安徽省自然科学基金(050430702)
- 作品数：19 被引量：31H指数：3
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- 相关机构：安徽省立医院安徽医科大学附属省立医院华中科技大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 胰腺癌中TFPI-2基因的表达及其意义
- 2008年
- 目的 探讨人胰腺癌中TFPI2基因表达及其意义。方法 采用RTPCR及Westernblot技术，检测TFPI-2基因在50例胰腺癌、35例转移灶、8例正常胰腺组织中的表达，同时用Boyden小室及裸鼠皮下种植瘤模型检测胰腺癌细胞系Panc一1体内、体外侵袭及转移能力。结果 胰腺癌组织及转移灶中TFPI2mRNA及相应蛋白表达水平均低于正常胰腺组织（P〈o．05）。TFPI-2的表达水平与性别、年龄、肿瘤大小及组织学分级无关，而与临床分期、尤其是有无远处转移及神经侵犯有关。Ⅲ、Ⅳ期胰腺癌组织中TFPI-2表达水平低于I、Ⅱ期（P〈0．05）；无远处转移、无神经侵犯的胰腺癌组织中TFPI2表达水平高于有远处转移、有神经侵犯的胰腺癌组织（P〈0．05）。转染基因胰腺癌细胞系Panc-1-TFPI-2体外侵袭能力下降，无明显肌层浸润及肝、肺转移现象。结论 TFPI-2基因表达的降低与胰腺癌侵袭和转移有关，可能参与胰腺癌的侵袭和转移调控。
- 汤志刚孙振阳胡何节许戈良陈炯李建生
- 关键词：胰腺肿瘤肿瘤转移
- 组织因子途经抑制物2基因在胰腺癌中的表达及对胰腺癌患者预后的影响被引量：2
- 2008年
- 目的研究组织因子途径抑制物2（TFPI-2）基因在胰腺癌中的表达，探讨其对胰腺癌患者预后的影响。方法应用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）及Western blot技术，检测41例胰腺癌组织中TFPI-2 mRNA和蛋白的表达，分析其与胰腺癌临床病理特征的关系及对胰腺癌患者预后的影响。结果TFPI-2 mRNA和蛋白在中低分化、有神经侵犯、有淋巴转移、有血管浸润、分期晚的胰腺癌组织中的表达水平均明显低于高分化、无神经侵犯、无淋巴转移、无血管浸润、分期早的胰腺癌组织（均P〈0．05）。TFPI-2高表达组患者的术后中位生存期（12．0个月）明显长于TFPI-2低表达组（5．1个月，P〈0．05）。Cox模型分析显示，TFPI-2的表达水平可作为影响胰腺癌患者预后的独立因素。结论TFPI-2在胰腺癌中的表达与其临床分期及分化程度有关，可作为判断胰腺癌患者预后的因素。
- 汤志刚孙振阳胡何节许戈良陈炯李建生
- 关键词：胰腺肿瘤预后组织因子途径抑制物2
- TFPI-2基因与消化道肿瘤关系的研究进展被引量：2
- 2008年
- 组织因子途径抑制物2(tissue factor path-way inhibitor2,TFPI-2)是一种广谱的丝氨酸蛋白酶抑制物,可抑制包括纤溶酶、胰蛋白酶、基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)在内的多种蛋白酶,而MMPs参与了细胞外基质的重塑,在肿瘤细胞的浸润和转移、伤口愈合、血管新生、纤维蛋白溶解及动脉粥样硬化等生理和病理过程中发挥重要作用。TFPI-2可通过维持细胞外基质的完整、调节肿瘤血管生成、调控肿瘤细胞细胞凋亡及血液凝固等机制调节胰腺癌、食管癌及胃癌等消化道肿瘤细胞的侵袭转移。越来越多的研究表明,TFPI-2能明显抑制肿瘤中MMPs的活性与功能等从而抑制肿瘤的侵袭与转移,并成为肿瘤基因治疗的新靶点。
- 孙振阳汤志刚
- 关键词：腹部肿瘤糖蛋白类
- 重组组织因子途径抑制物-2对人胰腺癌细胞体外侵袭能力的影响
- 2007年
- 我们通过脂质体法将组织因子途径抑制物-2（TFPI-2）基因转染人胰腺癌细胞株Pane-1，观察其对胰腺癌细胞体外侵袭、转移能力的影响。
- 汤志刚孙振阳胡何节许戈良陈炯王春友
- 关键词：组织因子途径抑制物-2人胰腺癌细胞株体外侵袭基因转染脂质体法
- 组织因子途径抑制物2基因真核表达载体的构建及鉴定
- 2007年
- 目的:构建人组织因子途径抑制物2(tissuefactorpathwayinhibitor2,TFPI-2)基因的真核表达载体pEGFP-C1-TFPI-2,并对其进行酶切鉴定。方法:实验于2006-09/12在安徽省立医院中心实验室完成。实验方法:①从人胎盘组织中提取总RNA,反转录合成cDNA,以特异性引物扩增TFPI-2基因全长mRNA。②扩增产物回收纯化后用限制性内切酶酶切,与经同样处理的载体pEGFP-C1进行连接反应,连接产物转化感受态大肠杆菌DH5α。③碱变性法提取质粒进行限制性内切酶酶切分析,并进行DNA序列测定。结果:①成功克隆了708bp的TFPI-2基因片段。②构建了人TFPI-2基因的真核表达载体pEGFP-C1-TFPI-2,经限制性内切酶酶切,电泳分析后得到了大小分别为708bp的目的基因片段和4.6kb的载体片段,测序结果与TFPI-2mRNA的cDNA序列吻合。结论:通过基因重组技术,构建了稳定表达TFPI-2的人TFPI-2的真核表达载体pEGFP-C1-TFPI-2。
- 汤志刚孙振阳胡何节许戈良陈炯李建生
- 关键词：TFPI-2基因绿色荧光蛋白质类克隆分子
- 胰腺癌TFPI-2的表达及与临床病理关系的分析被引量：1
- 2007年
- 目的探讨人胰腺癌组织中TFPI-2蛋白表达及与临床病理参数的关系。方法应用免疫组化方法检测50例胰腺癌及9例正常胰腺组织中TFPI-2蛋白的表达,并应用TUNEL法检测细胞凋亡,计算凋亡指数（AI）。结果胰腺癌组织TFPI-2表达指数为73.28±9.63,明显低于正常胰腺组织的81.42±12.25（P〈0.05）。胰腺癌组织的AI为（7.19±1.77）%。胰腺癌TFPI-2表达指数及AI与临床TNM分期及转移有关,Ⅰ、Ⅱ期及无转移的胰腺癌组织TFPI-2表达指数及AI值均高于Ⅲ、Ⅳ期及有转移的胰腺癌组织;TFPI-2阳性表达的癌组织AI值为（7.77±0.25）%,TFPI-2阴性表达的癌组织AI值为（6.77±1.43）%,两者比较差异显著（P〈0.05）。结论胰腺癌组织TFPI-2呈低表达,TFPI-2可能在诱导胰腺癌细胞凋亡中起重要作用。
- 汤志刚孙振阳胡何节许戈良陈炯李建生
- 关键词：胰腺肿瘤细胞凋亡组织因子途径抑制物2
- TFPI-2对胰腺癌细胞增殖及血管新生的抑制作用被引量：3
- 2007年
- 目的探讨胰腺癌中组织因子途径抑制物-2(TFPI-2)的表达及作用。方法采用免疫组织化学方法检测41例胰腺癌组织中TFPI-2,Ki-67和VEGF的表达及CD34单克隆抗体标记的微血管密度(MVD)。结果Ⅰ,Ⅱ期胰腺癌TFPI-2阳性表达率(17/26)高于Ⅲ,Ⅳ期(2/15),高分化癌(12/19)高于中、低分化(7/22)(均P<0.05);Ⅰ,Ⅱ期癌细胞增殖指数(PI)(24.45±6.19)低于Ⅲ,Ⅳ期癌(30.84±6.70),高分化癌(24.42±6.29)低于中、低分化癌(28.84±7.12),(均为P<0.05);Ⅰ,Ⅱ期癌VEGF的阳性表达率(16/26)低于Ⅲ,Ⅳ期癌(14/15),高分化癌(11/19)低于中、低分化癌(19/22)(均P<0.05);Ⅰ,Ⅱ期癌MVD值(26.92±1.06)低于Ⅲ,Ⅳ期癌(28.47±2.23),高分化癌(19.00±2.58)低于中、低分化癌(16.68±1.79)(均P<0.05)。胰腺癌组织中TFPI-2的表达与Ki-67和VEGF的表达呈负相关(r=-0.62,P<0.05;r=-0.54,P<0.05),MVD与TFPI-2表达亦有相关。结论TFPI-2表达能够抑制胰腺癌细胞增殖,并通过下调VEGF的表达抑制肿瘤新生血管的形成,这可能是其抑制胰腺癌的生长、转移的重要机制。
- 汤志刚孙振阳许戈良李建生胡何节陈炯
- 关键词：胰腺肿瘤新生血管化病理性组织因子途径抑制物2
- TFPI-2基因在调控胰腺癌细胞凋亡中的作用被引量：5
- 2007年
- 背景与目的：组织因子途径抑制物2（tissue factor pathway inhibitor 2,TFPI-2）是新近发现的一种丝氨酸蛋白酶抑制物,与多种肿瘤发生发展有关。本实验研究将外源性TFPI-2基因转入对胰腺癌细胞株Panc-1观察TFPI-2对该细胞细胞增殖及凋亡的影响。方法：TFPI-2基因真核表达载体、空载体分别转染Panc-1细胞,并命名为Panc-1-TFPI-2,Panc-1-V细胞与未转染的对照细胞Panc-1分别测定细胞生长曲线,DNA片段化实验检测细胞凋亡,并用流式细胞仪分析3组细胞的细胞增殖、细胞周期情况。结果：Panc-1-TFPI-2细胞同Panc-1-V和Panc-1细胞相比,细胞生长缓慢,细胞生长受到抑制,被阻滞于G0-G1期;DNA片段化实验显示Panc-1-TFPI-2细胞呈现凋亡细胞特有的“梯状”条带,而Panc-1-V和Panc-1细胞无明显“梯状”条带;流式细胞仪分析显示早期Panc-1-TFPI-2细胞凋亡率（6.9±0.5）%较Panc-1-V和Panc-1细胞凋亡率[（3.0±0.4）%,（3.5±0.4）%]增加（P〈0.05）,统计学差异有显著性。结论：外源性TFPI-2基因能够抑制胰腺癌细胞生长、诱导胰腺癌细胞凋亡,可能具有抑制肿瘤细胞增殖的作用。
- 汤志刚孙振阳胡何节许戈良陈炯李建生
- 关键词：胰腺肿瘤细胞凋亡
- TFPI-2对胰腺癌细胞体内和体外侵袭能力的影响被引量：6
- 2008年
- 目的研究组织因子途径抑制物-2(TFPI-2)基因对人胰腺癌细胞系Panc-1细胞侵袭能力的影响。方法通过脂质体法将TFPI-2基因转染到Panc-1细胞,用RT-PCR和Western blot分别检测转染前、后TFPI-2mRNA和相应蛋白的表达。Boyden小室法测定Panc-1-TFPI-2、Panc-1-V和Panc-1-P3组细胞的体外侵袭能力的变化,同时将3组细胞分别接种裸鼠,观察其体内肿瘤生长及转移情况。结果转染成功的Panc-1细胞有TFPI-2mRNA及相应蛋白的表达;Panc-1-TFPI-2组、Panc-1-V组和Panc-1-P组细胞穿膜细胞数分别为(24.4±3.5)个、(61.3±4.1)个和(60.2±3.9)个,前者明显少于后两者(P<0.05),提示Panc-1-TFPI-2组细胞的体外侵袭能力下降。3组细胞分别接种裸鼠,Panc-1-TFPI-2组肿瘤体积为(438.0±69.8)mm3,与Panc-1-V组的(852.0±102.9)mm3和Panc-1-P组的(831.0±78.1)mm3相比明显缩小,差异有统计学意义(P<0.05);镜下见Panc-1-V组和Panc-1-P组肿瘤组织浸润到肌层,有肝、肺转移灶,而Panc-1-TFPI-2组未见肌层浸润及肝、肺转移。结论TFPI-2基因表达可抑制胰腺癌细胞系Panc-1的侵袭转移能力,为胰腺癌的基因治疗提供了实验依据。
- 汤志刚孙振阳胡何节许戈良陈炯李建生
- 关键词：胰腺癌肿瘤转移肿瘤浸润组织因子途径抑制物-2
- TFPI-2基因对Panc-1细胞凋亡的影响
- 2008年
- [目的]研究TFPI-2基因对胰腺癌细胞系Panc-1细胞增殖及凋亡的影响。[方法]测定Panc-1-TFPI-2、Panc-1-V和Panc-1-P三组细胞的生长曲线,DNA片段化实验检测细胞凋亡,并用流式细胞仪分析三组细胞的细胞增殖、细胞周期情况。[结果]Panc-1-TFPI-2细胞同Panc-1-V和Panc-1-P细胞相比,细胞生长缓慢,细胞生长受到抑制,被阻滞于G0～G1期;DNA片段化实验显示Panc-1-TFPI-2细胞呈现凋亡细胞特有的"梯状"条带,而Panc-1-V和Panc-1-P细胞无明显"梯状"条带;流式细胞仪分析显示早期Panc-1-TFPI-2细胞凋亡率(6.93%±0.53%)较Panc-1-V(3.01%±0.39%)和Panc-1-P细胞凋亡率(3.52%±0.41%)增加,有显著性差异(P<0.05)。[结论]TFPI-2能够抑制胰腺癌细胞生长、诱导胰腺癌细胞凋亡,可能具有抑制肿瘤细胞增殖的作用。
- 孙振阳汤志刚胡何节许戈良陈炯李建生
- 关键词：胰腺肿瘤细胞凋亡
