国家高技术研究发展计划(2007AA09Z436)
- 作品数：14 被引量：52H指数：4
- 相关作者：汤顺清包磊毛萱杨宇峰黄建艳更多>>
- 相关机构：暨南大学广东省教育厅广东省农业科学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金国家教育部“211”工程更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程理学更多>>
- 受四环素调控的真核表达系统SK-Hep1细胞株的建立被引量：1
- 2012年
- 建立稳定、高效表达外源基因的SK-Hep1细胞株,以便进一步研究基因的作用。首先将调控质粒pCDNA6/TR转染SK-Hep1细胞,经潮霉素筛选得到多个稳定单克隆。各个单克隆分别扩大培养后,转染pCDNA4/TO/lacZ质粒,再经过DOX(强力霉素)诱导表达,检测β-半乳糖苷酶(β-D galaetosidase,β-gal)活性,从而筛选出高诱导水平低背景表达的SK-Hep1 tet-on细胞株。最后,再将pCDNA4/TO/c-myc质粒转染进SK-Hep1 tet-on细胞株,进一步通过Western blotting检测该系统对下游基因的表达调控。成功建立了一株受DOX调控的高诱导水平低背景表达的细胞株SK-Hep1 tet-on 10#。
- 彭晓慧毛宣汤顺清
- 关键词：强力霉素转染
- 琼脂糖-透明质酸共聚物作为胰岛素载体被引量：8
- 2009年
- 本文主要研究了一种新型的多肽药物载体材料的制备方法及其释药特征。首先氧化降解成小分子量、低凝胶温度的琼脂糖,用环氧氯丙烷活化后,与透明质酸共混接枝制备成琼脂糖-透明质酸共聚物,再用该共聚物包载胰岛素,并观察所形成微粒的形态及其释药行为。红外光谱及元素分析结果显示成功制备了琼脂糖接枝透明质酸共聚物;释药实验表明包载的胰岛素有缓释行为。因此,琼脂糖接枝透明质酸有望成为胰岛素的缓释载体。
- 黄建艳包磊毛萱叶巧巧汤顺清
- 关键词：琼脂糖透明质酸接枝胰岛素
- 大型海藻龙须菜浸出组分对中肋骨条藻的化感抑制作用(英文)被引量：18
- 2008年
- 研究了龙须菜乙醇浸出组分对中肋骨条藻的化感抑制作用。结果显示,浸出组分对中肋骨条藻产生明显抑制作用,且微藻的生物量迅速减少。当龙须菜浸出成分浓度为42mgL-1时,相对抑制率为50%,即半效应浓度(EC50)。龙须菜对赤潮藻产生明显的化感抑制作用,延缓了富营养化水体中赤潮藻的爆发,从而使龙须菜具有控制中肋骨条藻赤潮发生的潜在价值。
- 卢慧明廖小建杨宇峰徐石海
- 关键词：龙须菜中肋骨条藻化感作用富营养化
- 琼脂糖醋酸酯的制备方法与表征被引量：3
- 2010年
- 以浓硫酸为催化剂,琼脂糖与醋酸酐反应制备出琼脂糖醋酸酯。研究了反应温度等参数对取代度的影响,结果表明,50℃时取代度最大。接触角测试结果表明,琼脂糖醋酸酯较琼脂糖接触角增大,疏水性明显增强。傅里叶变换红外光谱、核磁共振碳谱证实形成了琼脂糖醋酸酯。热重分析测试表明,琼脂糖醋酸酯具有不同于琼脂糖的热特性。琼脂糖醋酸酯可作为疏水性新型可纺丝材料,可望应用于组织工程支架。
- 赵瑞芳尤玲玲汤顺清黄晙聪
- 关键词：琼脂糖取代度疏水性
- 琼脂糖的疏水化改性及生物相容性被引量：2
- 2011年
- 采用乙酸酐对琼脂糖进行疏水性改性,合成了具有生物活性的琼脂糖醋酸酯。通过红外光谱(FT-IR)、13C核磁共振(13C-NMR)、原子力显微镜和接触角仪对琼脂糖醋酸酯进行了表征。结果表明,琼脂糖C6上引入了乙酰基,随取代度增大,琼脂糖醋酸酯膜表面粗糙度增大,疏水性增强。纺成丝后在水中不溶胀,形态保持完好,吸湿率最小可达52.5%。随取代度的提高,白蛋白的吸附量升高,并有促进细胞粘附和增殖的功能。表明疏水改性琼脂糖可望作为新型组织再生支架材料。
- 尤玲玲赵瑞芳陈鹏汤顺清
- 关键词：疏水性生物相容性纺丝
- 硫酸酯化琼脂糖的抗凝血性能被引量：1
- 2010年
- 背景:多糖的硫酸酯化一直是近年来的研究热点,其中对于硫酸酯化多糖的抗凝血性能,近年来较多从取代度层面进行探讨,相对分子质量及空间结构方面的影响较为少见。目的:观察不同相对分子质量硫酸酯化琼脂糖的抗凝血性能。方法:以琼脂糖为原料,甲酰胺为分散剂,通过氯磺酸吡啶法制备了硫酸酯化琼脂糖。通过透析纯化分级,获得两种不同相对分子质量分布的琼脂糖硫酸酯。采用人体血浆的部分凝血活酶时间、凝血酶原时间指标分别对它们的抗凝血性能进行了研究。结果与结论:可以获得取代度及取代位置相似,具有不同相对分子质量分布的硫酸酯化琼脂糖。对凝血指标的化验结果证明,在一定范围内,相对分子质量大的产物的抗凝血活性大于相对分子质量小的产物。结果提示相对分子质量对硫酸酯化琼脂糖的抗凝血活性有重要的影响。
- 揭油平尤玲玲梁婉爱汤顺清
- 关键词：相对分子质量抗凝血部分凝血活酶时间凝血酶原时间生物材料
- 龙须菜对小鼠脾脏淋巴细胞内TGF-β表达的影响
- 2009年
- 目的研究大型海藻龙须菜提取物对小鼠脾脏淋巴细胞内TGF-β表达的影响,并初探其免疫调控作用机制。方法以大型海藻龙须菜为实验材料,采用流式细胞术对Balb/c小鼠脾脏淋巴细胞进行表型分析,检测了不同浓度龙须菜提取物共培养条件下CD45+细胞内转化生长因子(TGF-β)表达水平的变化,并对产生TGF-β的细胞进行身份鉴定。结果龙须菜提取物不同反应浓度处理条件下Balb/c小鼠脾脏淋巴细胞中CD45+CD83+/CD45+及CD45+CD80+/CD45+细胞百分率与对照组比较无显著性差异(P>0.05),但CD45+TGF-β/CD45+细胞百分率与龙须菜提取物反应液浓度则呈明显的线性剂量依赖关系(r2=0.8145,P<0.05),最适反应相对百分浓度为2%。TGF-β主要来源于CD3+T细胞(约占35.4%)和CD49b+NK细胞(约占46.6%)。结论提示龙须菜提取物具有通过TGF-β进行免疫抑制或生物调节的功能。
- 余江林羿狄静芳杨宇峰
- 关键词：龙须菜CD45TGF-Β流式细胞仪
- 受强力霉素调控的真核表达系统RAW264.7 Tet-lon细胞株的建立
- 2011年
- 目的:利用Tet-lon诱导表达调控系统构建可以用强力霉素调控表达的RAW264.7 Tet-lon细胞株,探讨目的基因NF-kB的作用。方法:将调控质粒pCDNA6/TR转染RAW264.7细胞,经潮霉素筛选得到稳定单克隆。单克隆扩大培养后,转染pCDNA4/TO/lacZ质粒,再经过强力霉素诱导表达,检测β-半乳糖苷酶(β-gal)活性,筛选出受强力霉素调控的高诱导水平、低背景表达的RAW264.7 Tet-on细胞株。结果:成功建立一株受强力霉素调控的高诱导水平、低背景表达的细胞株RAW264.7 Tet-on 3,并且强力霉素对下游基因β-gal的诱导效果具有浓度和时间依赖性,强力霉素的最佳诱导时间为24 h,强力霉素的最佳诱导质量浓度为1μg/mL。结论:已获得受强力霉素调控的细胞株。
- 彭晓慧毛萱汤顺清
- 关键词：强力霉素
- 琼脂糖-透明质酸共聚物/胰岛素的制备及释药行为被引量：3
- 2008年
- 以琼脂糖-透明质酸共聚物作为多肽载体，与胰岛素复合制备琼脂糖透明质酸共聚物／胰岛素微粒，在不同的pH介质中（1．2、6．8、7．4）进行体外药物释放行为实验，用药物动力模型拟合探讨其释药机理．用原子力显微镜、Zeta电位仪以及红外光谱仪等现代测试技术对其结构与性能进行了表征．实验结果表明：琼脂糖透明质酸共聚物在pH3以上带负电荷，胰岛素与琼脂糖透明质酸共聚物在pH3～5．4形成聚离子复合物，得到的微粒大小为2-10μm；复合物微粒在pH1．2和pH7．4溶液中具有突释效应，而在pH6．8溶液中的释放效果较为理想，Weibull分布可较好地描述了该复合物微粒在不同pH环境下体外释药规律．
- 黄建艳包磊汤顺清
- 关键词：胰岛素
- 硅酸甘油二酯的水解及凝胶化行为
- 2010年
- 制备了硅溶胶前驱体硅酸甘油二酯(diglycerol silicate,DGS),利用动态光散射跟踪法考察了其水解和凝胶过程。结果表明:所制备的DGS纯度较高,水解后形成的硅溶胶粒子zeta电位为-12.56mV。离子强度、蛋白种类及浓度均对硅溶胶-凝胶体系的胶凝时间和凝胶状态有影响。在凝胶温度为30℃,DGS质量分数为10%,离子浓度为2mmol/L,蛋白质量分数为0.13%时,可获得均匀性较好的凝胶体系,该体系凝胶时间为30min。DGS水解产物的自相关函数变化和散射光强变化均为典型硅凝胶体系的变化。该体系可作为维持生物大分子活性的理想体系。
- 梁婉爱毛萱周平陈光炜汤顺清
- 关键词：动态光散射
