国家自然科学基金(81320108011) 作品数:22 被引量:31 H指数:3 相关作者: 孙宏晨 史册 布文奂 胡月 张雪 更多>> 相关机构: 吉林大学口腔医院 中国医科大学 佳木斯大学附属口腔医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 吉林省自然科学基金 吉林省科技发展计划基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
载EPO腺病毒的PLGA纳米纤维支架在体内促进骨缺损修复作用 被引量:1 2015年 目的:将促红细胞生成素(EPO)腺病毒局限在应用部位,观察其在体内的促进骨形成作用。方法:采用冷冻干燥法,将增强型绿色荧光蛋白(EGFP)腺病毒与聚乳酸羟基乙酸共聚物(PLGA)纳米纤维支架复合作为实验组(PLGA/Ad-EGFP组),以等剂量的EGFP腺病毒为对照组,分别感染骨髓基质细胞(BMSCs),以BMSCs感染EGFP的荧光细胞面积比例检测病毒活力。采用Picogreen dsDNA定量检测试剂盒检测病毒释放动力学。将EPO腺病毒与PLGA纳米纤维支架冻干复合作为实验组(PLGA/Ad-EPO组),以单纯骨缺损为对照组,植入大鼠颅骨缺损处,在第4和8周采用Micro CT及组织学HE染色检测EPO腺病毒的新生骨面积百分比。结果:PLGA/Ad-EGFP组荧光细胞面积比例明显高于对照组(P<0.05);腺病毒在PLGA上呈突释曲线,第1小时存留53.0%±5.6%,第16小时存留20.0%±3.3%。与对照组比较,PLGA/Ad-EPO组在第4周促进红细胞生成,并在第4及8周大鼠颅骨缺损修复,新生骨面积百分比达到25.0%±5.7%及35.0%±6.3%(P<0.05)。结论:应用冻干法将腺病毒与PLGA复合能够有效保存病毒活性,PLGA/Ad-EPO纳米纤维支架能够在一定程度上促进骨缺损修复。 朱阳 李道伟 方滕姣子 史册 王丹丹 孙宏晨关键词:骨缺损 腺病毒 促红细胞生成素 冷冻干燥法 肿瘤间质细胞对口腔癌作用的研究进展 被引量:3 2019年 口腔鳞状细胞癌(oral squamous cells carcinoma, OSCC)是口腔颌面部最常见的恶性肿瘤,肿瘤间质细胞与肿瘤细胞之间的相互作用参与肿瘤细胞的增殖、分化、凋亡、黏附及迁移等过程并且与肿瘤的恶性程度及预后密切相关,了解肿瘤间质细胞来源及其对肿瘤发生发展的影响对OSCC的治疗具有重要意义。本文总结了几种重要肿瘤间质细胞的来源及其对肿瘤细胞的作用,以期为OSCC的治疗提供帮助。 陈雨蒙 徐晓薇 徐晓薇 孟琳 郑梦丹 孟琳 孙宏晨关键词:肿瘤间质 肿瘤相关成纤维细胞 肿瘤相关巨噬细胞 间充质干细胞 Advances in the study of the effect of tumor stromal cells on oral cancer 2019年 Oral squamous cell carcinoma (OSCC) is the most common malignant tumour in oral and maxillofacial region. The interaction between stromal cells and tumor cells is involved in the proliferation, differentiation, apoptosis, adhesion and migration of tumor cells, and is closely related to the malignant degree and prognosis of tumors. The development of OSCC is of great significance to the treatment of OSCC. This paper summarizes the sources of several important stromal cells and their effects on tumor cells, which provides a theoretical basis for the treatment of OSCC. Yu-Meng Chen Xiao-Wei Xu Xin-Chen Liu Lin Meng Meng-Dan Zheng Chun-Xia Ren Hong-Chen Sun关键词:TUMOR FIBROBLASTS MACROPHAGES MESENCHYMAL 细胞极性相关蛋白CDC42和PAR3在小鼠牙胚发育过程中的表达 被引量:3 2018年 目的:研究细胞极性相关蛋白CDC42和PAR3在小鼠牙胚发育过程中的表达,探讨其在牙胚发育中的可能作用。方法:取13.5、14.5、16.5和18.5d(E13.5、E14.5、E16.5和E18.5)的小鼠胚胎以及出生后1和5d(PN1和PN5)的小鼠,分离头部,固定、脱钙、脱水、石蜡包埋、切片,HE染色观察牙胚的组织形态表现,采用免疫组织化学染色方法观察CDC42及PAR3在牙胚发育过程中的表达。结果:HE染色观察,E13.5~E18.5分别为小鼠牙胚发育的蕾状期、帽状期、钟状早期和钟状晚期,PN1小鼠的牙胚中可见分化成熟的成牙本质细胞和成釉细胞,PN5小鼠牙胚可见牙冠部发育完成。免疫组织化学染色,CDC42在E13.5、E14.5和E16.5小鼠牙胚中有广泛表达,在E18.5小鼠牙胚中表达较E13.5、E14.5和E16.5减少,在PN1和PN5小鼠牙胚中主要表达于成牙本质细胞和成釉细胞的分泌端;PAR3弱表达于E13.5和E14.5小鼠牙胚,在E16.5和E18.5小鼠牙胚上皮处表达明显增强,在PN1和PN5小鼠牙胚中表达较E18.5减弱。结论:CDC42和PAR3参与小鼠牙发育的过程,在牙胚发育早期可能参与小鼠牙胚的增殖及迁移,在牙胚发育晚期可能参与了成牙本质细胞和成釉细胞的分化,尤其在成牙本质细胞和成釉细胞极性的形成与维持中可能具有重要作用。 李媛 史册 张雪 史册 郝新青 张雪 刘苍维 周怡君 郝新青 张颖丽 胡月关键词:CDC42 PAR3 牙胚发育 多孔二氧化硅负载BMP-2质粒通过自噬促进成骨细胞分化的研究 由创伤、感染、肿瘤等引起的口腔颌面部骨缺损,严重影响患者的身心健康。在纳米材料促成骨作用的研究中,本课题组证明了多孔二氧化硅纳米粒子负载BMP-2质粒在体内具有良好的促骨形成效果,表明该纳米粒子具有较好的生物学活性,但是... 孙茂蕾关键词:多孔二氧化硅 成骨细胞分化 自噬 文献传递 脂肪干细胞及其向成骨细胞分化的调控机制 被引量:2 2014年 脂肪组织中除含有脂肪细胞、结缔组织基质、神经组织、血管组织和免疫细胞外,还存在多能干细胞,其具有向脂肪细胞、成骨细胞、软骨细胞、肌细胞、内皮细胞、造血细胞、肝细胞和神经元细胞分化的潜能。此外,脂肪组织可分泌脂联蛋白、瘦蛋白、抵抗蛋白和肿瘤坏死因子等多肽物质,其中,瘦蛋白具有调解成骨和成脂分化信号转导通路的功能,既可增加细胞增殖和成骨分化能力以及矿化结节的数量,还可阻止细胞成脂分化。成骨细胞在分化过程中表达核心结合因子-α1、成骨细胞特异性转录因子、1型胶原、碱性磷酸酶、骨钙蛋白、骨桥蛋白和骨涎蛋白等细胞外基质蛋白和成骨相关因子,观察这些标志性基因的表达,可了解干细胞向成骨细胞分化成熟的状态。目前用于提高脂肪干细胞成骨分化能力的方法主要有外源性因子、基因工程技术和物理方法,也有学者利用生物力学方法对脂肪干细胞向成骨细胞分化进行调控。随着对脂肪干细胞不断深入的研究,可为骨缺损的修复带来极具意义的变化。 唐宇欣 金晗 史册 朱阳 王丹丹 王贺 林崇韬 孙宏晨关键词:脂肪干细胞 骨组织工程 成骨分化 聚乙烯亚胺递送miR-218及miR-26a对骨髓间充质干细胞成骨分化的影响 被引量:2 2017年 背景:骨髓间充质干细胞因其多向分化潜能广泛应用于组织工程领域,miRNA对于促进骨髓间充质干细胞成骨分化具有重要作用。目的:探究miR-218和miR-26a对大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的影响,为诱导骨髓间充质干细胞成骨分化的相关研究及临床应用提供前期依据和选材参考。方法:提取Wistar大鼠双下肢股骨骨髓,分离培养骨髓间充质干细胞传至第3代备用。miR-218、miR-26a和聚乙烯亚胺(PEI)以特定比例混合孵育形成miRNA/PEI复合物,设立阴性对照组。结果与结论:(1)大鼠骨髓间充质干细胞生长状态良好;(2)MTT法筛选miRNA mimics转染适宜浓度为50 nmol/L;(3)qRT-PCR检测成骨相关基因碱性磷酸酶、Ⅰ型胶原的mR NA表达水平增高(P<0.05);(4)与空白对照组和阴性对照组相比,碱性磷酸酶染色后胞质均产生了较为明显的着色;(5)茜素红染色出现较多矿化结节。结果显示,以PEI为载体构建的miR-218/PEI复合物、miR-26a/PEI复合物及miR-218+miR-26a/PEI共转染复合物对骨髓间充质干细胞的成骨分化具有一定的促进作用,相同条件下miR-26a成骨能力稍优于miR-218。 孙璇 魏泽全 布文奂 方滕姣子 西洛片多 刘麒麟 孙宏晨关键词:干细胞 骨髓干细胞 聚乙烯亚胺 MIR-218 骨髓间充质干细胞 成骨分化 RNA干扰 激活素受体样激酶2及其在颅面部生长发育中的作用 2017年 人类的ALK2基因位于染色体2q23~24,其内含子大都在0.5~6.5 kb,其3’非编码区对ALK2基因表达起着重要的调节作用。ALK2蛋白由胞外区、跨膜区和富含丝氨酸-苏氨酸序列的胞内区组成,在组成上高度保守。ALK2是骨形态发生蛋白(BMP)家族受体中的一员并转导BMP信号。ALK2信号转导通路分为经典的Smad信号转导通路和非Smad信号转导通路,前者在促进骨、软骨和牙发生方面发挥着重要的作用。ALK2蛋白广泛表达于机体的不同组织,如骨、软骨、牙体和心脏等。ALK2在颅骨发生发育早期促进成骨,在成熟期抑制成骨;ALK2基因突变增强可导致异位骨化,体现了ALK2独特于其他BMP受体的重要生理病理学意义。 张雪 徐召南 刘麒麟 李超 孙宏晨关键词:基因敲除 叶酸-聚乙烯亚胺复合碳点的跨膜机制和胞内分布 被引量:1 2018年 目的:探讨以叶酸和聚乙烯亚胺(PEI)为原料合成的荧光碳点跨MC3T3-E1细胞膜转运途径、胞内分布其对细胞的影响,并阐明其机制。方法:以叶酸和PEI为原料,通过水热法合成具有细胞成像功能的荧光碳点,采用MTT法筛选碳点的最佳使用浓度。将MC3T3-E1细胞分为空白对照组、叶酸组和碳点组,通过细胞周期、细胞凋亡和细胞活性氧(ROS)水平检测评估碳点的生物相容性;通过胞膜窖途径抑制剂制霉菌素、巨胞饮途径抑制剂诺考达唑的使用,探讨细胞摄取碳点的途径;利用碳点在紫外光激发下发射蓝色荧光的特点,通过各种细胞器探针进行荧光共定位以观察碳点在细胞内的分布。结果:与空白对照组比较,24h时100~450mg·L-1碳点组细胞增殖率明显升高(P<0.05);在48h时,当碳点浓度达到350mg·L-1时,细胞增殖率仅有空白对照组的68.4%(P<0.05)。与空白对照组比较,碳点组G0期和G1期细胞比例明显下降(P<0.05),S期细胞比例明显升高(P<0.05);G2期和M期细胞比例亦升高,但差异无统计学意义(P>0.05);与空白对照组比较,叶酸组和碳点组细胞凋亡率无明显改变(P>0.05),但细胞内ROS水平明显降低(P<0.05)。与空白对照组比较,制霉菌素组细胞摄取碳点量减少(P<0.05)。倒置荧光显微镜观察,碳点的蓝色荧光与线粒体的红色荧光较好重叠,与溶酶体的红色荧光较好重叠,与内质网的红色荧光不完全重叠,与高尔基体的红色荧光重叠得较差。结论:碳点生物相容性较好,被细胞摄取后可以分布至细胞质的主要细胞器上,可作为一种非病毒载体应用到转基因治疗中。 刘杰 刘杰 赵欢 布文奂 孟琳 董悦 李杏关键词:细胞摄取 转基因治疗 叶酸 聚乙烯亚胺 初步探讨石蜡标本制备方案的选择及ALK2在小鼠牙胚中的表达 2018年 目的:探讨ALK2在小鼠牙胚中的表达及牙胚标本和切片的制备方案。方法:取E12.5-E18.5的小鼠胚胎,4%多聚甲醛于4℃固定24 h后,按脱水总时间23 h和8.5 h两种方案脱水,石蜡包埋切片后,HE染色观察标本制备情况,免疫组织化学染色观察ALK2在牙胚中的表达情况。结果:大体显微镜下观察到的胚胎形态和文献所述一致。脱水总时间8.5 h的脱水方案所制备的石蜡切片平整、完整、无裂痕,染色质量良好,牙胚形态完整,结构清楚。免疫组化染色发现,ALK2广泛地表达于蕾状期的口腔上皮和间充质,帽状期及钟状期的成釉器、牙乳头。结论:减少脱水时间,不影响切片和染色质量,可提高实验效率。ALK2广泛表达于牙胚早期,可能在牙发育中具有重要作用。 张雪 赵欢 李媛 张琦 胡月 史册 孙宏晨关键词:牙胚 组织脱水 牙发育