中国农业科学院油料作物研究所所长基金(200602)
- 作品数：2 被引量：11H指数：2
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- 相关机构：华中农业大学中国农业科学院油料作物研究所更多>>
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- 不同含油量大豆成熟期胚抑制消减cDNA文库构建及其差异表达基因分析被引量：2
- 2007年
- 利用抑制性消减杂交(suppression subtractive hybridization,SSH)技术,以高含油量大豆品种中豆32和低含油量大豆品种油春02-6受精后36d胚为实验材料构建消减cDNA文库。文库的插入片段集中在500bp左右,挑取766个克隆进行PCR筛选获得700个阳性克隆,经过点杂交筛选后选择了575个阳性克隆进行测序。经过同源性比对归并后得到237个差异表达基因,除10个未知基因外,其余涉及到蛋白贮藏、蛋白质降解、激素调节等多个方面。本文还对部分可能与油脂合成相关的差异表达基因进行了RT-PCR半定量和荧光定量PCR检测,并简要讨论了它们的功能,为进一步研究这些基因在大豆油脂合成过程中的作用提供依据。
- 程金朋陈波徐有明周新安卢长明魏文辉
- 关键词：大豆抑制性消减杂交CDNA文库
- 大豆种子形态建成期与成熟期正反抑制消减文库构建及差异表达基因分析被引量：9
- 2008年
- 为了分析大豆种子形态建成期与成熟期基因差异表达情况,获得在发育过程中可能影响大豆种子形态建成及蛋白质、油脂合成代谢等调控的重要基因,利用抑制性消减杂交技术(suppression subtractive hybridization,SSH)构建了高含油量大豆品种中豆32开花后15天胚和36天胚正反消减文库.从正反消减文库中挑取克隆,经PCR及点杂交筛选后,从15天胚消减库(正向)和36天胚消减库(反向)中分别挑选了476个和471个有效克隆测序,经BLAST比对归并后,根据测序结果设计基因特异引物,通过半定量PCR和荧光定量PCR检测了13个差异表达基因,其中正向库5个,反向库8个.对这些差异表达基因的组织特异性检测表明,仅发现4-662(蔗糖结合蛋白基因)在胚中特异表达.对这些基因在大豆种子发育过程中的作用进行了讨论.
- 颜克亮陈波姚家玲周新安张会芳魏文辉
- 关键词：抑制消减杂交大豆种子发育实时定量PCR
