转基因生物新品种培育专项(2009ZX08002-011B)
- 作品数：4 被引量：16H指数：3
- 相关作者：孙晓波马鸿翔张旭余桂红张鹏更多>>
- 相关机构：江苏省农业科学院南京农业大学巢湖职业技术学院更多>>
- 发文基金：转基因生物新品种培育专项国家科技支撑计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 毕氏海蓬子SbDREB基因的克隆与表达分析研究被引量：5
- 2012年
- 以毕氏海蓬子的基因组为模板,通过PCR技术扩增到一个编码DREB蛋白AP2保守结构域的基因片段;根据该片段序列设计引物,以毕氏海蓬子经NaCl处理的植株肉质茎cDNA为模板,应用RACE技术获得该基因的cDNA全长,命名为SbDREB(GenBank登录号:JF894301)。SbDREB基因cDNA全长1206bp,包含一个编码284个氨基酸的完整开放阅读框。对氨基酸序列比对分析表明,该蛋白在靠近N端具有典型的AP2/EREBP保守结构域,且该结构域与一些高等植物DREB类转录因子的AP2区域具有高度同源性。进化树分析表明SbDREB属于DREB亚家族中的A-6亚族。实时荧光定量PCR结果显示:干旱、高盐和ABA能够诱导其表达,而低温则使其表达下调,表明该基因在毕氏海蓬子植株对干旱、盐和低温等非生物胁迫的应答中起作用。
- 孙晓波刘金兵余桂红张旭张鹏马鸿翔
- 关键词：毕氏海蓬子DREB转录因子胁迫处理实时定量PCR
- 染色体重组对转基因大麦中gfp基因表达的作用被引量：2
- 2011年
- 利用5种转绿色荧光蛋白基因(gfp)大麦不同株系及野生型大麦为材料,对不同转基因株系间以及转基因株系与野生型植株间进行杂交,分别对不同世代植株的根尖、花粉中gfp基因的表达量进行测定。结果表明,不同转基因株系间的根尖、花粉的gfp基因在表达量上存在差异,同一转基因材料的gfp基因表达存在组织差异;gfp基因在杂交后代中作为一个显性基因以孟德尔方式稳定遗传,不同染色体上的gfp基因重组有利于提高转基因表达。
- 苏琰黎华刘知晓张小蒙朱雪金赫日陈建民
- 关键词：绿色荧光蛋白转基因表达大麦
- 盐地碱蓬SsDREB基因的克隆与表达分析研究被引量：4
- 2011年
- 盐地碱蓬(Suaeda salsa L.)是典型的盐碱地指示性植物。本研究以盐地碱蓬为材料,根据其他植物中干旱应答元件结合蛋白保守区的氨基酸序列设计简并引物,通过PCR扩增到一条长180bp的cDNA片段,继而利用RACE技术克隆了一个盐地碱蓬DREB基因全长cDNA,命名为SsDREB。SsDREBcDNA全长为1493bp,5'端有34bp的非翻译区,3'端具有完整的polyA尾,包含一个编码364个氨基酸的完整的开放阅读框。通过NCBI SMART对蛋白的保守区预测表明,其具有一个典型的AP2/EREBP保守结构域。AP2域的同源性比较分析表明,SsDREB与构树BpDREB、陆地棉GhDREB2蛋白具有97%、95%的同源性,进化分析表明SsDREB蛋白和陆地棉的亲缘关系最近。实时定量PCR结果表明,SsDREB基因在盐地碱蓬根、茎、叶中均有表达,且在叶中的表达量最高,在茎中的表达量最低。对碱蓬幼苗进行高盐、干旱、低温及ABA处理,进行表达胁迫分析,表明该基因的表达受高盐和干旱诱导,而对ABA和低温处理反应不明显,表明该基因在盐地碱蓬对干旱、高盐胁迫应答中起重要作用。
- 刘晓雪孙晓波王秀娥马鸿翔
- 关键词：盐地碱蓬RACE
- 转SbPIP1基因小麦植株的获得及发芽期耐盐性鉴定被引量：5
- 2012年
- 为了培育耐盐小麦新材料,利用基因枪转化法将海蓬子(Salicornia bigelovii Torr.)水通道蛋白(plasma membrane intrinsicprotein,SbPIP1)基因导入到小麦品种宁麦13和扬麦158中。对两个品种的各2500枚幼胚进行轰击,分别获得抗Basta再生植株237株和108株(筛选标记基因为Bar基因),经PCR鉴定阳性转基因植株分别为30株和7株。用130mg/L Basta除草剂对T1代幼苗进行喷施鉴定,发现T1代幼苗的Basta抗性出现了分离。遗传分析发现76.19%的株系表现为1对基因遗传的3:1分离,为单拷贝的基因导入。发芽期耐盐性分析发现81.22%的转基因株系的盐害指数低于受体宁麦13的盐害指数,耐盐性强于受体宁麦13。这些转基因材料将进一步用于小麦的耐盐分子育种研究。
- 余桂红孙晓波张旭周淼平马鸿翔
- 关键词：耐盐性
