福建省发展和改革委员会项目(KY0030060)
- 作品数：9 被引量：64H指数：4
- 相关作者：胡方平蔡学清范晓静邱思鑫宋美仙更多>>
- 相关机构：福建农林大学洛阳理工学院福建省农业科学院更多>>
- 发文基金：福建省发展和改革委员会项目国家自然科学基金福建省教委科研基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 萝卜软腐病生防菌株Hy11的筛选、鉴定及定殖特性被引量：4
- 2013年
- 为探讨银杏内生细菌对萝卜软腐病的防病作用,通过块根接种和温室盆栽试验筛选对萝卜软腐菌Pectobacterium carotovorum subsp.carotovorum具有高效抑制作用的生防菌株,共获得8株拮抗作用较强的内生细菌,其中菌株Hy11抑菌作用明显。对生防菌株Hy11进行了形态观察、生理生化特性测定、16S rDNA和gyrB基因序列分析,并应用绿色荧光蛋白基因标记菌株Hy11,研究该菌株在萝卜体内的定殖动态。结果显示,该菌株对萝卜软腐病具有较好的防效,对萝卜块根和幼苗的防治效果分别为77.9%和66.7%;对萝卜幼苗的促生率达113.28%。经鉴定,菌株Hy11为解淀粉芽胞杆菌Bacillus amyloliquefaciens。标记菌株Hy11-gfp在喷雾接种银杏叶片后0～3 d种群数量呈急剧下降趋势,10 d后保持相对稳定;其在萝卜的根、茎和叶中均能够定殖,在根中的定殖数量最高可达1.2×104CFU/g。
- 杨瑞先宋美仙邱思鑫胡方平
- 关键词：内生细菌生物防治定殖
- 银杏内生细菌防治辣椒疫病研究被引量：11
- 2012年
- 从健康银杏植株叶片中分离到108株内生细菌,通过平板测试从中筛选获得35株对辣椒疫霉菌Phytophthora capsici具有拮抗作用的菌株。温室盆栽试验证明,菌株Zy44、Fy11、Hy7、Hy14和Zy25对辣椒疫病防效显著,其中Zy44和Fy11发酵液在辣椒疫霉菌接种20 d后防效分别为62%和52.33%;经形态观察、生理生化特征测试、16S rDNA序列和gyrB基因序列分析,鉴定这两个菌株为解淀粉芽胞杆菌Bacillusamyloliquefaciens;其发酵滤液及酸沉淀获得的脂肽类抑菌物质对盆栽辣椒苗疫病的防治试验结果表明,菌株Zy44的防效高于Fy11,且脂肽类物质的防效高于发酵滤液;显微镜观察发现菌株Zy44的脂肽类抑菌物质可导致辣椒疫霉菌菌丝体膨大,分枝增多,成簇状,并显著抑制孢子囊的形成。
- 杨瑞先陶玉凤宋美仙胡方平
- 关键词：银杏内生细菌辣椒疫病
- 番茄细菌性叶斑病菌超分支滚环扩增快速检测技术被引量：2
- 2014年
- 根据番茄细菌性叶斑病菌(Pseudomonas syringae pv.tomato,Pst)的一段特异蛋白基因序列,按照锁式探针的设计原理设计探针和扩增引物,优化系列反应条件,建立了特异性的Pst超分支滚环扩增技术。试验结果表明:该检测技术能够从供试的10种不同的病原菌中特异性地检测出番茄细菌性叶斑病菌,DNA检测的最低浓度为500fg/μL,检测灵敏度高于常规PCR。
- 王念武王婷沈建国胡方平
- 关键词：锁式探针
- 内生细菌在荔枝体内的定殖及其防病保鲜功能被引量：18
- 2011年
- 用含有GFP基因标记的内生细菌菌株BS-2-gfp和TB2-gfp,采用喷雾接种的方法,研究其在荔枝叶片、花、幼果及成熟果实果皮内的定殖动态及其与防病保鲜之间的关系.结果表明:内生细菌BS-2-gfp和TB2-gfp能在荔枝叶片、花、幼果及采后果皮上定殖,能在各组织内繁殖并可在花和幼果间传导.内生细菌在荔枝叶片上的定殖因季节和荔枝生长期的不同而异,与秋季相比,春季定殖期限长,定殖量大.内生细菌在荔枝不同部位的定殖时间和定殖量也不同,在叶片上接种37d后还可分离回收到接种的2种目标细菌,在花上接种10d后就回收不到BS-2-gfp,而成熟荔枝果皮上2种菌的定殖量最大.防病试验表明,当荔枝霜疫病的病情指数急剧上升时,TB2-gfp在荔枝果皮的定殖量达到最大,为1.90×106CFU.g-1FM;保鲜试验发现,TB2-gfp菌株的保鲜效果优于BS-2-gfp,菌株在荔枝果皮内的定殖量也高于菌株BS-2-gfp,表明供试内生细菌在荔枝果皮的定殖量与其防病及保鲜效果呈正相关.
- 蔡学清陈炜林娜林通胡方平
- 关键词：荔枝内生细菌定殖防病保鲜
- 两株银杏内生拮抗细菌菌株的鉴定及生防功能基因研究被引量：3
- 2013年
- 从表面消毒的银杏叶片中获得两株具有广谱拮抗活性的内生细菌菌株Zy25和Hy7;应用绿色荧光蛋白GFP基因标记该拮抗菌株,培养的菌液摩擦接种银杏叶片,分离结果表明两个菌株可在银杏叶片内稳定定殖;通过形态观察、生理生化指标测定及16S rDNA和DNA gyrase B subunit(gyrB)基因序列同源性分析,鉴定两个菌株为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens);利用特异引物对菌株的生防功能基因进行扩增,结果表明:bmyB、fenD、ituC、srfAA、srfAB、bioA、yngG和yndJ基因簇的片段在两个菌株中均存在,表明生防菌株Zy25和Hy7可能具有合成脂肽类物质的能力。
- 杨瑞先范晓静蔡学清陶玉凤胡方平
- 关键词：内生细菌拮抗活性
- 内生芽孢杆菌防治植物病害的应用及作用机制研究进展被引量：18
- 2012年
- 植物内生细菌由于其独特的生境,成为植物病害防治中的重要生防因子。芽孢杆菌在植物体内分布具有广泛性和多样性,其在防治病害和促进植物生长发育方面的作用被广泛研究和应用。芽孢杆菌控制植物病害的作用机制主要包括竞争、拮抗、促进植物生长和诱导植物抗病性四个方面。植物诱导抗性作为植物内生细菌防病的主要机制之一,具有非特异性、广谱性和系统性,在植物病害的生物防治中可被广泛应用。
- 杨瑞先蔡学清范晓静胡方平
- 关键词：内生芽孢杆菌生防机制
- 黄瓜枯萎病菌内生拮抗细菌的筛选与鉴定被引量：1
- 2012年
- 采用平板对峙法从黄瓜体内筛选对黄瓜枯萎病菌具有拮抗作用的细菌。结果表明,黄瓜体内的细菌数量为2.9-25.6×103cfu.(g.FW)-1,其中,植株不同器官的内生细菌数量不同,以叶中的细菌数量最多,其次为花,最少的为果实;从所分离的细菌菌株中筛选到20株对黄瓜枯萎病菌具有不同程度拮抗作用的菌株;选择拮抗效果较好的10株菌株,用革兰氏染色、鞭毛染色、芽孢染色和生理生化测定等进行鉴定,发现其均为芽孢杆菌属(Bacillus spp.)。
- 蔡学清谢玲平胡方平
- 关键词：黄瓜枯萎病菌拮抗内生细菌芽孢杆菌属
- 柑橘溃疡病生防细菌的分离鉴定被引量：10
- 2014年
- 为了从柑橘上获得能防治柑橘溃疡病的生防细菌,从福州3个地区的柑橘园采集不同柑橘品种的叶片、春稍和花,用稀释分离法分离得到84株细菌菌株,用平板抑菌圈法筛选获得11株对柑橘溃疡病菌具有拮抗作用的菌株;用离体叶片防效筛选获得39株对柑橘溃疡病具有50%以上防效的菌株,占菌株总数的46.4%。对3株防效显著的拮抗菌株YH1、YS5和NY20进一步进行防效测定,结果表明:菌株培养液的防治效果最好,菌体次之,代谢产物最差;对这3株细菌的β-1,4-葡聚糖酶、蛋白酶和β-1,3-1,4-葡聚糖酶的酶活性进行测定,结果表明酶活性的强弱与防病效果有一定的相关性。经过16S rDNA序列分析,革兰氏染色、鞭毛染色、芽孢染色和生理生化测定,确定这3个菌株均属于芽孢杆菌属,其中菌株YH1鉴定为短小芽孢杆菌Bacillus pumilus。
- 陈娇梅蔡学清邱思鑫胡方平
- 关键词：柑橘溃疡病拮抗菌芽孢杆菌生物防治
- 利用cDNA-AFLP分析内生解淀粉芽胞杆菌Fy11诱导辣椒差异表达基因被引量：2
- 2013年
- 【目的】分析内生解淀粉芽胞杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)Fy11诱导辣椒(Capsicum annuum)幼苗差异表达基因,了解辣椒与内生芽胞杆菌互作的分子机制。【方法】利用cDNA-AFLP技术,采用256对引物,分析辣椒幼苗接种内生解淀粉芽胞杆菌Fy11后5个时间点的基因表达谱;利用qRT-PCR分析差异基因表达模式,验证cDNA-AFLP表达谱。【结果】256对引物共产生18 620个转录本(TDF),筛选获得353条差异表达条带,占扩增条带总数的1.89%。经克隆、测序分析,最终获得257个差异TDF,聚类分析得到229个独立基因(EST,unigenes),其中144个基因上调表达,85个基因下调表达。经Blastx比对和功能分类分析,其中65条EST(28.38%)未找到同源性匹配,8条(3.49%)与未知功能蛋白同源性较高。其余156条EST主要涉及基础代谢基因(10.92%);与能量和抗病与防御类相关基因,各占8.73%;信号转导基因占7.42%;转运子或转座子基因占6.99%;与细胞结构相关基因占6.55%;参与转录调控基因占5.68%;细胞生长类基因占3.93%;参与蛋白质运输和储存有8个基因,占3.49%;蛋白质合成类基因占2.18%;次生代谢类和胞间运输类基因,其数量相对较少,各占1.75%。选取与抗病防御、转录调控及信号转导类等相关的10个差异基因,qRT-PCR分析结果显示其表达模式符合cDNA-AFLP表达谱。【结论】内生细菌与植物互作的分子机制涉及植物多方面生理生化反应,包括抗病防御、转录调控、蛋白质代谢、信号转导、以及非生物胁迫等多种途径相关基因的协同控制。
- 杨瑞先范晓静邱思鑫蔡学清胡方平
- 关键词：辣椒基因表达CDNA-AFLPQRT-PCR
