国家高技术研究发展计划(2007AA09Z434)
- 作品数：17 被引量：130H指数：7
- 相关作者：张晓华韩茵刘文正常显波王燕更多>>
- 相关机构：中国海洋大学烟台大学中国科学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划公益性行业(农业)科研专项博士科研启动基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学天文地球环境科学与工程更多>>
- 海洋微生物微包埋培养及应用研究进展被引量：12
- 2010年
- 海洋中蕴藏着丰富的微生物资源,其在海洋生态系统中起着重要的作用。综述海洋微生物微包埋培养技术的相关研究概况及应用进展。适于海洋微生物包埋的微球制备技术主要有:水油乳化法、膜乳化法、挤出法、微流体法等。在此基础上建立的培养技术可用于海洋微生物生物多样性研究;慢速生长菌株的培养和分离及微生物传感器的制备等。随着研究的深入,该技术将在海洋微生物的研究方面得到更广泛的应用。
- 冀世奇刘晨光张晓华
- 关键词：海洋微生物
- 北极海洋沉积物中放线菌多样性及抑菌活性筛选被引量：3
- 2014年
- 采用平板涂布法利用6种培养基从北极海洋沉积物中共分离出109株放线菌。选取34株代表菌株进行16S rDNA测序分析。结果表明,它们分属于链霉菌属(Streptomyces)、假诺卡氏菌属(Pseudonocardia)和拟诺卡氏菌属(Nocardiopsis),其中Streptomyces为优势菌属;不同采样点获得放线菌的种类和数量有较大不同,站位点P37分离到的放线菌数量和种类最多;在109株放线菌中,有39株对病原菌有抑菌活性,其中有21株、11株和17株放线菌分别对枯草芽孢杆菌、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌生长有抑制作用。
- 常显波柳瑞翠刘文正张晓华
- 关键词：海洋沉积物放线菌多样性抑菌活性
- 利用抑制性消减杂交(SSH)技术研究不同毒力的鳗弧菌菌株的基因多样性(英文)被引量：6
- 2009年
- 【目的和方法】鳗弧菌是一种嗜盐的革兰氏阴性细菌,也是鱼类弧菌病的主要病原。对斑马鱼的半数致死量研究结果表明,鳗弧菌菌株VIB72具有较高的毒力,而菌株CW1的毒力较低。本文利用抑制性消减杂交(SSH)技术对这两个菌株的遗传差异进行了研究。【结果】通过对差减文库筛选,分离到59个对菌株VIB72的阳性克隆,并对这些克隆的DNA序列进行了测定。17个基因片断与其它细菌的已知功能的基因有较高的同源性,其中包括可溶性溶胞壁质转糖基酶、转移蛋白MobA和MobC、转座子IS66、抑制相关蛋白(金属β-内酰胺酶和乙酰转移酶家族)、毒素蛋白(DT-201和alveicin A免疫蛋白)、与OLD家族相似的ATP依赖性核酸内切酶以及SocE和GTP结合蛋白HflX(有高频率的溶原化)。这些基因片断有可能是鳗弧菌毒力岛的一部分。其他的基因片断与其它的已知基因没有明显的相关性。【结论】这些结果表明,SSH技术成功地鉴定了不同致病性的鳗弧菌菌株的基因差异及潜在的毒力基因。
- 王影徐子男贾爱荣陈吉祥莫照兰张晓华
- 关键词：鳗弧菌抑制性消减杂交毒力基因
- 哈维氏弧菌密度感应系统对几种胞外酶的活性影响被引量：6
- 2010年
- 密度感应系统是细菌通过感受群体密度变化而控制基因特定表达的1种机制。对病原菌密度感应系统的研究有助于找到新的抗感染策略。目前哈维氏弧菌分泌的蛋白酶、脂酶、磷脂酶和溶血素等致病相关因子是否受密度感应系统的控制尚不清楚。哈维氏弧菌有3个平行的密度感应系统。本研究通过检测3个密度感应系统基因突变株的胞外酶(如蛋白酶、脂酶、磷脂酶和溶血素等)活性,发现明胶酶的活性受密度感应系统的信号分子HAI-1和AI-2的正控制,且受AI-2的控制程度更大;脂酶也在一定程度上受HAI-1和AI-2的正控制;卵磷脂酶受HAI-1的负控制;溶血素受HAI-1和AI-2共同的负控制。结果表明,哈维氏弧菌胞外分泌的几种毒力相关因子都受密度感应系统的调控,但控制方式各不相同。
- 白方方张晓华
- 关键词：哈维氏弧菌密度感应系统胞外酶酶活
- 海洋放线菌不同分离方法的比较研究被引量：8
- 2012年
- 采用平板涂布法,以青岛海区潮间带沉积物为对象进行海洋放线菌的分离方法研究。具体分析了不同样品预处理方式、稀释液、海水浓度和培养基种类等对分离效果的影响。结果表明,55℃预处理样品6 min能有效减少细菌数量,利于潮间带沉积物中放线菌的分离;以1/4林格氏溶液稀释样品、纯海水配置培养基,可以分离得到较多的放线菌;不同培养基对沉积物中放线菌的分离效果差别很大,本实验设置的M1～M9培养基中,M1、M6、M7和M8培养基的分离效果优于其他5种。
- 常显波刘文正尹琦张晓华
- 关键词：海洋沉积物放线菌
- 海洋细菌素的研究进展被引量：2
- 2012年
- 在自然环境中，有些微生物通过抑制或杀死另一种微生物的拮抗作用来获得竞争优势。有的细菌产生细菌素，可杀死与其亲缘关系相近种。细菌素通常是指由细菌分泌的、对同种或其他亲缘关系很近的细菌有抑制作用的一种蛋白类抑菌物质。细菌素的蛋白质性质以及多种明显区别于抗生素的优点，使其具有广阔的应用空间。据报道，海洋细菌中的多个属种都具有抑制其他海洋细菌或各种动植物病原菌生长的活性。海洋细菌作为发现细菌素的潜在重要来源，受到了越来越多的关注，
- 王树杉于敏张晓华
- 关键词：海洋细菌细菌素亲缘关系病原菌生长拮抗作用抑菌物质
- 四种海水样品总基因组DNA提取方法的比较研究被引量：2
- 2013年
- 采用4种不同的方法,分别提取了同一来源的50 mL、200 mL和1 000 mL海水样品的基因组DNA,利用紫外分光光度法测定DNA质量和纯度。研究发现:方法 1(使用PIPES缓冲液)和方法 2(使用TENS缓冲液)所提取的DNA,其OD260/OD280和OD260/OD230很低(不足1.4);方法 3(使用STE缓冲液)及其改进后的方法 4(使用STE缓冲液,但利用机械作用取代酶消化作用来破碎细胞)所提取DNA的两个指标都较高(超过1.6),并且方法 4所得DNA的产率是其他3种方法的1.5～2.4倍。另外,检测方法 3和方法 4所提取DNA的PCR扩增效率,结果表明所提取DNA无需纯化就能进行高效PCR扩增反应。综合以上结果,从DNA浓度、纯度及PCR扩增效率可以看出,方法 4是适合于海水样品多样性研究的一种高效DNA提取方法。
- 尹琦史晓翀董雪富冰冰刘吉文张晓华
- 关键词：微生物基因组DNA提取
- 黄海冷水团可培养细菌的多样性研究
- 2011年
- 本文研究了2008年7月黄海冷水团海域可培养细菌的多样性。AODC和DVC计数总菌数和活菌数分别为（1.34.8）×105/mL和（0.61.6）×105/mL;2216E平板以菌落计数法可培养细菌浓度为（0.562.2）×103cfu/mL。从分离到的475株中选取163株进行16S rDNA扩增,并用HhaⅠ酶进行ARDRA（扩增性rDNA限制酶切片段分析）多态性分析,取114株不同带型测序。结果显示,冷水团细菌归为4个细菌类群：变形菌门（Proteobacteria）、放线菌门（Acti-nobacteria）、厚壁菌门（Firmicutes）和拟杆菌门（Bacteroidetes）,共24个属,其中包括α-,β-,γ-变形菌纲;非冷水团细菌也归为这4个门类,共15个属,但未分离到β-变形菌纲。γ-变形菌纲在冷水团和非冷水团区域的不同深度都是优势菌群,不同的是冷水团区域α-变形菌纲比例较高（26.8%）,而非冷水团区域α-变形菌纲比例相对较低（15.6%）。这表明黄海冷水团和非冷水团区域细菌多样性都很丰富,但其群落组成和优势菌群有所不同。此外,16S rDNA测序结果表明,6株细菌可能为海洋细菌新种。
- 王红刘吉文张晓华
- 关键词：可培养细菌多样性黄海冷水团
- 青岛海区4种大型海藻可培养附生细菌多样性研究被引量：3
- 2013年
- 为研究与生物膜相关的海洋细菌的多样性,在青岛近海海域,选取黏管藻、裙带菜、囊藻和浒苔4种大型海藻,分离其附生海洋细菌。使用2216E、海水R2A、TCBS和海水琼脂4种培养基平板,分离纯化得到99株海洋细菌。16SrD-NA序列分析表明,变形菌门细菌在数量、种类等方面,均占主导地位。这些菌株绝大多数为变形菌门的γ-变形菌纲(94株)和α-变形菌纲(3株),仅有1株为放线菌门,1株为厚壁菌门。其中丰度最高的3个属分别为假交替单胞菌属(Pseudoalteromonas,22株)、弧菌属(Vibrio,20株)和盐单胞菌属(Halomonas,15株),其次为食烷菌属(Alcanivorax,9株)、肠杆菌属(Enterobacter,8株)、假单胞菌属(Pseudomonas,7株)、气单胞菌属(Aeromonas,5株)、交替单胞菌属(Alteromonas,4株),其它9个属丰度较低。本研究为进一步探讨与生物膜相关的海洋细菌的多样性及其应用奠定了基础。
- 赵锐王红史晓翀张晓华
- 关键词：生物膜海藻附生细菌
- 海洋微生物培养新技术的研究进展被引量：16
- 2009年
- 张秀明张晓华
- 关键词：海洋微生物微生物培养生物活性物质土壤放线菌
