国家自然科学基金(30471323)
- 作品数：15 被引量：78H指数：6
- 相关作者：张峰卢亚楠王海峰宫晶宋志东更多>>
- 相关机构：大连水产学院大连海洋大学辽宁出入境检验检疫局更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金辽宁省科学技术农业攻关计划项目辽宁省科技厅基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学理学环境科学与工程更多>>
- 化学发光免疫分析与酶联免疫分析法检测水产品药物残留的比较研究被引量：11
- 2014年
- 对检测水产品中呋喃唑酮代谢物（AOZ）和氯霉素（CAP）药物残留的两种方法——化学发光免疫分析（CLEIA）和酶联免疫分析（ELISA）法进行了比较研究。结果表明：两种药物残留检测中,CLEIA分析方法的线性范围和检出限均优于ELISA法,且两种免疫分析法的添加回收率均具有很好的相关性;用CLEIA法检测AOZ的检出限为0.01μg/kg,线性范围为0.01~2.56μg/kg,检测CAP的检出限为0.016μg/kg,线性范围为0.025~6.400μg/kg;用ELISA法检测AOZ的检出限为0.1μg/kg,线性范围为0.10~1.62μg/kg,检测CAP的检出限为0.05μg/kg,线性范围为0.05~4.05μg/kg;用CLEIA法检测CAP的批内变异系数（RSD）为5.5%~11.3%,批间RSD为12.3%~20.9%,检测AOZ的批内RSD为6.6%~11.1%,批间RSD为15.6%~18.3%。研究表明,用CLEIA法检测水产品药物残留较ELISA法检出限低、线性范围宽,虽然检出CAP和AOZ的变异系数均高于ELISA法,但仍符合《兽药残留酶联免疫试剂（盒）备案参考评判标准》的规定。
- 萨仁托雅张峰郑有虎卢亚楠
- 关键词：化学发光免疫分析酶联免疫分析氯霉素
- 基于分子动力学的miRNA 3'端与Argonaute蛋白PAZ功能域相互作用的研究被引量：1
- 2012年
- 应用分子动力学方法研究了人类miRNA 3'末端3碱基与PAZ功能域的结合模式,并采用线性相互作用能方法计算miRNA 3'末端片段与PAZ之间的结合自由能。结果表明:miRNA 3'末端碱基组成决定了其和PAZ功能域的结合模式以及结合自由能,UGU与PAZ的结合最为稳定,结合自由能为-37.248kJ/mol,而CGA与PAZ的结合情况相对不太稳定,结合自由能为-5.418 kJ/mol;miRNA 3'端与PAZ的结合自由能与其在人类miRNA基因中的分布频率存在一定的相关性,UGU在人类基因中占6.768%,而CGA仅占0.414%。本研究结果可为进一步研究miRNA与Argonaute蛋白的相互作用以及对人类疾病防治和生物进化探索提供重要信息。
- 马志张峰张慧晓杨威
- 关键词：MIRNA分子动力学模拟
- 大连地区几种食用贝类药物残留检测
- 应用化学发光免疫法检测技术对大连地区几种食用贝类(扇贝、文蛤、青柳蛤、菲律宾蛤仔和魁蚶)体内呋喃唑酮酶、氯霉素酶、恩诺沙星和有机磷残留进行检测。结果表明,所检测的贝类体内均有不同程度的上述几种药物残留,但其药物的残留含量...
- 吕丽郑峻峰张峰
- 关键词：药物残留化学发光免疫分析
- 文献传递
- 刺参补体AjC3活性相关miRNA的筛选与初步研究被引量：7
- 2015年
- 为了从miRNA调控方面探索刺参Apostichopus japonicus的免疫机制,用脂多糖刺激刺参,在第0、6、12 h取样(记为样本A00、A06、A12),以海胆Strongylocentrotus purpuratus基因组为参照基因,运用高通量测序和相关生物信息学方法筛选与刺参补体(AjC3)相关的miRNAs,并通过实时定量PCR验证相关miRNA和AjC3 mRNA的表达变化。结果表明:经比对筛选出刺参体腔细胞的miRNA共41个;通过靶基因预测和差异表达分析,共得到靶基因为补体AjC3的miRNA有3个,分别为spu-miR-133、spu-miR-137、spu-miR-2006;3种miRNA和AjC3 mRNA实时定量PCR显示,spu-miR-133表达量呈先升高后降低的趋势,12 h达到最高值,spu-miR-137表达量呈先降低后升高的趋势,9 h达到最低值,12 h达到最高值,spu-miR-2006表达量呈先升高后降低的趋势,9 h达到最高值,AjC3 mRNA表达量呈先升高后降低的趋势,9 h达到最高值。研究表明,spu-miR-133、spu-miR-137可能共同抑制调控补体AjC3基因表达,spu-miR-2006在免疫反应中对其他靶基因进行调控。
- 翟钰曹雁惠张峰常亚青
- 关键词：MIRNA靶基因MRNA
- 仿刺参体腔液补体类似物化学发光免疫检测被引量：8
- 2007年
- 首次应用酶联化学发光免疫检测(Chemiluminesent Immunoassay,CLIA)技术测定仿刺参体腔液补体类似物AjC3和AjC4。羊抗人C3、C4抗体吸附到经过紫外线处理的聚苯乙烯管内,采用辣根过氧化物酶(HRP)标记抗体。过氧化氢和鲁米诺为辣根过氧化物酶的底物。捕获抗体包被最适浓度为1μg/ml,免疫反应20℃孵育2h达到平衡。HRP-IgC3、IgC4抗体复合物适宜稀释度为1:2000,HRP-IgC3I、gC4抗体复合物4℃下保存8d性能稳定,室温下5d内性能稳定。标准品浓度在0.1～10ng/ml范围内时与化学发光值之间具有良好的线性相关性,检测灵敏度为0.1ng/ml。结果表明应用酶联化学发光免疫检测技术能够检测到仿刺参体腔液中含有补体类似物,AjC3含量为6.58±1.4μg/ml,AjC4含量为0.67±0.3μg/ml。
- 张峰王海峰宫晶常少杰
- 关键词：仿刺参体腔液
- 仿刺参体腔细胞染色方法的研究被引量：3
- 2008年
- 通过改变固定时间、孵育时间、染色时间及温度、分色方式等染色条件，研究不同染料、不同染色条件对仿刺参Apostichopus japonlcus体腔细胞的染色效果，并以观察体腔细胞内的颗粒、细胞核、细胞质和伪足的着色情况和细胞整体轮廓清晰程度为标准，筛选了适用于仿刺参体腔细胞的理想染色方法。结果表明：25℃室温下，采用滴片制片法，用湿盒孵育15～30min，用甲醇固定1～2min，用φ（Wright’s）：φ（Giemsa）=1：1的混合液染色1～2min，水洗，用中性树胶封片，在此条件下对仿刺参体腔细胞的染色效果最好。
- 陈静李华吴艳辉陈辉
- 关键词：仿刺参体腔细胞染色方法
- 4种抗凝剂对刺参体腔细胞的抗凝效果被引量：5
- 2006年
- 研究了不同浓度的柠檬酸钠、肝素钠、乙二胺四乙酸二钠（EDTA-Na2）和草酸钠对刺参Stichopus japonicus体腔细胞的抗凝效果。结果表明，3．8mg／mL的柠檬酸钠、1．0～1．5mg／mL的EDTA-Na2、0．2～0．6mg／mL的肝素钠、1．0～1．5mg／mL的草酸钠均能较好地保持体腔细胞的形态活性，适合用作刺参体腔细胞的抗凝剂。4种抗凝剂中EDTA-Na2的效果最好。
- 张峰宋志东刘洪伟宫静王海峰
- 关键词：刺参肝素钠草酸钠体腔细胞抗凝剂
- 孔雀绿分子印迹96孔检测板的制备及应用研究被引量：4
- 2016年
- 为更加快速、灵敏、简单地检测水产品中的孔雀绿（MG）残留,通过原位聚合法,以乙腈/甲苯溶液（V/V=3∶1）为溶剂、甲基丙烯酸（MAA）为功能单体、二甲基丙烯酸乙二醇酯（EGDMA）为交联剂（模板分子与之比例为1∶4∶20）,制备了分子印迹聚合物（MIP）。通过包被MIP到96孔板上研发了以化学发光免疫分析法（CLIA）检测的MG-MIP-96孔检测板,其标准曲线为y=-29197.49x＋1945998.45,R2=0.9416,线性范围为30~66.64 ng/m L,检测限为3.355ng/m L。批内变异系数范围为7.38%~18.07%,批内回收率范围为103.41%~144.45%;批间变异系数范围为12.45%~17.52%,批间回收率范围为100.07%~143.20%。以孔雀石绿结构类似物副品红（PA）和结晶紫（CV）进行特异性检测的交叉率分别为27.97%、30.97%。说明此新型检测方法具有很大的研究价值和实际应用价值。
- 张建清李明张思张峰卢亚楠
- 关键词：孔雀绿分子印迹聚合物化学发光
- 壳寡糖对中国对虾血细胞体外吞噬过程中活性氧作用的影响被引量：1
- 2012年
- 病菌和外来异物入侵时,对虾血细胞在吞噬过程中存在利用活性氧杀菌防御机制。对中国对虾血细胞体外吞噬现象进行观察,利用化学发光法和NBT法检测血细胞体外吞噬过程中产生的活性氧,以研究不同浓度壳寡糖对活性氧作用的影响。结果发现,对虾的血细胞在体外具有一定的吞噬能力,吞噬率为42.7%±0.80%;吞噬指数为1.34±0.11;随着加入壳寡糖浓度的提高,化学发光法和NBT法检测数值具有相同的趋势,其中1.0mg/L,5.0mg/L以及10mg/L壳寡糖对活性氧的产生具有明显的增强效果(P<0.05)。结果表明,采用的化学发光法与NBT法可以检测出血细胞吞噬过程中产生的活性氧,并证实壳寡糖对对虾的血细胞产生的活性氧有不同程度的诱导增强作用。
- 卢亚楠张峰王丽丛玉婷杜昱光
- 关键词：壳聚糖血细胞活性氧化学发光法
- 仿刺参补体类似物活性的测定被引量：14
- 2007年
- 用3种方法对仿刺参Apostichopus japonicus体腔液、体腔液上清液及体腔细胞中的总补体溶血活性和补体类似物AjC3、AjC4活性进行测定。结果表明:在仿刺参体腔液、体腔液上清液和体腔细胞中能够检测到总补体溶血活性和补体类似物AjC3、AjC4,表明仿刺参体内存在有脊椎动物的补体类似物,且活性与正常人补体活性相似。仿刺参体内总补体溶血活性和补体类似物AjC3、AjC4的活性依次顺序均为体腔液>体腔细胞>体腔液上清液。
- 张峰宫晶王海峰赵啸李宣延
- 关键词：仿刺参体腔液体腔细胞溶血活性
