国家高技术研究发展计划(2001AA241132)
- 作品数：12 被引量：174H指数：8
- 相关作者：王蒂司怀军张宁王清李惠霞更多>>
- 相关机构：甘肃农业大学甘肃省作物遗传改良与种质创新重点实验室甘肃省农业科学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划甘肃省自然科学基金高等学校优秀青年教师教学科研奖励计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 马铃薯晚疫病抗性反应中木质素及防御酶活性的变化被引量：26
- 2006年
- 以不含R基因的马铃薯水平抗性材料LBr-12和感病品种费乌瑞它(Favorita)为材料,接种马铃薯晚疫病菌 (P．infestand后,对马铃薯叶片中苯丙氨酸解氨酶(PAL)、多酚氧化酶(PPO)和过氧化物酶(POD)活性以及木质素含量变化进行了研究．结果表明,接种后LBr-12和Favorita的PAL、PPO、POD的酶活性都升高,其中抗性材料与感病品种相比,升高幅度大,持续时同长;同时抗病品种的木质素含量增幅也大于感病品种．
- 李惠霞王蒂
- 关键词：马铃薯晚疫病水平抗性防御酶木质素
- 根癌农杆菌介导的马铃薯高效遗传转化体系的研究被引量：40
- 2004年
- 通过根癌农杆菌介导的遗传转化方法,建立了马铃薯栽培品种“费乌瑞它(Favorita)”茎段和试管薯的遗传转化体系,其转化频率分别可达25.6%和36.8%。实验结果表明,玉米素有助于茎段和试管薯转化再生芽的分化,乙酰丁香酮可以提高茎段的转化率,但对试管薯的转化作用效果不明显。卡那霉素生根筛选和PCR鉴定结果显示,在分化培养基上再生的转化植株假阳性率较高,在遗传转化工作中要加大转基因植株的数量,才有可能获得所期望的转基因植株群体。
- 张宁司怀军李学才王蒂
- 关键词：马铃薯根癌农杆菌茎段试管薯
- 马铃薯花粉离体萌发及花粉管生长的研究被引量：10
- 2006年
- 吴旺泽彭晓莉王蒂
- 关键词：马铃薯离体萌发花粉管生长
- 转基因纯合四倍体马铃薯多酚氧化酶活性及同工酶谱的变异被引量：8
- 2005年
- 选择14个已插入反义PPO基因的纯合四倍体马铃薯“GD-9-qc”系列,进行叶片、微型薯PPO活性检测和同工酶分析。结果表明,不同品系间的叶片、微型薯PPO活性存在极显著差异,其中2个品系的叶片及8个品系的微型薯PPO活性明显低于对照;供试转基因品系间的叶片PPO同工酶谱带的颜色深浅表现差异,所示结果与PPO活性检测基本一致;而不同品系间微型薯PPO同工酶谱带除颜色表现不同外,其中4个品系的同工酶主带消失,推测是由反义PPO基因直接抑制的结果。此外,在某些品系中,叶片与微型薯PPO活性增减趋势不同。实验获得了叶片PPO活性较高、块茎PPO活性低的目标转基因品系。
- 王清黄惠英陈亚兰王蒂
- 关键词：PPO活性
- 外源硅及脯氨酸对盐胁迫下马铃薯试管苗的影响被引量：17
- 2005年
- 在无菌微生态环境下,对马铃薯试管苗进行盐胁迫和外源硅及脯氨酸处理。结果表明,盐胁迫能够明显降低试管苗苗高、根质量和鲜质量;低盐浓度(0.1%NaCl)能够促进根的伸长,但这种促进作用随NaCl浓度的升高而消失。外源硅能够促进低盐胁迫下试管苗根的生长、鲜质量和根质量的增加,并降低试管苗游离脯氨酸含量。外源脯氨酸对盐胁迫下试管苗的生物产量促进效应低于硅,但却明显提高了试管苗的叶绿素含量。试验证明:外源硅及脯氨酸能够显著缓解盐胁迫对试管苗所造成的伤害。
- 王清黄惠英张金文王蒂
- 关键词：马铃薯试管苗盐胁迫脯氨酸
- 马铃薯成熟花粉原生质体分离被引量：6
- 2004年
- 初步研究了马铃薯成熟花粉原生质体的分离条件,首次采用“低温-萌发-酶解”三步法从马铃薯成熟花粉中分离出原生质体。其分离途径是:经6℃低温处理的成熟花粉在萌发液中萌发出短花粉管时转入酶液。在酶液作用下,花粉发生质壁分离,花粉管脱落,随后原生质体缓慢地从花粉管断裂处挤出。在萌发30 min和1.0 molL-1甘露醇渗透压下,原生质体分离效果最佳,分离率最高达19.40%。用0.1%荧光增白剂检测脱壁完全,FDA荧光检测表明花粉原生质体具有生活力。
- 张峰王蒂王玉萍
- 关键词：马铃薯原生质体
- 马铃薯晚疫病菌培养条件的研究被引量：14
- 2007年
- 通过对马铃薯晚疫病菌在7种不同培养基上及不同温度下的菌落生长和产孢情况的比较观察,对马铃薯晚疫病菌的培养条件进行筛选。结果表明,马铃薯晚疫病菌在黑麦培养基上的生长速度最快,产孢量最大,燕麦培养基次之,V_8培养基和PDA最差。在5～25℃温度范围内,马铃薯晚疫病菌均能产生孢子囊,但以20℃产生孢子囊数目最多且孢子囊较大。
- 李惠霞刘永刚王蒂杨富银
- 关键词：马铃薯晚疫病菌培养基温度
- Wun1启动子Me13'非转录区的克隆及Hrp基因植物表达载体的构建被引量：4
- 2004年
- 采用PCR技术,分别从马铃薯、金花菊基因组DNA中扩增到了马铃薯损伤诱导启动子Wun 1,和对启动子活性有显著增强作用的Me1 3 非转录区。经序列同源性分析表明,马铃薯损伤诱导启动子Wun 1与已知序列的同源性为96.86 %,Me1 3 非转录区的同源性达99 %。得到的Wun 1克隆与原序列有一定的差异,尤其在735～768处差异较大,为一新颖的启动子,现已注册到分子生物学GenBank数据库(GenBank, gi: AY485646)。利用来自欧文氏梨火疫病菌的Hrp基因与克隆的Wun 1启动子和Me1 3 非转录区构建了Wun 1-Hrp-Me1 3 植物表达载体pBI WHM,同时构建了CaMV 35S-Hrp-Me1 3 植物表达载体pBI HM,为下一步鉴定Wun 1启动子和Me1 3 增强子对Hrp基因表达活性的影响及通过遗传转化培育植物抗病品种奠定了基础。
- 向云王蒂张金文
- 关键词：ME1HRP基因植物表达载体
- 马铃薯单细胞分离技术的研究被引量：5
- 2004年
- 以马铃薯栽培品种“甘农薯1号”的无菌苗、子叶以及已建立的细胞悬浮培养系为材料,分别用酶解法和过滤细胞悬浮培养系的物理方法进行了马铃薯单细胞分离技术的研究。结果表明,酶解时,果胶酶浓度为0.20%～0.25%,解离4h获得的单细胞产量最高,且单细胞分裂频率可达16%以上;另外,酶解愈伤组织分离单细胞,比酶解子叶和叶片效果更好。而在用细胞悬浮培养物进行单细胞分离研究时,发现瓶壁法是一种最好的细胞悬浮液继代方法,可直接获得90%的单细胞频率,且细胞形状圆、胞质浓厚。采用过滤法分离单细胞,可得到98%的单细胞频率;3层细胞筛过滤法可有效提高所得单细胞的植板率。总体比较,过滤细胞悬浮培养物的物理操作方法获得的单细胞比酶解法获得的单细胞分裂能力更强。
- 张宁司怀军王蒂
- 关键词：马铃薯酶解法过滤法
- 影响马铃薯叶肉原生质体褐化的因素及AgNO_3对其褐化和分裂的作用被引量：21
- 2004年
- 影响马铃薯叶肉原生质体褐化的主要因素是6-BA和基因型,还有NAA等其它因素。在相同浓度的6-BA下,同一材料的原生质体褐化率在NAA1 2mg/L时最高,在0 8和1 0mg/L时相近。在相同NAA浓度下,6-BA浓度越高,同一材料的原生质体越容易褐化。原生质体褐化率与基因型也有关。在相同的NAA和6-BA浓度配比下,6个材料的原生质体褐化难易顺序是CW-2-3>CW-1-4>CW-2-7,A-1>82-75>2-10,二倍体野生种的原生质体比双单倍体品系的更容易发生褐化。AgNO3可抑制马铃薯叶肉原生质体的褐化,从而提高细胞分裂频率。在本试验中,0 6mg/LAgNO3抑制效果最好,原生质体分裂频率最高。
- 张淑红王蒂王清
- 关键词：马铃薯叶肉原生质体褐化细胞分裂NAA6-BA
