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高表达热休克蛋白70对骨骼肌细胞葡萄糖有氧氧化的影响: 2015年; 目的:探讨高表达热休克蛋白70(heat shock protein 70,Hsp70)对骨骼肌细胞(C2C12)葡萄糖有氧氧化的影响。方法:通过构建重组p TRE2hyg-Hsp70质粒,稳定转染C2C12骨骼肌细胞系,建立Hsp70高表达的C2C12细胞系。另设未转染组为对照组。在转染前及转染后细胞培养的不同时间点(0天、3天、7天),采用生化仪检测培养液中葡萄糖和乳酸含量,用比色法测定柠檬酸合成酶(CS)、α-酮戊二酮脱氢酶(KGDH)、NADH-泛醌还原酶(complex I,CI)、泛醌-细胞色素C还原酶(complex III,CIII)等葡萄糖有氧氧化关键酶的活性,并测定细胞内ATP水平。结果:与对照组相比,高表达Hsp70的C2C12细胞在培养的3天、7天,培养液葡萄糖的消耗和乳酸的产生明显升高,细胞有氧氧化酶CS、KGDH、CI和CIII的活性显著下降(P<0.05),而细胞内ATP含量显著提高(P<0.05)。结论:高表达Hsp70的C2C12细胞有氧氧化相关酶的活性下降,抑制了葡萄糖的有氧氧化,提示Hsp70在骨骼肌细胞能量代谢中起重要调节作用。; 王磊王尊姜文君; 关键词：热休克蛋白70 骨骼肌细胞

热休克蛋白70对骨骼肌细胞纤维类型分化的影响被引量：1: 2013年; 目的:探讨高表达热休克蛋白70(heat shock protein 70,Hsp70)对骨骼肌细胞(C2C12细胞)纤维类型分化的影响。方法:通过构建重组pTRE2hyg-Hsp70质粒稳定转染C2C12细胞系,建立Hsp70高表达的C2C12细胞系。经过诱导分化形成骨骼肌纤维,观察不同时间点(0、3、7 d)C2C12细胞的分化情况,并检测骨骼肌类型标志肌球蛋白重链(myosin heavy chain,MHC)的表达情况。结果:与对照组相比,高表达Hsp70的C2C12细胞系分化后的3、7 d,MHCⅠmRNA及蛋白的表达明显增高(P<0.05),而在分化后7 d,MHCⅡb mRNA及蛋白的表达明显下降(P<0.05)。结论:高表达Hsp70的骨骼肌细胞C2C12可以诱导MHCⅠ的表达,促进骨骼肌细胞向Ⅰ型肌纤维转化。; 王磊王尊刘跃飞顾一煌; 关键词：热休克蛋白70 骨骼肌细胞

热休克蛋白70过表达对骨骼肌细胞内ATP水平的影响被引量：2: 2013年; 目的探讨热休克蛋白70(heat shock protein 70,Hsp70)过表达对骨骼肌细胞(C2C12)内ATP水平的影响。方法通过构建重组pTRE2hyg-Hsp70质粒,稳定转染C2C12细胞系,建立Hsp70过表达的C2C12细胞系。分别在转染后细胞培养的不同时间点(0 d,3 d,7 d),检测细胞内ATP的水平。结果 Hsp70过表达的C2C12细胞系在培养的3 d,7 d,细胞内ATP的水平分别达到(14.5±2.87)nmol/mg蛋白质、(15.3±3.12)nmol/mg蛋白质,与对照组相比明显增高(P<0.05)。结论 Hsp70过表达的骨骼肌细胞可以提高细胞内的ATP水平,提示Hsp70对骨骼肌细胞的能量代谢产生影响。; 王磊王尊刘跃飞顾一煌; 关键词：HSP70热休克蛋白质类肌纤维腺苷三磷酸

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江苏省高校优势学科建设工程资助项目(YS2012ZYX406)