北京市自然科学基金(7042031)
- 作品数：3 被引量：37H指数：2
- 相关作者：高占成胡萍陈彬董建强改军更多>>
- 相关机构：北京大学北京积水潭医院更多>>
- 发文基金：北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- mIFN-γ转基因表达对小鼠肺纤维化治疗的作用机制被引量：1
- 2009年
- 目的通过腺病毒载体介导的小鼠γ干扰素(m IFN-γ)在小鼠气道上皮细胞转基因表达,探讨其对博莱霉素诱导小鼠肺纤维化模型治疗的作用机制。方法42只雄性ICR小鼠,随机分为阴性对照组(NC组)、纤维化模型组(FMA、FMB、FMC组)和转基因治疗组(GTA、GTB、GTC组),除NC组外,其余各组经鼻滴入博莱霉素建立纤维化模型。治疗各组在第14天经鼻给予带有m IFN-γ基因的复制缺陷型腺病毒(AdCMVm IFN-γ)悬液。经流式细胞仪测定外周血Th1/Th2和Tc1/Tc2,计数支气管肺泡灌洗液(BALF)细胞分类,右肺行HE及M asson染色,测定左肺组织中羟脯氨酸(HYP)含量,半定量RT-PCR方法了解肺组织中多种细胞因子的表达。测定小鼠潮气量(Vt)、0.1秒率(FEV0.1/FVC%)和静态胸肺顺应性(Cst)。结果AdCMVm IFN-γ治疗各组BALF中的细胞总数与同期模型组相比显著增高(P<0.01),但其肺组织中HYP含量均显著降低(P<0.01)。在呼吸生理上,GTC组Vt和Cst较FMC组明显改善(P<0.05)。AdCMVm IFN-γ局部转基因表达可抑制Th2、Tc2优势表达状态。与模型组比较,治疗各组中IL-12、MMP-2和MMP-9显著升高;IL-13、TGF-β1和TIMP-1显著降低。结论m IFN-γ转基因表达可减轻肺组织纤维化的程度,除了直接作用,还可能通过调节肺组织中多种细胞因子表达实现。
- 胡萍高占成
- 关键词：博莱霉素肺间质纤维化基因治疗
- 博莱霉素致小鼠肺纤维化模型的动态演变及其发生机制被引量：22
- 2006年
- 目的了解小鼠肺纤维化模型的动态演变,探讨博莱霉素致肺纤维化的作用机制。方法36只雄性ICR小鼠,按随机数字表法分为阴性对照组(NC组)和肺纤维化模型组(FMA、FMB、FMC、FMD、FME组),每组6只。除NC组外,其余各组经鼻滴入博莱霉素建立肺纤维化模型。分别于6、14、21、28和35d处死各组小鼠,取外周血经流式细胞仪测定T细胞亚群Th1/Th2和Tc1/Tc2,计数支气管肺泡灌洗液(BALF)中总细胞数和细胞分类,右肺行苏木素伊红(HE)及Masson染色,测定左肺组织中羟脯氨酸(HYP)的含量;并提取左肺组织总RNA,采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT PCR)了解肺组织中多种细胞因子的表达。测定35d处死小鼠的潮气量(VT)、0.1秒用力呼气容积/用力肺活量(FEV0.1/FVC)和静态肺顺应性(Cst)。结果1肺纤维化各组小鼠BALF中细胞总数与NC组比较均显著增高(P均<0.01),且其肺组织中HYP含量除FMA组外均显著升高(P均<0.01)。2FME组VT和Cst均较NC组明显降低(P均<0.01),FEV0.1/FVC则显著升高(P<0.05)。3在肺纤维化模型炎症期(FMA组),T细胞Th1/Th2和Tc1/Tc2之间的平衡呈Th1、Tc1优势表达为主;在纤维化形成期(FMB、FMC组),则以Th2、Tc2优势表达;在肺纤维化形成后,Th1、Tc1再度呈优势表达的状态。4肺纤维化模型组中转化生长因子β1(TGFβ1)和金属蛋白酶组织抑制因子1(TIMP1)均较NC组显著升高(P均<0.01)。结论博莱霉素致肺纤维化小鼠肺功能为限制性通气功能障碍,Th2、Tc2及促纤维化生成因子在肺纤维化形成过程中发挥重要作用。
- 胡萍高占成
- 关键词：博莱霉素肺间质纤维化肺功能细胞因子
- γ-干扰素转基因表达对不同时期博莱霉素致小鼠肺间质纤维化的作用被引量：16
- 2005年
- 目的 探讨小鼠γ -干扰素 (mIFN -γ)在气道上皮细胞局部转基因高效表达对不同时期博莱霉素致小鼠肺间质纤维化的治疗作用。方法 选择 4周龄的雄性ICR小鼠 (2 5g左右 ) ,使用博莱霉素诱导小鼠肺间质纤维化。将小鼠分为 5组 ,阳性对照组 (PC)为吸入博莱霉素组 ,阴性对照组 (NC)为经鼻吸入生理盐水组 ,基因治疗A、B、C组分别于博莱霉素刺激后 7、14和 2 1d给予小鼠滴入含有小鼠γ -干扰素cDNA片段的重组复制缺陷型腺病毒 (AdCMVmIFN -γ) 5× 10 8空斑形成单位(pfu/mL) ,在给予腺病毒后 2周处死小鼠 ,收集小鼠肺组织及肺泡灌洗液 (BALF) ,右肺经HE和Mas son染色 ,左肺匀浆后检测羟脯氨酸含量。结果 经气道给予AdCMVmIFN γ处理的转基因组小鼠BALF中均可测得高浓度mIFN -γ表达 ,其水平在基因治疗A组 (GTA)、基因治疗B组 (GTB)和基因治疗C组 (GTC)分别为 (895 4 . 6 8± 85 3 .88)pg/mL、(9312. 6 4± 36 1 2 .8)pg/mL和 (96 4 3. 32± 6. 12 74 )pg/mL。博莱霉素刺激后第 7d时给予小鼠mIFN γ转基因处理 (GTA组 ) ,小鼠肺间质纤维化程度和羟脯氨酸含量为 (12 6 7. 0 9± 37 .0 7) μg ,与阳性对照组的 (12 4 4 . 86± 6 2. 4 6 ) μg相近 ,而于14d(GTB组 )和 2 1d(GTC组 )后给予小鼠mIFN- γ转基因?
- 徐钰高占成陈彬改军董建强
- 关键词：小鼠博莱霉素肺间质纤维化Γ-干扰素转基因治疗
