国家自然科学基金(30770924)
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
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- 低剂量2-甲氧基雌二醇对骨髓瘤细胞中PRDM1基因两种同源异构体表达的影响被引量：2
- 2009年
- 目的探讨低剂量2-甲氧基雌二醇（2ME2）诱导骨髓瘤细胞分化过程中对PRDMl基因两种同源异构体（包含PR结构域的PRDM1α和缺失PR结构域的PRDM1β）表达的影响。方法以人骨髓瘤细胞系NCI—H929、RPMI8226、KM3和LP—1细胞作为研究对象，采用实时定量RT—PCR方法检测低剂量2ME2（终浓度0．5μmol／L）作用前后PRDM1α和PRDM1β的表达情况。结果0．5μmol／L2ME2处理后，在4个MM细胞系中均出现PRDM1基因表达上调，两种同源异构体的表达水平随着2ME2作用时间的延长均有不同程度的增加，并且PRDM1α／PRDM1β比值显著上升，存NCI-11929细胞PRDM1α/PRDM1β比值由基础值1．461±0．033上升至作用72h时的2．663±0．381（P〈0．01），RPMI8226细胞由1．929±0．334上升至2．727±0．362（P〈0．05）、KM3细胞由1．471±0．012上升至4．367±0．243（P〈0．01）、LP-1细胞由1．660±0．042上升至3．059±0．167（P〈0．01）。结论低剂量2ME2诱导骨髓瘤细胞发生分化的同时上调PRDM1α和PRDM1±的表达，但是具有潜在抑癌作用的PRDM1α上调程度更加显著，因而PRDM1αc/PRDM1β比值随着2ME2作用时间的延长显著上升，与细胞分化程度呈正相关，并且与PRDM基因家族的正、负作用机制相符合。
- 姜华侯健
- 关键词：多发性骨髓瘤2-甲氧基雌二醇基因
- 小剂量衣霉素诱导未折叠蛋白反应和骨髓瘤细胞分化的机制研究
- 2010年
- 目的 探讨小剂量衣霉素在诱导骨髓瘤细胞分化中的分子机制.方法 采用小剂量衣霉素处理骨髓瘤细胞U266和RPMI8226,细胞形态学观察和流式细胞术分析细胞表面CD49e的表达率,ELISA法检测培养上清液中免疫球蛋白轻链的变化,实时定量PCR检测未折叠蛋白反应相关基因GRP78、GRP94的表达情况,实时定量PCR和Western blot法检测基因XBP-1u/s mRNA和蛋白表达水平.分别采用RNA干扰沉默基因XBP-1和质粒转染过表达基因XBP-1 u/s后,观察细胞的分化情况.结果 小剂量衣霉素可诱导骨髓瘤细胞系U266、RPMI8226细胞向成熟阶段分化.形态学观察发现细胞胞核缩小,胞质丰富,核质的比例下降,核仁减少或消失.细胞表面CD49e表达率增高,同时在细胞培养上清中分泌的免疫球蛋白轻链蛋白含量增高.未折叠蛋白反应相关的基因GRP78、GRP94表达上调,伴随着细胞分化的过程XBP-1u在转录翻译水平表达上凋,而剪切体形式XBP-1s则表达相对下调.通过RNA干扰沉默基因XBP-1的表达,则细胞分化水平发生阻断.而过表达XBP-1u则可以促进骨髓瘤细胞的分化.结论 小剂量的衣霉素以诱导骨髓瘤细胞发生分化为主,在此过程中细胞发生了未折叠蛋白反应,其中基因XBP-1u在骨髓瘤细胞分化和未折叠蛋白反应的过程中起着关键的作用.
- 邹剑峰姜华侯健
- 关键词：多发性骨髓瘤未折叠蛋白反应细胞分化衣霉素
- 2-甲氧基雌二醇联合硼替佐米对多发性骨髓瘤细胞凋亡的影响
- 2009年
- 目的探讨2一甲氧基雌二醇（2-ME2）联合硼替佐米的抗多发性骨髓瘤（MM）效应及与聚集小体（aggresome）形成之间的相关性。方法以MM细胞系RPMI8226、NCI—H929、U266、SKO．-007细胞作为研究对象，采用硼替佐米单药或联合2一M呓处理，通过等效应线图法分析两者是否具有抗MM协同效应；通过免疫荧光技术在同一组细胞群中研究聚集小体阳性和阴性细胞的凋亡情况。结果①硼替佐米呈浓度和时间依赖性地显著提高聚集小体阳性细胞比例，且聚集小体几乎全部出现于非凋亡细胞中。②等效应线图法分析显示一定浓度范围的硼替佐米与2一ME2联合具有显著的协同作用。③硼替佐米与2一ME2联合应用后聚集小体阴性的凋亡细胞显著增多而聚集小体阳性的非凋亡细胞明显减少。在RPMI8226及U266细胞中，硼替佐米单药与联合用药组相比，聚集小体阴性的凋亡细胞分别由（14．5±2．6）％及（20．1±2．9）％增加至（80．7±6．9）％及（71．6±6．2）％；聚集小体阳性的非凋亡细胞分别由（75．3±5．7）％及（69．1±8．6）％减少到（13．8±3．8）％及（19．5±4．2）％。结论硼替佐米诱导生成的聚集小体对MM细胞具有保护作用；2一ME2通过抑制聚集小体途径可以显著增强硼替佐米的抗MM效应。
- 马仰丽姜华侯健
- 关键词：雌二醇硼替佐米多发性骨髓瘤细胞凋亡
