国家自然科学基金(30672183)
- 作品数：3 被引量：5H指数：1
- 相关作者：张金明冀晨阳左中男储海函徐路生更多>>
- 相关机构：中山大学附属第二医院佛山市第一人民医院中山大学孙逸仙纪念医院更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 兔肌源性干细胞分离培养及诱导分化为神经细胞的研究被引量：1
- 2008年
- 目的探讨兔肌源性干细胞（MDSC）分离纯化及诱导分化为神经细胞的方法。方法取2—3周龄新西兰兔大腿肌肉，采用改进的Preplating技术分离MDSC，并应用流式细胞仪（FCM）、免疫细胞化学检测细胞表型。添加神经生长因子、全反式维甲酸、β-巯基乙醇诱导MDSC分化为神经细胞并运用免疫细胞化学和FCM检测特异性神经巢蛋白（Nestin）的表达。结果经过连续6d的差速贴壁分离得到小圆形及小菱形细胞，传代后进一步纯化，FCM结果显示这些细胞〉90％为desmin^＋，〉90％为bcl-2^＋，〉95％为CD45^-。免疫细胞化学显示大多数细胞为desmin^＋及bcl-2^＋。诱导后的细胞〉90％为Nestin^＋．结论采用改进的Preplating技术能很好地分离出MDSC，并能在体外诱导分化为神经细胞，为构建组织工程化尿道海绵体提供种子细胞。
- 董月桐冀晨阳张金明
- 关键词：肌源性干细胞神经细胞分化
- 小鼠肌源性干细胞高表达CD34、Sca-1、Bcl-2和desmin
- 2011年
- 目的:探讨小鼠肌源性干细胞(MDSCs)的生物学特性和表型。方法:取小鼠骨骼肌,用酶分步消化,应用差速贴壁法进行纯化获取MDSCs,观察细胞的形态,对MDSCs分别进行增殖能力、克隆形成率和融合情况等鉴定;通过流式细胞术、免疫荧光法及免疫印迹法(Western blotting)等检测初步确定细胞表型。结果:经差速贴壁法获取的MDSCs为圆形或短梭形细胞,聚集成簇,呈对数生长;细胞倍增时间(9.69±2.08)h,克隆形成率(13.35±2.54)%;细胞在高汇合度(>50%)或低血清(2%FBS)培养时,极易融合成肌管或肌细胞链;流式细胞术和免疫荧光技术鉴定:CD34、Sca-1、Bcl-2和desmin在原代MDSCs中的表达均>90%;Western blotting检测显示随着细胞的纯化,desmin表达越来越强,α-SMA表达越来越弱。结论:MDSCs通过差速贴壁法获取时纯度较高,它具有高水平表达CD34、Sca-1、Bcl-2和desmin的生物学特性,这4种蛋白可作为鉴定MDSCs的标志物。MDSCs增殖旺盛,可在体外大量扩增,是组织工程研究的一种新型种子细胞。
- 韦喆张金明安庚冀晨阳潘淑娟
- 关键词：肌源性干细胞CD34蛋白质BCL-2结蛋白
- 异种脱细胞海绵体尿道基质修复兔尿道缺损被引量：4
- 2007年
- 目的:探索应用猪脱细胞尿道基质修复兔尿道缺损的可行性。方法:实验于2004-01/12在中山大学第二附属医院实验中心完成。实验分组及方法:取新西兰雄性大白兔52只,体质量2.5～3.5kg;雄性家猪6只,体质量100kg左右。将大白兔随机分为实验组:用猪脱细胞海绵体尿道基质修复兔尿道缺损;自体尿道黏膜组:用镶嵌有自体尿道黏膜上皮的猪脱细胞海绵体尿道基质修复尿道缺损;对照组:未行手术作对照,其中实验组和自体尿道黏膜组每组24只,对照组4只。实验评诂:术后1,2,4,8,12,24周行逆行尿道造影,麻醉后处死动物,取再造尿道标本作组织病理学检查。结果:纳入大白兔52只,均进入结果分析。所有实验动物存活,除2例发生狭窄、2例发生尿瘘外,其余均取得满意效果。组织学观察显示,术后2周自体尿道黏膜组再造尿道管腔完全上皮化,4周实验组再造尿道腔面完全上皮化。在再造尿道的组织中,术后1个月时开始有血管生长,3个月时有平滑肌细胞生长;6个月时平滑肌及胶原纤维排列整齐,血管数量接近正常尿道的血管数量。结论:猪脱细胞海绵体尿道基质可以一期再造兔尿道,镶嵌自体尿道黏膜可以加速再造尿道管腔的上皮化。
- 徐路生张金明左中男储海函
- 关键词：脱细胞基质尿道尿道再造
