浙江省科技攻关计划(021102536) 作品数:23 被引量:218 H指数:10 相关作者: 曹家树 余小林 叶纨芝 向珣 崔辉梅 更多>> 相关机构: 浙江大学 北京农业生物技术研究中心 福建省农业科学院 更多>> 发文基金: 浙江省科技攻关计划 国家自然科学基金 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
萝卜RsCYP86MF基因cDNA全序列克隆及结构特征分析 被引量:4 2005年 本研究通过设计保守的基因特异引物,运用SMARTRACERT-PCR技术从‘圆白’萝卜中 获得一个细胞色素P450基因,命名为RsCYP86MF,其cDNA全长1818bp,含有1581bp的完整开放阅读 框,编码526个氨基酸,该基因编码的蛋白序列与白菜的细胞色素P450基因编码的氨基酸序列同源性高达 90%,且有很高的功能区段保守性;对其可能编码的蛋白质二级结构进行预测发现,该蛋白质具有细胞色 素P450典型的保守结构域FNAGPRLCIG,及N-糖基化位点等结构域。 王玲平 曹家树 叶纨芝 向珣 余小林关键词:萝卜 CDNA 克隆 榨菜子叶和带柄子叶再生植株的研究 被引量:11 2005年 以榨菜子叶及带柄子叶等为外植体,在添加不同激素的MS培养基上,经不定芽诱导,不定芽伸长,生根等步骤,获得了完整的再生植株。结果表明:4d苗龄的子叶再生能力最强,带柄子叶的最佳苗龄为5~6d。子叶和带柄子叶分别在MS+BA2mg/L+NAA0.4mg/L+AgNO35mg/L和MS+BA2mg/L+NAA0.2mg/L+AgNO35mg/L的培养基中不定芽分化的效果较好。不同基因型间对子叶外植体的再生影响不大,但对带柄子叶的再生影响较明显。 陈石头 余小林 曹家树 吴剑丙关键词:榨菜 子叶 带柄子叶 离体再生 播种期和品种对早熟花椰菜植株生长及异常花球的影响 被引量:4 2005年 对3个早熟花椰菜品种进行播种期试验,调查花球形成时植株的生长情况、从定植到花球开始形成的时间和从定植到采收的时间、异常花球种类和发生率。结果表明,随着播种期的推迟,花椰菜植株在花球形成时的最大叶长、叶宽和株高呈明显上升的趋势,花球开始形成时的叶片数则随着播种期的延迟而呈现下降的态势。播种期对花椰菜从定植到花球开始形成的时间以及从定植到采收的时间有显著的影响。花椰菜平均花球质量随着播种期的延迟而呈现上升的趋势,并于适宜播种期达到最大,之后再次下降。花椰菜异常花球包括毛花球、夹叶球、小球、未结球等类型,其发生率和发生的种类随播种期和品种的不同而发生规律性变化。 汪炳良 徐敏 曹家树关键词:播种期 早熟花椰菜 植株生长 异常花球 蔬菜作物重要农艺性状相关基因分离的研究进展 被引量:1 2004年 本文简要综述了蔬菜作物基因分离的主要方法和近年来蔬菜作物重要农艺性状相关基因分离的研究进展,指出在分离蔬菜作物目的基因的研究中,必须加强基因分离的原创性;充分利用现有的研究条件,做到基因分离与功能基因组研究相互协调,均衡发展,从而为我国蔬菜作物开展分子育种研究奠定基础。 余小林 黄科 曹家树关键词:蔬菜作物 基因分离 农艺性状 分子育种 反义CYP86MF基因植物表达载体的构建及其对白菜的转化 被引量:16 2004年 在获得一个与白菜核雄性不育相关的编码细胞色素P450(CYP450)的基因CYP86MF的基础上,采用PCR技术在该基因的内部第901个碱基至第1338个碱基之间设计引物,扩增出438bp序列作为反义基因片段.把该反义片段连接至pBI121双元载体质粒上得到CaMV35S组成型启动子的表达载体pBI35S-AMF,随后利用"三亲杂交"法将pBI35S-AMF质粒转入农杆菌LBA4404和EHA105两个菌株中.PCR扩增和酶切鉴定结果表明,所构建的反义CYP86MF基因植物表达载体pBI35S-AMF是正确的,并已成功导入了根癌农杆菌中.随后,按照已建立的遗传转化体系对'上海青'白菜进行了转化,并获得130了多株转化再生植株. 余小林 曹家树关键词:植物表达载体 白菜 反义RNA技术 根癌农杆菌 核雄性不育 Bc MF3反义基因植物表达载体的构建及其对拟南芥的遗传转化 被引量:6 2005年 根据编码白菜(Brassica rapa L.ssp.chinensis,syn B.campestris ssp.chinensis)果胶甲酯酶的BcMF3基因cDNA序列内部第1343~1797个碱基之间序列设计引物,从白菜花蕾eDNA中PCR扩增出455bp的片段,把该片段作为反义基因连接至双元载体pBI121上,得到了植物表达栽体pBI-B3,并用“三亲杂交”法导入农杆菌LBA4404菌株中,PCR扩增和酶切结果表明所构建的植物表达载体pBFB3含有BcMF3反义基因片断,并已导入了根癌农杆菌(Agrobacterinrn tume fuciens)中;采用花序浸润法转化拟南芥(Arabidopsis thaliana)后,播种筛选浸润植株的种子获得了5株卡那霉素抗性植株,PCR扩增证明BcMF3反义片段成功整合到拟南芥基因组中;转基因拟南芥子代(T2)的抗性分离符合孟德尔分离比例,表明外源基因是单一位点插入。 刘乐承 余小林 叶纨芝 向珣 卢钢 曹家树关键词:反义基因 芜菁Ogura胞质不育系的选育初报 被引量:2 2004年 材料与方法
Ogura胞质不育甘蓝型油菜(Brassica napus L.)不育源植株苗期不黄化,蜜腺发育正常,表现为全不育.采用本实验室选育的芜菁(B.campestris ssp.rapifera Sinsk)优良自交系‘耐病98-1'和‘白蔓菁'为回交父本,2000年开始将不育源和回交亲本进行杂交和多代回交选择,并对F1,BC1,BC2和BC3植株植物学性状,特别是直根膨大情况,包括直根大小、形状和颜色,育性特征,蜜腺发育情况,花粉生活力以及亲和指数等进行观察鉴定. 姚祥坦 叶纨芝 崔辉梅 张明龙 曹家树关键词:芜菁 选育 杂交 回交 白菜高效再生系统的建立及其不定芽发生的组织学观察(简报) 被引量:18 2004年 白菜(Brassica campestris L ssp.chinensis Maki-no)起源于欧洲的野生芸薹,有许多种和类型,是我国尤其是长江流域及南方各省普遍栽培的重要蔬菜种类之一,在农业生产中占有重要的地位.由于白菜的植株再生频率同其他芸薹属作物相比较低,因此,影响了基因工程技术在白菜品种改良上的应用. 余小林 叶纨芝 曹家树 徐淑英关键词:白菜 器官发生 不定芽 组织学观察 提高榨菜离体培养植株再生频率 被引量:18 2004年 采用榨菜"浙桐1号"品种为材料,以MS为基本培养基,通过对不同植物生长调节剂的组合和不同外植体等主要因素的筛选,大幅度提高了榨菜离体培养植株再生频率。结果表明,2 mg/L 6-BA+0.2 mg/L 2,4-D的组合较为适宜,其不定芽再生频率可达50%,且外植体以下胚轴为好;而CPPU和2,4-D的适宜组合为1.5 mg/L+0.2 mg/L,其不定芽再生频率高达66.67%,最适外植体为带柄子叶。同时,研究结果显示,添加0.25-1 mg/L的GA3对榨菜已分化的不定芽的伸长有抑制作用;子叶柄和下胚轴外植体的分化具有极性现象。 余小林 曹家树 陈石头 吴剑丙关键词:榨菜 植株再生 器官发生 外植体 植物细胞色素P450 被引量:30 2004年 对植物细胞色素P450(CYP450)基因的分离,植物CYP450在苯丙烷类物质、芥子油苷及IAA和萜类等物质的生物合成中的功能,以及对天然生物合成与人工合成物质的解毒功能等研究进展作了简要的综述。指出分离植物细胞色素P450基因,并对其生物学功能进行分析以及植物细胞色素P450降解除草剂的机制及其在环境生物修复等方面的应用是今后一段时间内植物CYP450领域的研究热点。 余小林 曹家树 崔辉梅 叶纨芝关键词:基因分离 生物合成 解毒功能 环境生物修复