国家高技术研究发展计划(2006AA10A205)
- 作品数：64 被引量：205H指数：7
- 相关作者：金宁一鲁会军刘秀梵彭大新王红宁更多>>
- 相关机构：扬州大学军事医学科学院吉林大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家科技支撑计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生哲学宗教更多>>
- 两株表达H9亚型禽流感病毒HA基因的重组鸡痘病毒的构建及其免疫效力被引量：2
- 2008年
- 将H9亚型禽流感病毒(AIV)HA基因插入到具有新复制非必需区的通用型质粒载体pP12LS中构建转移载体pP12LSH9A,再分别转染预先感染不同毒力的2种鸡痘病毒(FPV)282E4株和LP株的鸡胚成纤维细胞,经系列蓝斑筛选纯化,获得了2种重组鸡痘病毒(rFPV),分别命名为rFPV282-12LSH9A和rFPVLP-12LSH9A。将这2株rFPV在SPF鸡和带有高水平抗H9亚型AIV母源抗体的商品鸡上分别进行免疫效力试验。结果:rF-PV282-12LSH9A和rFPVLP-12LSH9A在SPF鸡上的排毒保护率均为100%(10/10),在商品鸡上的排毒保护率分别为88%(23/26)和92%(24/26)。结果表明获得了2株在带有抗H9亚型AIV高水平母源抗体的商品鸡上免疫效力较好的rFPV。
- 刘武杰孙蕾陈素娟徐忠林刘金彪刘秀梵
- 关键词：H9亚型禽流感病毒重组鸡痘病毒母源抗体免疫效力
- IBV结构蛋白对鸡CD4+CD8+淋巴细胞亚群影响的研究
- 在禽传染性支气管炎免疫过程中,细胞免疫不但可以对最初的感染具有抑制作用,而且在抗IBV感染中起主要保护作用。而CD4T淋巴细胞和CD8T淋巴细胞数量是衡量机体细胞免疫水平的重要标志。为了研究比较IBV三种主要结构蛋白(S...
- 汪雪王红宁阳泰鲁丹张云飞唐俊妮
- 文献传递
- A型H3579亚型流感多表位核酸疫苗构建及实验免疫研究
- 目前流感病毒的流行多亚型并存,禽流感不断突破种间屏障感染人类,而以传统灭活疫苗预防流感的策略已难以应对流感迅速变异的趋势。本研究设计并合成了含有H3、H9的HA和H5N1 NA中和表位,M、NP基因保守序列CTL表位的多...
- 南文龙金宁一鲁会军陈义锋赵翠青田明尧白靓张金双徐一鸣田宇飞朱占波
- 关键词：流感核酸疫苗多表位
- 文献传递
- 鸽接种鸡痘病毒体内抗体消长规律的研究被引量：1
- 2009年
- 为检测免疫鸡痘病毒(FPV)的幼鸽体内抗体消长规律和毒性,将试验鸽分成4组,按一个使用剂量、增加免疫剂量、二次免疫和对照组对幼鸽进行刺种接种。试验组接种鸡痘病毒,对照组接种生理盐水。在试验期间鸽子精神状态良好,采食、饮水正常,未观察到病理变化。在免疫后1～8周采血,分离血清,进行抗FPV特异性抗体和中和抗体效价检测。免疫后1周中和抗体开始升高,3周达到高峰,4周开始下降,8周仍高于对照组;增加免疫剂量组和二次免疫组产生的抗体水平高,但消长规律与使用剂量组相同。结果表明鸡痘病毒能刺激鸽产生特异性抗体和中和抗体,且维持时间较长,无毒性,生物安全性好。
- 金明兰金宁一鲁会军马鸣潇郑敏刘慧娟
- 关键词：鸡痘病毒抗体消长规律
- 禽流感DNA疫苗重组质粒组织分布的实时荧光定量PCR方法建立被引量：1
- 2011年
- 为研究禽流感病毒(AIV)DNA疫苗重组质粒在组织中的分布情况,本研究以AIV DNA疫苗pCAGGoptiHA 5HA基因为检测对象,分别建立检测AIV DNA疫苗重组质粒的SYBR Green Ⅰ实时定量PCR方法和TaqMan MGB实时定量PCR方法。经优化比较两种方法的特异性、敏感性、重复性和污染率。结果表明,两种方法的标准曲线线性关系均较好,相关系数均达到0.999;最低检测量为42 copies,特异性强;探针法的重复性优于染料法,污染率低于染料法,因此采用TaqMan MGB实时定量PCR方法检测AIV DNA疫苗重组质粒组织分布情况。
- 熊杰彭广能王国俊李俊平姜永萍陈化兰
- 关键词：禽流感DNA疫苗实时荧光定量PCR
- H5亚型禽流感DNA疫苗pCAGGoptiHA5对鸭免疫保护效力的研究被引量：1
- 2011年
- 为评价H5亚型禽流感病毒(AIV)DNA疫苗pCAGGoptiHA5对鸭的免疫保护效力,本研究将pCAGGoptiHA5以20μg、30μg和50μg剂量免疫3周龄SPF鸭,首次免疫后3周加强免疫一次。2周后以105EID50的鸭源高致病力AIV由鼻腔攻毒,观察SPF鸭发病和死亡情况。分别于攻毒后3d、5d和7d采集喉头及泄殖腔拭子进行病毒分离,检测鸭排毒情况及免疫和攻毒后血凝抑制(HI)抗体、中和(NT)抗体的动态变化。结果表明:30μg和50μg免疫组均可对免疫鸭产生100%保护,而20μg剂量组则可对免疫鸭提供80%保护。
- 李俊平赵双成常晓飞柳金雄曾显营卫星辉李福基姜永萍陈化兰
- 关键词：禽流感DNA疫苗
- 鸡IL-1β、IL-16基因真核表达质粒对IBV DNA疫苗的免疫增强效应研究
- 2011年
- 为研究鸡IL-1β、IL-16基因真核表达质粒对鸡传染性支气管炎病毒(IBV)DNA疫苗免疫效果的影响,根据GenBank登录的鸡IL-1β和IL-16序列设计两对引物,采用RT-PCR方法从四川山地乌骨鸡外周血淋巴细胞RNA中克隆IL-1β和IL-16基因,与真核表达质粒pcDNA3.1(+)连接构建了pDNAIL-1β和pDNAIL-16。分别将两种重组质粒与IBVDNA联合免疫SPF雏鸡并进行攻毒试验。结果表明,pDNAIL-1β和pDNAIL-16均能促进血清中特异性抗体水平和外周血T淋巴细胞亚群数量的增加(p<0.05),增强IBV DNA疫苗对同型强毒的保护率15%～25%,pDNAIL-1β提升DNA疫苗的抗体水平的时间比pDNAIL-16多7d。试验表明,鸡IL-1β、IL-16基因真核表达质粒对IBV DNA疫苗的免疫具有增强作用。
- 张毅王红宁樊汶樵张安云曹海鹏郭自成丁梦蝶
- 关键词：禽传染性支气管炎病毒免疫增强作用
- 鸡痘病毒抗体在鹌鹑体内的消长规律
- 2011年
- 采用鸡痘弱毒疫苗按1个使用剂量、增加免疫剂量、2次免疫和对照组（生理盐水）对鹌鹑进行刺种,在免疫后的1~8周采血,检测特异性抗体和中和抗体,研究鸡痘病毒抗体在鹌鹑体内的消长规律,对鸡痘病毒疫苗应用于鹌鹑的免疫效果及生物安全性进行初步评价。在试验期间试验动物精神状态良好,采食、饮水正常,未发生病理变化;抗鸡痘病毒特异性抗体和中和抗体效价免疫后1周显著升高,3周达到高峰,5周开始下降,8周时仍高于对照组的抗体水平,增加免疫剂量组产生的抗体水平高,但消长规律与使用剂量组相同。表明鸡痘病毒疫苗能刺激鹌鹑产生特异性抗体和中和抗体,维持时间较长,无毒副作用,生物安全性好。
- 金明兰侯继波南文龙鲁会军马鸣潇郑敏金宁一
- 关键词：鸡痘病毒抗体鹌鹑
- H5N1亚型高致病性禽流感病毒在鸽子体内分布的研究被引量：5
- 2012年
- 应用实验室分离的鸭源高致病性禽流感病毒(AIV)A/Duck/Harbin/01/2004(H5N1)毒株,经SPF鸡胚增殖病毒,通过滴鼻途径人工感染鸽子,通过临床观察、剖检、HA、HI、PCR等方法进行体内分布和毒性研究。结果病死鸽子的肺脏损害最为严重,其次为脑、法氏囊;在病死鸽子的肺、肝、肾、脑中检测到病毒,其中肺中的病毒含量最高,脑、肝、肾中的病毒含量次之,再次为心和脾;各组织HA和HI检测阳性;各组织PCR检测到目的基因;对照组所有检测均为阴性。结果表明AIV在鸽子体内可以复制,并在肺、脑内病毒含量较高,为预防AIV奠定了基础。
- 金明兰南文龙鲁会军马鸣潇金宁一
- 关键词：高致病性禽流感病毒鸽子毒性
- 乳酸菌质粒提取方法的建立被引量：5
- 2008年
- 目的建立简便、快速、安全的乳酸菌质粒提取方法。方法将文献报道的乳酸菌质粒提取方法和大肠杆菌质粒提取方法相结合,建立乳酸菌质粒提取方法。通过方法比较、溶菌酶浓度优化和酶切分析,验证该方法的可行性。结果用所建立的方法提取的乳酸菌质粒电泳与酶切图谱与文献报道的提取方法相比均无明显差异。溶菌酶最佳浓度为10mg/ml,避免了毒性物质溴化乙锭的应用,减少了溶菌酶的用量和溶液体积。结论所建立的方法可用于乳酸菌质粒的快速提取,为乳酸菌分子生物学研究奠定了基础。
- 马海利金宁一李昌杜桢阚秋霞陈晓月
- 关键词：乳酸菌质粒溶菌酶
