国家自然科学基金(10502037)
- 作品数：4 被引量：18H指数：2
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- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- 口腔颌面创伤外科学教学改革探讨被引量：1
- 2012年
- 随着我国交通事故的逐渐增多,颌面外科外伤患者数量不断增加,病情也有复杂加重的趋势。为了提高临床教学的质量,必须在临床教学方法和形式上进行改革,综合提高医学生理论联系实践的能力,加强医德医风教育,建立医学伦理观,注重法律意识的增强,提高医患沟通技能,其最终目的是提高医疗教学质量,确保医疗实践安全,为患者提供优质精良的医疗服务。本文对口腔颌面外科外伤诊治中深化教学的要点作了几点探讨。
- 龙洁孙晶晶刘磊汤炜郑晓辉
- 关键词：临床教学外伤患者口腔颌面外科
- bFGF和BMP-2联合应用对体外培养兔骨髓间充质干细胞增殖与骨向分化的影响被引量：12
- 2008年
- 目的:研究碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和骨形成蛋白-2(BMP-2)联合应用对体外培养兔骨髓间充质干细胞(BMSCs)增殖与骨向分化的影响。方法:体外培养兔骨髓间充质干细胞,在第2代细胞培养液中加入不同浓度的bFGF和BMP-2,依据加入bFGF和BMP-2浓度的不同分为5个实验组(组1:80 ng/ml bFGF;组2:80 ng/ml BMP-2;组3:30 ng/ml bFGF+30 ng/ml BMP-2;组4:50 ng/ml bFGF+50ng/ml BMP-2;组5:80 ng/ml bFGF+80 ng/ml BMP-2)和对照组(不加任何生长因子),采用绘制生长曲线,四唑盐比色法(MTT),碱性磷酸酶(ALP)活性检测法和碱性磷酸酶(ALP)免疫组化染色法比较各组间差异,观察不同浓度的bFGF和BMP-2联合应用对免骨髓间充质干细胞增殖与骨向分化的影响。结果:与对照组相比,单独应用80 ng/ml bFGF可显著促进BMSCs的增殖,但对BMSCs的骨向分化显著抑制;单独应用80 ng/ml BMP-2对BMSCs的增殖和骨向分化均有促进作用;30 ng/ml bFGF+30 ng/ml BMP-2、50 ng/ml bFGF+50 ng/ml BMP-2和80 ng/ml bFGF+80 ng/ml BMP-2可显著地促进BMSCs增殖和促进BMSCs的骨向分化,且呈正性剂量-效应关系,联合应用两种生长因子较二者单独应用促细胞增殖及骨向分化的效果更为显著。结论:一定浓度范围内,bFGF和BMP-2的联合应用促进BMSCs增殖的同时也促进其骨向分化,两者对BMSCs有明显的协同增强的生物学效应。
- 李鹏龙洁汤炜蒋红梅田卫东刘磊林云锋王杭
- 关键词：碱性成纤维细胞生长因子人骨形成蛋白-2骨髓间充质干细胞
- 采用Gateway^(TM)技术构建人骨形态发生蛋白-2基因重组腺病毒载体被引量：4
- 2008年
- 目的:采用基于attLXattR的λ噬菌体位点特异性重组系统的Gateway^(TM)技术构建人骨形态发生蛋白-2基因重组腺病毒载体(Ad-hBMP-2)。方法:从pcDNA3.1质粒中获取目的基因hBMP-2片段,连入带attL1、attL2位点的入门载体pENTRTM11中,形成入门克隆,将入门克隆与带attR1、attR2位点的目的载体Ad/CMV/V5-DEST在高效重组酶作用下发生体外重组形成表达克隆ad-BMP-2,经鉴定将ad-BMP-2线性化后转入293A细胞包装,通过细胞裂解法获得人骨形态发生蛋白-2的基因重组腺病毒珠Ad-hBMP-2,将其扩增,采用western blotting技术分析目的蛋白表达。结果:经酶切及测序证实目的基因BMP-2片段按正确方向重组入目的载体中,带BMP-2的目的载体在293A细胞中包装成功,获得成熟的病毒颗粒,测得病毒滴度为2.5×10~9pfu/ml,western blotting结果证实Ad-hBMP-2在293A细胞中高效表达hBMP-2蛋白,结论:本实验首次利用基于λ噬菌体的位点特异性重组系统的Gateway^(TM)技术成功构建了Ad-hBMP-2,该技术与传统构建方法比较具有高效性和灵活性,为进一步研究BMP-2的生理功能和利用BMP-2进行骨基因治疗奠定了实验基础。
- 蒋红梅龙洁汤炜田卫东刘磊林云锋王杭李鹏
- 关键词：骨形态发生蛋白-2重组腺病毒
- 张力对成骨样细胞NF-κBp65表达活性的影响被引量：1
- 2008年
- 探讨采用应变值相同，但日加力次数不同的张力加载方式对成骨样细胞NF-κBp65表达的影响。将成骨样细胞株MG-63进行体外传代培养，并接种在四点弯曲细胞力学加载仪的细胞培养板上，对细胞进行张力刺激：将接种好的细胞按日加力次数的不同随机分为4组，每组4个样本，1组为阴性对照组，2～4组样本分别施以强度为2000μ strain，频率为0．5Hz的张力刺激，施力次数分别为1、2、4次／d，加力时间均为60min／d，共加力2d。各组样本均在加力后置于含10％小牛血清DMEM培养液的专用培养皿中继续培养24h，收集细胞培养板与对照组同时行NF-κBp65免疫组化染色，分别测定在力学强度相同、作用时间相同而日加力次数不同的加载条件下，成骨样细胞MG-63对NF-κBp65的表达状况并进行组间比较。结果发现各组细胞均可见NF-κBp65阳性表达，各组细胞的阳性表达率有显著性差异，各加力组细胞阳性表达率显著高于对照组，4次／d加力组细胞阳性表达率显著高于另两实验组，2次／d加力组细胞阳性表达率显著高于1次／d加力组。表明在相同强度的张力作用下，随着日施加张力次数的增加，成骨样细胞MG-63中NF-κB的表达活性逐步增强，提示在力学强度相同的条件下，采用较高日加载次数的加载手段，能更有效地提高成骨细胞的转录水平。
- 龙洁田卫东樊瑜波冯帆李声伟
- 关键词：成骨样细胞NF-ΚBP65
