教育部科学技术研究重点项目(204084)
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
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- 中药中的霉菌毒素对细胞内基因修复系统的影响
- 2012年
- 目的观察中药中霉菌毒素对NIH/3T3细胞中DNA聚合酶β(DNApolβ)表达量的影响,研究中药不良反应的机制和互隔交链孢酚致细胞变异的机制。方法体外培养NIH/3T3细胞,用不同浓度的霉菌毒素——互隔交链孢酚(AOH)加入培养液影响细胞。用RT-PCR方法从细胞全RNA中扩增出DNA聚合酶β基因cDNA序列,同时扩增β-actin进行半定量分析了解其表达量的变化。结果成功从NIH/3T3细胞中扩增了DNA聚合酶β基因cDNA,通过半定量分析发现随着药物浓度的增高,DNA聚合酶β表达量上调。结论霉菌毒素可导致细胞中的DNA聚合酶β表达量上调从而影响基因修复系统的功能,AOH的作用浓度越高,DNA聚合酶β基因表达量越高。
- 朱涵杨春章茜
- 关键词：互隔交链孢酚DNA聚合酶Β
- 互隔交链孢酚对NIH/3T3细胞中DNA聚合酶β的致突变作用被引量：2
- 2012年
- 背景:近年来研究发现食管癌细胞中存在DNA聚合酶β的突变。目的:观察互隔交链孢酚对NIH/3T3细胞中DNA聚合酶β基因序列的影响,研究互隔交链孢酚致细胞变异的机制。方法:用不同浓度(2,4,6,8μmol/L)的互隔交链孢酚作用于NIH/3T3细胞,并设置对照组。用RT-PCR法从细胞总RNA中扩增出DNA聚合酶β基因cDNA序列,应用T-A克隆技术,克隆至pGEM-T载体后进行测序,分析其序列变化。结果与结论:2μmol/L互隔交链孢酚处理后的细胞内DNA聚合酶β基因序列无任何变化。而4μmol/L组中DNA聚合酶β基因有1个位点发生突变,8μmol/L组和16μmol/L组中各有2个位点发生突变,此3组的突变存在相同的位点。结果证实,互隔交链孢酚可导致NIH/3T3细胞中的DNA聚合酶β发生点突变,互隔交链孢酚浓度越高,点突变的数量越多,且存在突变活跃位点。
- 朱涵樊红琨章茜
- 关键词：互隔交链孢酚DNA聚合酶ΒNIH/3T3细胞克隆突变
