度的变化。结果随注射次数的增加,造模时间延长,全血黏度逐渐升高,与造模时间呈正相关;血黏度增高大鼠脑细胞膜电位和线粒体膜电位变化显著,与造模时间呈时间依赖性关系。结论血黏度增高可导致脑细胞损伤;细胞膜电位和线粒体膜电位变化是造成脑细胞损伤的可能机制。
- 樊勇庞岚白德成
- 关键词：血黏度增高细胞膜电位激光共聚焦显微镜
- hBD1稳定表达细胞株的建立及其表达产物对多重耐药菌的活性检测被引量：1
- 2011年
- 目的 构建人β防御素1（ hBD1）稳定表达细胞株并检测其对多种多重耐药菌的抗菌活性.方法 将重组质粒pCMV-hBD1通过阳离子脂质体转染于非洲绿猴SV40转化的肾细胞（COS-7细胞）,经过G418压力筛选后获得单克隆细胞株；提取细胞总RNA,用RT-PCR检测目的基因在转录水平的表达；收集细胞培养上清液,用Western blot检测hBD1基因蛋白的表达；将含有表达产物hBD1的细胞培养上清液分别同各耐药菌液混合,37℃孵育不同时间后涂布于LB平板,以各实验组和对照组的菌落数的比值作为该耐药菌的存活率.结果 经过G418压力筛选所得到的稳定表达细胞株,在转录水平和蛋白水平均检测到目的基因hBD1的表达,在表达产物hBD1的作用下,多重耐药鲍氏不动杆菌、多重耐药大肠埃希菌存活率和多重耐药肺炎克雷伯杆菌的存活率可以分别降至9%、22%和50%,多重耐药嗜麦芽窄食单胞菌的存活率同对照组没有明显差异.结论 成功获得hBD1稳定表达细胞株,目的基因hBD1的表达产物对多种多重耐药菌均具有抗菌活性.
- 崔南陈新年魏莲花李娟邹凤梅
- 关键词：多重耐药生物活性
