江苏省高校自然科学研究项目(06KJD310040)
- 作品数：4 被引量：17H指数：2
- 相关作者：许文荣朱伟钱晖黄玲许晓蒙更多>>
- 相关机构：江苏大学更多>>
- 发文基金：江苏省高校自然科学研究项目江苏省自然科学基金江苏省普通高校研究生科研创新计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人骨髓间质干细胞来源外体的分离鉴定及生物学特性被引量：9
- 2010年
- 目的分离纯化人骨髓间质干细胞(MSCs)来源的外体(exosome),并鉴定其生物学特性。方法收集人骨髓MSCs培养上清,采用超滤及梯度离心法分离并纯化exosome,通过透射电镜观察其形态,SDS-PAGE电泳初步分析exosome蛋白质组成,westernblot检测exosome包含的相关蛋白质,用流式细胞术检测其表面标志CD44、CD29等。结果骨髓来源的MSCs能够分泌exosome,电镜下呈椭圆或碟状的囊泡结构,直径约40～100nm。exosome内含多种蛋白质成分,具有MSCs膜脂质成分,能与PKH26脂质染料结合,并表达MSCs表面黏附分子CD44、CD29。结论人骨髓MSCs能够分泌exosome,采用超滤及梯度离心法可以成功从MSCs培养上清中分离纯化exosome,MSCs分泌的exosome具有MSCs的胞膜及胞质蛋白组分。本研究可为进一步开展人骨髓MSCs来源exosome的生物学特性及其在组织损伤修复中的作用和机制研究提供实验基础。
- 朱伟黄玲许晓蒙钱晖许文荣王梅钱海
- 关键词：骨髓间质干细胞EXOSOME
- 体外诱导人骨髓间质干细胞分化为肝细胞样细胞被引量：4
- 2008年
- 目的:探讨人骨髓间质干细胞(MSCs)在体外特定条件下是否可以转化为肝细胞样细胞。方法:分离培养人骨髓间质干细胞,采用肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibrob lastgrowth factor,bFGF)及CC l4损伤的小鼠肝脏共培养等诱导方式,在不同时间点分别用RT-PCR和荧光定量PCR检测肝细胞特异性基因的表达,免疫组织化学染色检测肝细胞标志。结果:在HGF和bFGF诱导第7天时甲胎蛋白(alphafetal prote in,AFP)、细胞角蛋白18(cytokeratin-18,CK18)和色氨酸2,3-双加氧酶(tryptophan 2,3-d ioxygenase,TDO)基因表达阳性,CK18和TDO的表达随诱导时间延长增高;第7天诱导细胞组织化学染色AFP、白蛋白(ALB)、肝细胞核因子(hepatocyte nuc lear factor,HNF)、肝细胞特异性抗原(HSA)和CK18表达阳性。与损伤小鼠肝组织共培养21 d后细胞表达AFP和TDO。结论:HGF和bFGF联合诱导以及与CC l4损伤肝组织共培养的方法可体外促进人MSCs分化为肝细胞样细胞,可为肝脏疾病或肝损伤的干细胞治疗提供细胞来源。
- 司煜安许文荣严永敏钱晖朱伟周忠海徐静周洪兴曹慧玲李继刚
- 关键词：骨髓间充质干细胞肝细胞细胞分化
- 间质干细胞与肿瘤微环境被引量：2
- 2010年
- 黄玲朱伟许文荣
- 关键词：间质干细胞肿瘤肿瘤微环境
- “纤维蛋白原-凝血酶”法建立人胃癌组织块裸鼠胃癌原位移植模型被引量：2
- 2010年
- 目的:采用"纤维蛋白原-凝血酶"法建立人胃癌组织块裸鼠胃癌原位移植模型,为研究胃癌的发病机制及实验治疗提供理想的动物模型。方法:以人胃癌细胞株SGC-7901反复接种传代于BALB/C裸鼠皮下形成的皮下移植瘤组织块为材料,采用"纤维蛋白原-凝血酶"法将其粘贴于裸鼠胃壁,观察原位移植瘤的生长情况,移植成功率及转移情况。结果:"纤维蛋白原-凝血酶"法人胃癌组织块原位移植成功率为100%,局部淋巴结转移率为100%,肝脏及其他脏器转移发生率为83%,腹腔积液形成率为50%。结论:"纤维蛋白原-凝血酶"法能成功地建立人胃癌组织块裸鼠原位移植模型,并能很好地重现胃癌患者的临床转移过程,可为胃癌的临床研究提供一种简便、易行的实验模型。
- 黄玲朱伟许晓蒙钱晖许文荣
- 关键词：原位移植裸鼠
