国家自然科学基金(30471239) 作品数:21 被引量:150 H指数:7 相关作者: 杨公社 李惠侠 林亚秋 张国华 屈长青 更多>> 相关机构: 西北农林科技大学 西南民族大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家重点基础研究发展计划 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 医药卫生 轻工技术与工程 更多>>
大黄素对大鼠前体脂肪细胞增殖与分化的影响 被引量:14 2007年 目的:研究大黄素(emodin,EMO)对大鼠前体脂肪细胞增殖与分化的影响。方法:分离培养大鼠前体脂肪细胞,按照EMO添加剂量不同,把培养板中接种细胞的培养孔随机分为0,5,10,20,40,80,160μmol·L^-1处理组;采用MTT比色法和流式细胞术测定EMO对大鼠前体脂肪细胞增殖的影响;采用油红O染色提取法,检测脂肪细胞内甘油三酯积聚量的变化;采用形态学观察,检测前体脂肪细胞分化的形态学变化。结果:20~160μmol·L^-1的EMO对大鼠前体脂肪细胞的增殖与分化呈剂量和时间依赖性地抑制作用,并可在一定程度上诱发前体脂肪细胞凋亡。结论:EMO具有潜在的减肥降脂作用。 杨永青 杨公社关键词:大黄素 前体脂肪细胞 增殖 分化 血清剥夺对原代培养大鼠脂肪细胞脂代谢相关基因转录表达的影响 被引量:2 2007年 利用血清剥夺/血清培养实验模型,采用油红O染色提取法、甘油试剂盒和RT-PCR,诱导和测定了大鼠附睾脂肪垫分离和培养的脂肪细胞生脂和脂解及其相关酶和转录因子mRNA水平的变化,探讨脂肪细胞脂代谢通路中关键酶和转录因子基因转录表达的规律。结果显示,依血清剥夺时间延长,脂肪细胞激素敏感脂酶(HSL)mRNA表达水平显著提高(P<0.05),恢复血清培养后,表达水平显著降低(P<0.05),与脂解活性的变化一致;脂肪生成及生脂相关基因脂肪酸合酶(FAS)、乙酰辅酶A羧化酶(ACC1)和碳水化合物反应元件结合蛋白(ChREBP)mRNA表达水平依血清剥夺持续时间明显下降(P<0.05),恢复血清培养,随培养时间延长显著提高(P<0.05);血清剥夺显著降低固醇调控元件结合蛋白(SREBP)-1c mRNA水平,但血清剥夺72 h与36 h无明显差异(P>0.05);血清剥夺72 h后恢复血清培养36 h和72 h,SREBP-1c mRNA的表达水平没有显著性变化(P>0.05)。结果表明,生脂及FAS和ACC1表达与ChREBP mRNA水平一致,但与SREBP-1c不一致,提示ChREBP与成熟脂肪细胞生脂基因转录激活可能有更密切的关系,但尚待在蛋白水平进一步证实。 卢建雄 杨公社 陈粉粉关键词:脂肪细胞 脂解 转录 猪脂肪基质细胞成骨与成脂分化潜能的研究 被引量:5 2005年 目的:探索猪脂肪基质细胞体外培养和向成骨与脂肪细胞分化的条件。方法:常规方法培养猪脂肪基质细胞,分别向成骨细胞与脂肪细胞进行诱导,应用免疫组化(碱性磷酸酶法、茜素红)及油红O染色对诱导分化的细胞进行鉴定。结果:在体外培养条件下,猪的脂肪基质细胞呈成纤维样,生长旺盛,在一定的条件下,可分别被诱导分化为成骨细胞与脂肪细胞,向成骨分化的细胞表达碱性磷酸酶,在培养皿中可形成钙化斑。而在向脂肪细胞诱导分化过程中,细胞中可见有小脂滴生成,用油红O染色呈橘红色。结论:脂肪基质细胞是一种混合细胞,除了能向脂肪细胞分化外,在一定的诱导条件下,也能向成骨细胞分化。 屈长青 张国华 赵丽丽 杨公社关键词:脂肪基质细胞 成骨细胞 脂肪细胞 白藜芦醇对猪原代前体脂肪细胞的增殖与分化及Sirt1基因转录表达时序的影响 被引量:11 2006年 分别以0μmol/L(对照组)、10μmol/L(低剂量组),20μmol/L(中等剂量组),513μmol/L,100μmol/L(高剂量组)的白藜芦醇(Resveratrol,RES)处理体外培养1~3日龄健康仔猪前体脂肪细胞,采用MTT比色法检测细胞活性及增殖状况:油红O染色化学比色法定量分析细胞内脂肪生成及细胞分化程度;RT-PCR法分析Sirt1(sirtuin1)mRNA表达情况,探讨Sirt1对猪前体脂肪细胞增殖分化的影响及其分子机制。结果表明,脂肪细胞经RES处理后,各组MTT和油红O染色测得的光密度值(OD值)均低于对照组,50μmol/L,100/μmol/L组在96~120h作用极显著(P〈0.01),与中低剂量组差异显著(P〈0.05);以20μmol/L,100μmol/LRES处理细胞后,Sirt1 mRNA表达量随细胞分化的进行而逐渐升高,100/μmol/L组均显著高于对照组和20μmol/L组(P〈0.05)。RES对猪前体脂肪细胞增殖分化均有一定抑制作用,高剂量RES(513μmol/L和100μmol/L)可显著减少细胞内脂肪的合成、抑制脂肪细胞增殖与分化,Sirt1 mRNA表达量显著升高可能是RES抑制细胞分化的重要原因之一。 庞卫军 孙世铎 白亮 杨燕军 杨公社关键词:白藜芦醇 前体脂肪细胞 增殖 分化 SIRT1 全反式维甲酸对大鼠前体脂肪细胞增殖与分化的影响 被引量:5 2005年 利用MTT比色检测不同浓度的全反式维甲酸(all trans Retinoic Acid ATRA)对大鼠前体脂肪细胞增殖的影响,采用油红O染色和吖啶橙染色观察大鼠前体脂肪细胞分化的形态变化;采用油红O染色提取法分析不同浓度ATRA对大鼠前体脂肪细胞分化的影响。MTT比色结果显示,低浓度(10-8~10-7mol/L)的ATRA对前体脂肪细胞的增殖具有促进作用(P<0101),而高浓度(10-6~10-4mol/L)的ATRA则抑制前体脂肪细胞的增殖(P<0101)。油红O染色和吖啶橙染色结果表明,前体脂肪细胞分化成脂肪细胞后,细胞内充满脂滴,由梭形变成椭圆形;油红O染色提取法结果显示高浓度(10-6~10-4mol/L)的ATRA能够显著抑制前体脂肪细胞的分化(P<0101),而低浓度(10-8~10-7mol/L)的ATAR却显著促进前体脂肪细胞的分化(P<0101)。 陈国柱 林亚秋 庞卫军 杨公社关键词:全反式维甲酸 前体脂肪细胞 脂肪细胞分化 MTT 吖啶橙 用油 9-顺式维甲酸在原代培养猪前体脂肪细胞分化中的调控作用 被引量:7 2007年 采用RT-PCR、油红O染色法、油红O染色提取法和分光光度计法,探讨不同浓度9-顺式维甲酸(9-cisRA)(0-10$mol/L)对体外原代培养猪前体脂肪细胞分化的影响及其可能机制。结果表明,9-cisRA在脂肪细胞分化中因浓度不同而发挥不同作用。低浓度9-cisRA(0-10nmol/L)促进前体脂肪细胞分化,并上调RXRα、PPARγmRNA表达,增加前体脂肪细胞分化标志酶3-磷酸甘油脱氢酶(glyc-erol-3-phosphate dehydrogenase,GPDH)的活性;高浓度9-cisRA(100nmol/L-10$mol/L)则抑制前体脂肪细胞分化,并下调RXRα、PPARγmRNA表达,减少GPDH的活性。结果提示9-cisRA在猪前体脂肪细胞分化中,可能通过调控RXRα和PPARγ基因表达变化来发挥其促进或抑制作用。 林亚秋 庄合林 杨公社关键词:脂肪细胞 分化 9-顺式维甲酸 二十二碳六烯酸对大鼠脂肪细胞增殖分化的影响 被引量:8 2005年 体外培养大鼠脂肪细胞,分别以0μmolL(对照组)、40μmolL(低剂量组)和160μmolL(高剂量组)的二十二碳六烯酸(DHA)处理细胞。采用台盼蓝排斥试验和MTT比色法检测细胞活性及增殖状况;油红O染色化学比色法定量分析细胞内脂肪生成及细胞分化程度;逆转录聚合酶链反应(RT_PCR)分析过氧化物酶增殖物激活受体γ2(PPARγ2)mRNA表达情况,探讨DHA对前体脂肪细胞增殖分化的影响及其可能机制。结果显示,各组细胞活力及MTT测得的光密度值(OD值)均低于对照组,160μmolL组在60~72h作用显著(P<0.05);脂肪细胞经DHA处理后,160μmolL组细胞油红O染色的OD值及PPARγ2mRNA表达量均显著下降(P<0.01)。以上结果说明,DHA对脂肪细胞增殖分化均有一定抑制作用,高剂量DHA(160μmolL)可显著减少细胞内脂肪的合成、抑制脂肪细胞分化,PPARγ2mRNA表达量的下降可能是DHA抑制细胞分化的部分原因。 李惠侠 杨公社关键词:二十二碳六烯酸 脂肪细胞 增殖 分化 黄芩素对猪前体脂肪细胞增殖分化的影响 被引量:9 2006年 研究黄芩素(BAI)对猪前体脂肪细胞增殖分化的影响,并探讨其可能的作用机制。原代培养猪前体脂肪细胞,采用油红O染色观察细胞分化的形态学变化;MTT检测细胞增殖状况;油红O染色提取定量分析细胞内脂肪生成及细胞分化程度;分光光度法测定脂肪酸合酶(FAS)的活性;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测分化特异基因过氧化物酶体增殖物激活受体γ2(PPARγ2)mRNA表达变化。结果显示,前体脂肪细胞在分化成脂肪细胞的过程中,其形态由梭形变成椭圆形、圆形,细胞内充满大小不一的脂滴;BAI浓度在160~640μmol/L时显著抑制其增殖(P<0.05)、BAI浓度为40~320μmol/L时显著抑制PPARγ2mRNA表达和FAS的活性,并抑制细胞分化(P<0.05)。以上结果说明,BAI对前体脂肪细胞增殖分化均有一定抑制作用,BAI可能通过抑制PPARγ2mRNA表达和降低FAS活性,从而抑制猪前体脂肪细胞分化。 卢荣华 李影 张立杰 杨公社关键词:黄芩素 前体脂肪细胞 增殖 分化 L-Gln对大鼠前体脂肪细胞的影响 2005年 设置养分贮存损失状态不同的4类培养液,分别添加一定浓度梯度的L-谷氨酰胺(L-G lu tam ine,L-G ln)培养大鼠前体脂肪细胞。通过形态学观察、M TT比色、油红O染色提取法,比较各组细胞形态及增殖与分化的效果。结果表明,添加0 mm o l/L L-G ln的新鲜培养液和配制后4℃冷藏20 d,再添加0.685 mm o l/L L-G ln的培养液,均较利于前体脂肪细胞的增殖与分化;配制后4℃冷藏90 d的培养液,对前体脂肪细胞培养效果较差,添加L-G ln也不能使培养效果得到改善。另外,启封后的M 199和胎牛血清(F eta l C a lf Serum,FCS)分别冷藏不宜超过90 d。说明及时满足培养液中L-G ln的需求量,可使前体脂肪细胞达到较好的增殖与分化状态。 杨永青 杨公社关键词:培养液 前体脂肪细胞 n-3PUFA调节脂代谢机制的研究进展 被引量:6 2005年 日粮中的n-3PUFA具有多种作用,除了调节质膜组成和影响细胞信号之外,同时还涉及多 种与脂代谢有关酶与蛋白的基因表达,如:PPARα、SREBPs、LXR等,通过它们来影响靶基因(如: ACO-A、FAS等)的表达,从而起到调控脂肪沉积的作用。 屈长青 张国华 赵丽丽 杨公社关键词:脂肪代谢