浙江省科技计划项目(2009C32068)
- 作品数：1 被引量：4H指数：1
- 相关作者：陈益泰姜景民刘军岳华峰姜荣波更多>>
- 相关机构：国家林业局中国林业科学研究院更多>>
- 发文基金：浙江省科技计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 红楠ISSR-PCR反应体系的建立和优化被引量：4
- 2011年
- 为建立稳定的红楠ISSR-PCR最佳反应体系,在探索红楠基因组DNA提取的基础上,利用单因子试验和正交试验设计对反应体系进行优化。首先采用单因子试验对Mg2+、引物、模板DNA、dNTPs的不同浓度水平进行优化,找出ISSR-PCR反应各因素的最佳浓度;同时为进一步增加结果的可靠性,采用正交试验设计方法[L9(34)]对Mg2+、引物、模板DNA、dNTPs 4个因素3个浓度水平进行优化和筛选。综合两种试验方法结果,最终获得了红楠ISSR-PCR最佳反应体系:反应体系为20μL,Taq酶0.05 U.μL-1,Mg2+2.0 mmol·L-1,模板DNA 1 ng·L-1,dNTPs 0.3 mmol·L-1,引物(835)0.5μmol·L-1,1×PCR缓冲液。建立重复性好、稳定性优良的ISSR-PCR反应体系,为下一步红楠群体遗传结构和遗传变异研究提供了技术支持。
- 姜荣波姜景民刘军陈益泰栾启福岳华峰
- 关键词：ISSR-PCR反应体系单因子试验正交设计
