重庆市科技攻关计划(97043)
- 作品数：3 被引量：4H指数：1
- 相关作者：甘立霞曹廷兵彭家和叶治家钟小林更多>>
- 相关机构：第三军医大学第三军医大学西南医院更多>>
- 发文基金：重庆市科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人IL-16在大肠杆菌中的融和表达
- 2002年
- 目的 将人IL 16cDNA克隆至原核融合表达载体PinpointTMXa 3上 ,并进行表达研究。方法 含IL 16cDNA的质粒IL 16/PGEM 3ZF(+ )和PinpointTMXa 3原核融合表达载体经酶切消化、目的DNA片段的分离、重组连接、筛选、序列分析等系列操作 ,获得重组质粒PinpointTMXa IL 16,将质粒PinpointTMXa IL 16转化至大肠杆菌JM10 9,用IPTG诱导表达JM10 9工程菌 ,Westernblotting检测表达产物。结果 IL 16cDNA成功克隆至融合表达载体PinpointTMXa 3 ,Westernblotting检测经诱导含有PinpointTMXa IL 16质粒的JM10 9细菌 ,有IL 16融合蛋白的表达 .结论 成功地表达了IL 16融合蛋白。
- 曹廷兵叶治家甘立霞钟小林巩燕彭家和
- 关键词：IL-16克隆大肠杆菌
- 白细胞介素-16在脓毒症肝和肺组织中表达的免疫组织化学研究被引量：1
- 2000年
- 观察白细胞介素 - 16 (interleukin- 16 ,IL- 16 )在脓毒症时肝和肺组织中的细胞定位及分布 ,并探讨其在脓毒症发病中的作用和意义。应用新型敏感的免疫组织化学方法 (超敏感 - SP法 )检测本校近年收集的 18例感染、败血症和脓毒症尸检肝和肺组织白细胞介素 - 16蛋白的原位表达。在肝组织中 IL- 16主要定位于肝窦枯否细胞、单核细胞以及部分中性粒细胞 ,阳性率达 72 .3%。肝组织形态改变主要包括肝窦扩张充血 ,枯否细胞增生肿胀 ,肝细胞变性及不同程度的灶性坏死。在肺组织中 IL- 16定位于肺间质及感染灶内的巨噬细胞 ,中性粒细胞以及少量淋巴细胞 ,其阳性率达 6 6 .7%。肺组织形态改变主要包括肺泡壁毛细血管扩张充血 ,间质及肺泡壁内大量炎性细胞浸润 ,部分肺泡扩张 ,肺泡壁断裂 ;可见灶性坏死 ,坏死区肺结构消失 ,纤维组织增生。同时 ,观察到 IL- 16随组织病理变化的加重表达增强的趋势。本研究结果提示 IL- 16可能在脓毒症所致脏器损害中发挥重要作用。
- 甘立霞王晓东刘友生曹廷兵钟小林
- 关键词：肺组织白细胞介素-16脓毒症免疫组织化学肝组织
- sIL-16在大肠杆菌中的表达及活性分析被引量：3
- 2002年
- 用PCR法扩增本室保存的sIL 16cDNA片段,插入含T7启动子的表达载体pET28a(+)中构建重组质粒pET sIL16,转化大肠杆菌BL21(DE3),低温经IPTG诱导蛋白表达,过Ni2+螯和层析柱一步纯化表达蛋白,重组蛋白与Jurkat细胞共同孵育后,观察它对细胞表面IL 2R表达的影响,结果发现IPTG诱导蛋白表达后,经SDS PAGE电泳,可以看到在18kD左右出现明显蛋白表达条带,表达量占菌体可溶蛋白的40%左右,纯化蛋白的纯度达90%以上,经重组蛋白处理过的Jurkat细胞表面IL 2R的表达水平比未经它处理的细胞增高了18.54%.
- 巩艳叶治家甘立霞何凤田曹廷兵彭家和
- 关键词：大肠杆菌活性分析纯化
