国家科技攻关计划(2002BA546C) 作品数:25 被引量:286 H指数:11 相关作者: 胡中立 周明全 刁英 韩延闯 宋运淳 更多>> 相关机构: 武汉大学 武汉理工大学 华中农业大学 更多>> 发文基金: 国家科技攻关计划 湖北省科技攻关计划 武汉市科技攻关计划项目 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 轻工技术与工程 医药卫生 更多>>
荷叶提取物黄酮对兔胆囊结石形成的影响 被引量:8 2006年 目的探讨黄酮对新西兰兔胆囊胆固醇结石形成的影响及其机制。方法(1)动物模型:45只雄性新西兰兔随机分成对照组(15只)、结石组(15只)和黄酮组(15只),对照组喂普通颗粒饲料,结石组喂含1.2%高胆固醇饲料,黄酮组则饲喂含1.2%胆固醇和0.4%黄酮的饲料,饲养时间各为4周。(2)氨肽酶N(APN)表达:利用RT-PCR方法,检测肝脏APNmRNA水平的变化。(3)血脂检测:放射免疫法检测血清总胆固醇(TG)、甘油三脂(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、载脂蛋白A(ApoA)和载脂蛋白B(ApoB)。(4)血清亮氨酸氨肽酶(LAP)检测:放射免疫法检测。结果结石组中10只(10/15)出现胆囊结石,12只(12/15)出现胆固醇结晶,黄酮组1只(1/15)和对照组2只(2/15)出现胆囊结石;结石组APNmRNAIOD比值(1.16±0.12)明显高于对照组(0.72±0.24)和黄酮组(0.86±0.38)(P<0.05);结石组血清TG、TC、LDL-C、ApoB较对照组和黄酮组明显升高(P<0.01),结石组血清HDL-C较对照组和黄酮组降低,但无显著性差异(P>0.05),结石组血清ApoA较对照组和黄酮组明显降低(P<0.01);LAP结石组明显较对照组和黄酮组升高(P<0.01)。黄酮组各项指标较对照组均无明显差异(P>0.05)。结论荷叶黄酮可降低肝脏APN的表达和血清LAP,改变血脂水平,从而有助于预防胆囊胆固醇结石的形成。 叶德强 丁佑铭 周明全 胡中立 沈阳关键词:胆结石 黄酮 氨肽酶N 莲膨胀素基因的克隆及其序列分析 被引量:6 2006年 膨胀素是一类存在于植物细胞壁上,并能快速缓冲张力,使植物细胞壁松驰的蛋白质。以中国莲幼叶总RNA反转录所得的cDNA为模板,设计简并引物,用PCR方法成功扩增出expansin部分序列,经克隆测序,得到长度在531 ̄532bp的序列共3个,编码177个氨基酸,而且均存在expansin的保守区域。与其它物种,如杂交杨树、烟草、杂交葡萄、野马铃薯、樱桃等物种的expansin相比,核苷酸相似性为84% ̄85%,氨基酸序列相似性为86% ̄99%。莲expansin的成功克隆为研究莲的生长发育以及莲品种的改良等打下了良好的基础。 王曼玲 朱虹琳 董臣 刁英 周明全 胡中立关键词:中国莲 克隆 莲藕品种DNA指纹图谱的绘制 被引量:20 2004年 采用RAPD技术对14个莲藕品种进行遗传多态性分析,用5个Operon引物和80个SBS的RAPD引物进行筛选,从中选出来自SBS的RAPD-C13和RAPD-D15扩增出的8条多态性条带,绘制了14个品种的DNA指纹图谱,在该图谱中每个品种均有各自特异的DNA指纹。 韩延闯 刁英 周立 刘静宇 周明全 胡中立 宋运淳关键词:DNA指纹 遗传多态性 莲藕 RAPD 莲铜锌超氧化物歧化酶cDNA的克隆和序列分析 被引量:14 2006年 用RT—PCR方法,从中国莲(Nelumbo nucifera)幼叶cDNA中成功扩增出铜锌超氧化物歧化酶(CuZnSOD)全长序列,并进行测序分析.该cDNA序列全长461bp,包括起始密码子和终止密码子.其中编码区段为456bp,共编码152个氨基酸,其编码蛋白的相对分子质量为1.552×10^4,等电点为4.515.与GenBank中其他物种的CuZnSOD进行同源性比较,发现其核苷酸序列相似性高达80%~86%,氨基酸序列相似性达89%~94%.所有已知的CuZnSOD的关键活性位点在该蛋白中均保守存在.将其与一些典型的单子叶和双子叶植物的该蛋白进行进化树分析,为富有争议的莲的系统学地位的确定,在分子生物学上为莲的系统学地位的确定提供了一个依据.该基因已在GenBank登记,序列号为DQ227345. 朱虹琳 董臣 刁英 李国林 周明全 胡中立关键词:铜锌超氧化物歧化酶 克隆 莲藕染色体上荧光原位杂交方法的初探 被引量:6 2004年 用酶解滴片法制备莲的染色体标本片,在传统的荧光原位杂交(FISH)的方法上进行改进,得到了一种适合于莲的高效荧光原位杂交方法,为莲的分子细胞遗传学研究提供技术上的帮助。 刁英关键词:莲藕 染色体 荧光原位杂交 FISH 分子细胞遗传学 莲查尔酮合酶基因的克隆及序列分析 被引量:11 2006年 查尔酮合酶(chalconesynthase,CHS)是植物花色素苷等类黄酮化合物生物合成途径中的一个关键酶,而这些类黄酮化合物在花瓣中的含量可以改变花的颜色,所以CHS在植物中的表达量直接影响花的颜色。用RT-PCR方法,从中国莲(Nelumbonucifera)幼叶RNA中成功扩增出chs外显子2的部分序列,经克隆测序,得到长度在844bp ̄936bp的序列共7个,编码282 ̄312个氨基酸。在GenBank中与黑核桃,山茶花,红杜鹃等其它物种CHS进行比较,其核苷酸序列相似性为82% ̄83%,氨基酸序列相似性为86% ̄97%。莲chs的成功克隆为莲的花卉基因工程研究等打下了良好的基础。 王曼玲 董臣 朱虹琳 李国林 周明全 胡中立关键词:中国莲 查尔酮合酶基因 克隆 ISSR标记技术在莲藕遗传研究中的运用 被引量:30 2004年 利用ISSR技术对 1 2个莲藕品种进行了DNA多态性分析。从 6 5个随机引物中筛选出 7个引物扩增基因组DNA ,共获得 91条带 ,其中 75条为多态性标记 ,每个引物平均提供 1 3个标记信息。由UPMGA方法得到的聚类分析结果表明了1 2个品种间的亲缘关系 。 汪岚 韩延闯 彭欲率 滕彩珠 周明全 胡中立 宋运淳关键词:莲藕 多态性 亲缘关系 ISSR 莲藕组织总RNA的快速提取方法 被引量:24 2005年 莲藕组织富含多糖、脂质、酚类等物质,用一般的方法较难提取高质量的RNA。在改进前人方法的基础上,建立了一种高效、简单的CTAB-L iC l提取法,能快速提取高质量的莲藕组织总RNA,并且产率高、完整性好、纯度高,能进一步满足RT-PCR等分子生物学实验的需要。此外,该方法也适用于其它富含多糖、脂质、酚类等物质的植物组织总RNA的提取。 王曼玲 朱虹琳 周明全 胡中立 宋运淳关键词:酚类物质 快速提取方法 莲藕 RT-PCR 生物学实验 莲藕研究进展 被引量:22 2004年 综述了莲藕在分类、生长发育、遗传育种、组织培养、生理学特性等方面的研究进展。 刁英 韩延闯 何建军 王清章 胡中立 周明全关键词:莲藕 生长发育 遗传育种 生理 睡莲科 莲多酚氧化酶基因的克隆及序列分析 被引量:9 2006年 多酚氧化酶是一类普遍存在于植物、真菌、昆虫的质体中,由核基因编码能与铜相结合的金属蛋白酶。它是许多果蔬等农产品酶促褐变的主因,也在植物的光合作用、抗病虫害、生长发育以及花色的形成中起一定作用。用RT-PCR方法,从中国莲(Nelumbonucifera)幼叶RNA中成功扩增出ppo的部分序列,经克隆测序,得到长度在978~1057bp的序列共7个,编码326~352个氨基酸。与其他物种PPO进行比较,其核苷酸序列相似性为83%~85%,氨基酸序列相似性为84%~99%。莲ppo的成功克隆为抑制莲藕的酶促褐变,提高莲的抗虫抗病性等的研究打下了良好的基础。 董臣 刁英 王曼玲 朱虹琳 李国林 周明全 胡中立关键词:中国莲 克隆