国家自然科学基金(81274023)
- 作品数：11 被引量：87H指数：5
- 相关作者：陈平张绍鹏杨中林金健吴亚运更多>>
- 相关机构：武汉轻工大学中国药科大学澳门大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金澳门特别行政区科学技术发展基金江苏高校优势学科建设工程资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学化学工程更多>>
- 竹节参皂苷及其组合物的降脂活性比较研究被引量：4
- 2020年
- 目的:比较竹节参中4种主要皂苷成分竹节参皂苷Ⅴ、伪人参皂苷RT1、竹节参皂苷Ⅳ、竹节参皂苷Ⅳa及其组合物的降脂活性。方法:采用油酸诱导的HepG2细胞脂肪堆积模型,以辛伐他汀和血脂康为阳性对照,以三酰甘油(TG)清除率为指标,考察竹节参皂苷Ⅴ、伪人参皂苷RT1、竹节参皂苷Ⅳ、竹节参皂苷Ⅳa及其不同比例组合物的体外降脂活性差异。构建蛋黄乳诱导的小鼠急性高脂血症模型,以辛伐他汀和血脂康为阳性对照,以血清TG、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)为指标,比较4种皂苷成分组合物与竹节参总皂苷的体内降脂作用。结果:体外实验结果显示,在相同剂量下,4种皂苷成分组合物的降脂活性优于各竹节参皂苷单体化合物和竹节参总皂苷,TG清除率显著升高(P<0.05,P<0.01);其中竹节参皂苷Ⅴ、伪人参皂苷RT1、竹节参皂苷Ⅳ、竹节参皂苷Ⅳa按2∶1∶1∶1比例组合物的降脂作用最为显著。体内实验结果显示,上述配比的竹节参皂苷组合物可显著降低急性高脂血症小鼠血清TC、TG、LDL-C水平(P<0.05,P<0.01),升高HDL-C水平(P<0.05,P<0.01),且其降脂作用优于竹节参总皂苷。结论:竹节参皂苷Ⅴ、伪人参皂苷RT1、竹节参皂苷Ⅳ、竹节参皂苷Ⅳa按2∶1∶1∶1组合可发挥协同降脂作用。
- 杨小林张春凤陈平王振中肖伟王如锋
- 关键词：组合物降脂HEPG2细胞小鼠
- 竹节参皂苷Ⅴ对油酸诱导HepG2细胞脂肪堆积的影响作用被引量：3
- 2017年
- 目的探索竹节参皂苷Ⅴ的降脂活性。方法采用油酸诱导Hep G2脂肪堆积细胞模型,采用试剂盒测定甘油三酯(TG)含量,以TG的含量变化为指标,评价竹节参皂苷Ⅴ的降脂活性。结果与模型组比较,25μg·m L^(-1)~500μg·m L^(-1)浓度范围内竹节参皂苷Ⅴ给药组降低TG含量的作用具有极显著性差异(P<0.01),显示竹节参皂苷Ⅴ具有降低TG的活性作用。结论竹节参皂苷Ⅴ具有显著性的体外降脂活性。
- 侯晓琳周培培杨小林陈平李振麟邓细龙杨中林张春凤
- 关键词：HEPG2细胞TG
- 珠子参β-香树素合成酶基因的克隆和生物信息学分析被引量：10
- 2017年
- β-香树素合成酶(beta-amyrin synthaseβAS)是定向分流齐墩果烷型皂苷和达玛烷型皂苷的限速酶,对药用植物三萜皂苷的生物合成具有重要的调控作用。基于珠子参转录组数据中βAS转录本序列设计引物,利用RT-PCR方法从珠子参根状茎中克隆得到βAS基因全长c DNA序列,命名为pjβAS。经测序鉴定该基因长度为2 655 bp,包含一个2 286 bp的完整开放阅读框,编码761个氨基酸,在Gen Bank数据库的登录号为KX254566。生物信息学分析显示,其编码蛋白分子量为87.90 k D,理论等电点(p I)5.84,不含跨膜区,为非分泌蛋白,含有38处磷酸化位点,主要于叶绿体和内质网中发挥生理作用;二级结构预测发现其α-螺旋占39.82%、延伸链16.56%、β-转角10.38%、无规则卷曲33.24%,具有DCTAE、QW(QXXXXXW)和MWCRCY3个氧化鲨烯环化酶(OCS)基因家族特征保守基序;pjβAS蛋白与竹节参(AKN23431.1)序列的一致性为100%,系统进化分析中与竹节参(AKN23431.1)、西洋参(AGG09939.1)、柴胡(ABY90140.2)划为同一分支。通过实时荧光定量PCR分析pjβAS在珠子参不同组织中的相对表达量,发现pjβAS基因在花、叶、茎、根状茎中均有表达,在叶中表达量最高,根状茎中表达量最低。
- 吴亚运赵小龙陈平张绍鹏
- 关键词：珠子参三萜皂苷基因克隆
- 羽叶三七的转录组测序与三萜皂苷生物合成的关键酶基因的识别被引量：10
- 2017年
- 羽叶三七是五加科人参属的名贵药材,三萜皂苷为羽叶三七最主要的活性成分。为了探索羽叶三七根茎中皂苷物质生物合成的分子基础,采用Illumina Hi Seq 2000高通量测序获得羽叶三七根茎的转录组数据;使用Trinity和TGICL软件实现Uni Gene的de novo拼接;基于BLAST完成Uni Gene的蛋白功能注释、KOG功能注释、GO分类和KEGG代谢通路分析。最终通过de novo拼接注释得到Uni Gene 62 240个。研究发现,羽叶三七根茎部表达的26个Uni Gene与三萜碳环骨架合成相关;三萜合成通路中的关键酶FPS、SS、SE等,分别有11 114个Uni Gene。该研究发现的三萜皂苷合成相关候选基因对于阐明羽叶三七三萜皂苷合成方式研究提供了理论基础。
- 黄勋金健余洁韩喆闫祺陈平
- 关键词：转录组测序
- 竹节参对MC3T3-E1成骨样细胞增殖与分化的影响被引量：1
- 2013年
- 目的:研究竹节参不同提取物对体外培养成骨样细胞(MC3T3-E1)增殖、分化作用的影响。方法:采用MC3T3-E1细胞为体外药物筛选的细胞模型,用MTT法测定药物对成骨细胞的增殖作用,碱性磷酸酶(ALP)试剂盒测定ALP的活性,考察竹节参不同提取物对MC3T3-E1细胞增殖、分化作用的影响。结果:10-1 mg/mL的竹节参水提物和10-4 mg/mL的95%乙醇提取物能显著促进MC3T3-E1细胞的增殖和分化(P<0.05)。结论:一定浓度的竹节参水提物和95%乙醇提取物能显著促进MC3T3-E1细胞的增殖和分化,该药物具有开发抗骨质疏松药物的潜力。
- 朱盼盼李飞陈平杨中林
- 关键词：竹节参MC3T3-E1增殖分化
- 人参皂苷Rb1对油酸诱导HepG2细胞脂肪堆积的影响作用被引量：7
- 2013年
- 通过建立体外肝细胞脂肪堆积模型评价人参皂苷Rb1清除肝细胞脂肪堆积的能力。方法:1 mmol.L-1油酸诱导建立HepG2细胞脂肪堆积模型,从噻唑兰染色吸光度(MTT值)、甘油三酯(TG值)、细胞内脂滴形态3方面评价人参皂苷Rb1的作用。结果:人参皂苷Rb1可明显减轻细胞内脂质堆积现象,显著降低细胞中TG含量,其中100μg.mL-1人参皂苷Rb1对TG的清除率达37.9%。结论:人参皂苷Rb1具有良好的体外降脂活性,对脂肪肝有较好的预防效果。
- 陈静祁东利张春风陈平杨中林
- 关键词：人参皂苷RB1HEPG2细胞甘油三酯脂肪堆积
- 珠子参多糖结构的初步表征和抗补体活性研究被引量：3
- 2016年
- 采用水提醇沉法提取珠子参根茎中的粗多糖,经活性炭脱除色素、Sevage法脱除蛋白质后得到珠子参精制多糖。苯酚硫酸法测定珠子参多糖的含量、高效液相色谱法(HPLCGPC)测定其相对分子量、红外光谱法对珠子参多糖的结构进行分析并采用细胞溶血法对经典途径抗补体活性进行研究。结果:精制后的珠子参多糖含量约为92.4%,相对分子质量为1.25×104Da;红外光谱结果表明:珠子参多糖具有明显的多糖特征峰;抗补体实验表明珠子参多糖具有良好的抗补体活性。
- 杨涛陈平
- 关键词：抗补体活性
- 珍稀药用植物珠子参的转录组测序及分析被引量：26
- 2015年
- 药用植物珠子参的根茎在中国西南区域已有上千年的药用历史,三萜皂苷为珠子参最主要的活性成分。为了探索珠子参根茎中皂苷物质生物合成的分子基础,该文采用Illumina Hi Seq 2000高通量测序获得珠子参根茎的转录组数据;使用Trinity和TGICL软件实现Unigene的de novo拼接;基于BLAST完成Unigene的蛋白功能注释、KOG功能注释、GO分类和KEGG代谢通路分析。最终获得了短读序15.6 Gb,通过de novo拼接注释得到Unigene 62 240个。研究发现,珠子参根茎部表达的19个Unigene与三萜碳环骨架合成相关;69个Unigene与介导三萜碳环骨架的氧化和羟基化等修饰的CYP450相关,18个Unigene与负责三萜碳环骨架的糖基化的糖基化转移酶相关。该研究发现的三萜皂苷合成相关候选基因对于阐明珠子参三萜皂苷合成方式研究提供了重要的基础。
- 张绍鹏金健胡炳雄吴亚运闫祺曾万勇郑用琏张西峰陈平
- 关键词：珠子参转录组三萜皂苷
- 珍稀药用植物竹节参SRAP-PCR反应体系的构建与优化被引量：1
- 2015年
- 人参属重要的药用植物竹节参(Panax japonicus C.A.Mey)野生资源已近濒危,开展其遗传多样性研究对于资源保护和可持续利用具有重要意义。研究构建并优化了竹节参DNA的SRAP-PCR扩增体系。以竹节参根茎为材料,对PCR反应体系中的d NTPs、DNA模板、引物、Taq DNA聚合酶浓度和复性第二阶段的退火温度等条件进行探索和研究,得到了能稳定扩增竹节参基因组的最佳反应体系(25μl):DNA 40ng,d NTPs 0.2 mmol/L,Primer 0.36μmol/L,10×PCR Buffer 2.5 ul,Taq DNA polymerase 2U,退火温度50℃。进一步检测了随机组合的24对引物,进行扩增,得到了2对带型清楚、重复性较好的引物Me1/Em5和Me3/Em1。以这2对引物对10个不同产地竹节参DNA样品进行SRAP-PCR扩增。产物的电泳图谱表明,竹节参不同产地的DNA谱带多态性丰富,带型清晰,重复性好。说明建立的该SRAP-PCR反应体系稳定可靠,为利用SRAP分子标记技术研究竹节参的植物遗传多样性奠定了工作基础。
- 宋佳张绍鹏孙巧李天佩曾万勇陈平
- 关键词：竹节参SRAP-PCR反应体系
- 竹节参化学成分、药理活性及分析方法研究进展被引量：32
- 2016年
- 对关于竹节参的化学成分、药理活性及分析方法的文献进行了归纳和总结。竹节参主要化学成分为三萜皂苷,其中齐墩果烷型皂苷含量最高;药理活性包括对中枢神经系统、消化系统、心脑血管系统以及免疫系统等方面的作用;分析方法研究主要为薄层色谱法、紫外分光光度法以及高效液相色谱法等。
- 武秋爽陈平张庆文
- 关键词：竹节参化学成分药理活性分析方法
