国家自然科学基金(81070688)
- 作品数：6 被引量：8H指数：1
- 相关作者：付勤李妍沈涛梁峰巴根更多>>
- 相关机构：中国医科大学明尼苏达大学鞍山市中心医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 两种膝关节假体置换治疗绝经后类风湿关节炎合并骨质疏松症效果对比研究被引量：7
- 2020年
- 目的比较进口GEMINI MKⅡ旋转平台膝关节假体与国产后稳定型TC-Dynamic人工膝关节系统置换术治疗绝经后类风湿关节炎合并骨质疏松症的效果。方法选取自2014年2月至2018年8月在沈阳市第四人民医院骨科行全膝关节置换的绝经后类风湿关节炎合并骨质疏松症的34例患者为研究对象,根据患者意愿分为GEMINI MKⅡ旋转平台膝关节假体置换组(GEMINI MKⅡ组,n=18)及TC-Dynamic人工膝关节系统置换组(TC-Dynamic组,n=16)。比较两组患者治疗前及治疗后6、60个月的膝关节功能、疾病活动性指标及骨密度。结果 GEMINI MKⅡ组与TC-Dynamic组患者治疗后6、60个月的类风湿性关节炎疾病活动性指标较治疗前明显降低,膝关节功能明显改善,差异有统计学意义(P<0.05);但治疗后两组间上述各指标比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后6个月时,两组骨密度与治疗前比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后60个月时,两组骨密度较治疗前明显改善,差异有统计学意义(P<0.05);但两组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 GEMINI MKⅡ旋转平台膝关节假体与国产后稳定型TC-Dynamic人工膝关节系统置换在改善绝经后类风湿关节炎合并骨质疏松症患者膝关节功能、降低类风湿性关节炎疾病活动性、增加骨量方面的作用相近。但国产假体更为经济,是临床治疗此类患者的良好选择。
- 王广欣马兆吉梁庆威
- 关键词：类风湿关节炎全膝关节置换GEMINI
- hCAP基因真核表达载体的构建及蛋白的表达和定位
- 2012年
- 目的:构建hCAP真核表达载体并检测融合蛋白在细胞内的表达及定位。方法:提取工具细胞CV-1的mRNA,反转录为cDNA。PCR扩增hCAP基因的cDNA全长,并将其克隆至pEGFP-C1表达载体中。进一步将构建的重组载体进行酶切和测序鉴定,并转染到工具细胞COS-7中,提取细胞蛋白进行Western blot。最后利用激光共聚焦显微镜观察pEGFP-hCAP在NIH3T3成纤维细胞内的定位。结果:hCAP基因cDNA全长克隆到了真核表达载体pEGFP-C1中,酶切鉴定片段为3 879 bp,测序证实成功。Western blot检测GFP-hCAP融合蛋白表达,相对分子质量(Mr)约为169 000。pEG-FP-hCAP在NIH3T3细胞中主要定位于细胞周边。结论:成功构建了真核表达载体pEGFP-hCAP,融合蛋白在NIH3T3细胞中主要定位于细胞周边。
- 沈涛梁峰杨礼庆李妍粱爽薛峰付勤
- 关键词：WESTERNBLOT绿色荧光蛋白质粒构建
- 有机镓对去势大鼠骨代谢及骨量变化的影响
- 2013年
- 目的观察有机镓对去势大鼠骨代谢及骨量变化的影响。方法将30只大鼠随机分为假手术组、卵巢切除组和有机镓组。除正常对照组外,其他2组行卵巢切除。12周后假手术组、卵巢切除组给予PBS治疗,有机镓组给予有机镓干预。8周后取大鼠第五腰椎、股骨分别进行Micro-CT测定骨小梁组织结构;组织形态学测骨小梁占总骨量的百分数(BV/TV);生物力学测定股骨颈机械强度检查;生化指标检测比较血清TRAP、ALP、钙、磷。结果Micro-CT测试表明有机镓组平均骨小梁厚度(Tb.Th)、皮质厚度Ct.Th)均明显高于卵巢切除组(P<0.05),BV/TV明显高于卵巢切除组(P<0.05),破骨细胞数显著减少,有机镓组股骨颈平均最大骨折负荷比卵巢切除组高27.4%,血清TRAP、钙、磷减少(P<0.05)。结论有机镓减少骨吸收的同时增加骨形成,对于去势大鼠骨量减少有明显的改善作用。
- 王佳时王广斌付勤李彬贺明
- 关键词：去势大鼠骨质疏松骨代谢骨形态计量学
- 骨肉瘤细胞中SORBS1的表达和定位
- 2012年
- 目的构建人SORBS1真核表达载体并检测在骨肉瘤细胞内的表达及定位。方法以GST-hSORBS1为模板,利用PCR扩增hSORBS1基因cDNA全长,并将其克隆至3*Flag标签的真核表达载体中。进一步将构建的重组载体进行酶切和测序鉴定,并转染到骨肉瘤细胞MG-63中,提取蛋白进行Western blot检测。同时利用共聚焦激光显微镜观察3*Flag-hSORBS1在MG-63细胞中的定位,使用免疫沉淀的方法纯化hSORBS1蛋白。结果hSORBS1基因cDNA全长成功构建到真核表达载体3*Flag中,Western blot检测到3*Flag-hSORBS1融合蛋白表达,且在骨肉瘤细胞MG-63中主要定位于细胞周边,并成功纯化hSORBS1蛋白。结论成功构建3*Flag-hSORBS1真核表达质粒,同时鉴定其融合蛋白的表达,并纯化hSORBS1蛋白。3*Flag-hSORBS1蛋白主要定位在细胞周边。
- 沈涛代炜李妍许晓军巴根付勤
- 关键词：骨肉瘤真核表达载体融合蛋白免疫沉淀
- 骨肉瘤MG-63细胞中Polo样激酶2的表达和定位被引量：1
- 2012年
- 目的:构建真核表达载体*3 Flag-hPlk2并检测其在骨肉瘤细胞内的表达及定位。方法:以GST-hPlk2为模板,利用PCR扩增hPlk2基因cDNA全长,并将其克隆至含有*3 Flag标签的真核表达载体中。将构建的重组质粒进行酶切和测序鉴定,并转染到骨肉瘤细胞MG-63中,提取细胞蛋白进行Western blot检测。利用共聚焦激光扫描显微镜观察*3 Flag-hPlk2在MG-63细胞中的定位,免疫沉淀法纯化hPlk2蛋白。结果:hPlk2基因cDNA全长成功构建到真核表达载体*3 Flag中,Western blot检测到*3 Flag-hPlk2融合蛋白表达,分子量约为80kDa。*3 Flag-hPlk2在骨肉瘤MG-63细胞中主要定位于细胞质和核周,并成功纯化hPlk2蛋白。结论:成功构建了*3 Flag-hPlk2真核表达质粒,同时鉴定了*3 Flag-hPlk2融合蛋白的表达,并纯化hPlk2蛋白。*3 Flag-hPlk2蛋白主要定位在细胞质和核周。
- 沈涛傅永慧李妍梁爽梁峰巴根付勤
- 关键词：WESTERNBLOT免疫沉淀
- 有机镓促进卵巢切除大鼠骨折愈合及生长的实验研究
- 2012年
- 目的本研究的目的是证实有机镓对卵巢切除大鼠骨折愈合的作用。方法 40只雌性Wistar大鼠被分为2组:(1)假手术组(对照n=10只),(2)卵巢切除组(n=30只),无菌条件下腹侧入路行完整双侧卵巢摘除;假手术组摘除与卵巢重量相同的卵巢周围脂肪组织各1块。12w后对40只大鼠制造开放性骨折并予克氏针内固定。术后分为假手术组(n=10)和一个卵巢切除组(n=15)用PBS治疗,另外一个卵巢切除组(n=15)用有机镓治疗。治疗共持续4w,取骨折愈合的大鼠股骨分别进行micro-CT测定骨小梁组织结构;组织形态学测定骨组织愈合面积;生物力学测定愈合股骨的最大负荷载力;骨矿含量检测评价钙盐含量。结果经过4w治疗,micro-CT显示有机镓治疗组平均骨小梁厚度(Tb.Th)、平均骨小梁数目(Tb.N)均明显高于对照组(P<0.05)。卵巢切除组的愈合组织骨面积较假手术组降低9.2%,有机镓治疗组比卵巢切除组高34.9%(P<0.05)。有机镓治疗组股骨骨折愈合强度显著高于卵巢切除组,最大负荷载力增加50.6%,结构强度增加36.5%,能量吸收增加90.9%,但是均低于假手术组。与卵巢切除组相比,有机镓治疗组显著提高愈合组织的骨矿含量。结论有机镓能够抑制骨折后的骨量丢失,促进骨折愈合组织的生长,改善骨小梁三维结构及骨组织的力学性能,可用来促进骨质疏松性骨折的愈合并改善骨质量,预防再骨折。
- 王广斌裴祎贺明王佳时付勤
- 关键词：骨质疏松骨折愈合
