海外青年学者合作研究基金(30328025)
- 作品数：19 被引量：45H指数：5
- 相关作者：粟永萍艾国平王军平李军杜智勇更多>>
- 相关机构：第三军医大学成都军区总医院第三军医大学新桥医院更多>>
- 发文基金：海外青年学者合作研究基金国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金更多>>
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- 颈交感神经阻滞对放烧复合伤小鼠死亡率的影响及其可能的作用途径(英文)被引量：7
- 2006年
- 背景:颈交感神经阻滞促进机体神经-内分泌-免疫系统等稳态的恢复,其能否抑制创伤后应激紊乱导致的内稳态失衡仍不明确。目的:观察颈交感神经阻滞对放烧复合伤小鼠死亡率的影响,探讨颈交感神经阻滞可否成为严重创伤后续损害简单有效的治疗手段。设计:随机分组设计,动物对照实验。单位:解放军广州军区广州总医院麻醉科。材料:实验于2004-02/2005-07在解放军第三军医大学复合伤研究所完成。选择昆明小鼠160只,随机抽签法分为对照组80只(仅对动物给予放烧复合伤,颈部注射生理盐水0.3mL)和颈交感神经阻滞组80只(对动物给予放烧复合伤,伤后给予颈交感神经阻滞,1次/d,连续14d)。方法:动物致伤方法:①放射损伤:60Coγ射线5Gy,照射距离1.5m,吸收剂量率(5.17～5.33)mGy/s,全身一次均匀照射。②烧伤:放射损伤后给予20g/L凝固汽油涂于背部燃烧8s造成15%总体表面积Ⅲ度烧伤(病理切片证实)。颈交感神经阻滞方法:对大鼠进行双侧颈交感神经阻滞,注射5g/L利多卡因0.2mL,注射后5min观察小鼠是否出现类似于霍纳综合征症状。主要观察指标:观察两组动物伤后2,5,7,10,15,20,30d死亡率及伤后7,14,21d外周血红细胞、白细胞、血小板计数的变化,另观察颈交感神经阻滞对放烧复合伤后3,6,14d血清肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β、白细胞介素6的影响。结果:纳入动物160只,均进入结果分析。①与对照组比较,颈交感神经阻滞治疗使放烧复合伤后5,7,10,15,20,30d的死亡率显著降低犤对照组各时相点累计死亡率分别为8%,22%,32%,54%,74%,82%,90%;颈交感神经阻滞组分别为8%,14%,16%,22%,28%,34%,56%犦。②颈交感神经阻滞组伤后7,14,21d的血红细胞计数、血小板计数及白细胞计数与对照组比较显著增加犤以21d为例,血红细胞计数分别为23.21×1012L-1,14.58×1012L-1;血小板计数分别为16.87×1011L-1,12.57×1011L-1;白细胞计�
- 陆建华施冲粟永萍程天民杜智勇
- 关键词：神经节交感神经传导阻滞
- 烧伤小鼠IFIT1表达的初步观察被引量：3
- 2006年
- 目的 观察烧伤小鼠干扰素诱导表达蛋白IFIT1的表达变化，初步探究其表达变化的原因。方法 实验小鼠致TBSA 15％Ⅱ度烧伤，1d及7d后处死，取肝、肺及脾组织。脂多糖掺入小鼠腹腔巨噬细胞株RAW264．7的培养基中，至终浓度0．1～1．0μg/ml，作用6h。提取组织及细胞RNA，进行半定量逆转录-聚合酶链式反应，提取组织及细胞裂解上清，进行免疫印迹检测。结果 小鼠肝、肺、脾组织IFIT1的转录在烧伤后1d升高，伤后7d恢复至伤前水平；肝、肺、脾IFIT1的蛋白水平在伤后1d一致升高，伤后7d仍能检出升高。体外实验，细菌脂多糖显著激活RAW264．7细胞的IFIT1转录及蛋白表达。结论 烧伤小鼠伤后早期IFIT1表达迅速升高，此变化与同期的内毒素血症引起的细胞应激有关。
- 李洪涛粟永萍Jian-ming XU王军平艾国平程天民
- 关键词：烧伤脂多糖细胞应激
- 类固醇受体辅活化子-3基因敲除对炎症反应中糖皮质激素受体的影响被引量：4
- 2008年
- 目的观察类固醇受体辅活化子(SRC)-3基因敲除对脂多糖(LPS)诱导的糖皮质激素受体(GR)蛋白表达水平及核转位的影响。方法健康清洁SRC-3+/+小鼠、SRC-3-/-小鼠各20只,雌性,体质量约20g,分为SRC-3+/+组和SRC-3-/-组,每组设正常(N)、1h、4h、12h四个时相点,每个时相点各5只小鼠。采用Westernblot测定肝、脾组织GR及SRC-1、SRC-2的蛋白表达。结果无论是SRC-3+/+组还是SRC-3-/-组,LPS刺激引起肝组织GR蛋白表达及核转位显著降低,但SRC-3-/-组降低程度明显小于SRC-3+/+组;SRC-3+/+组和SRC-3-/-组小鼠脾组织GR表达水平4h后开始下降,但SRC-3-/-组下降幅度显著低于SRC-3+/+组,GR核转位在SRC-3+/+组显著降低,而SRC-3-/-组则无显著变化。LPS刺激后SRC-3+/+组、SRC-3-/-组肝组织SRC-1均显著降低,但SRC-3-/-组变化程度均显著小于SRC-3+/+组;两组脾组织中未能明确检测到SRC-1蛋白表达。LPS刺激后两组小鼠肝组织SRC-2蛋白表达均显著增加,但在相应时相点SRC-3-/-组小鼠显著高于SRC-3+/+组;SRC-3+/+组小鼠脾组织SRC-2蛋白表达明显降低,而SRC-3-/-组却显著增加。结论炎症反应中GR蛋白表达及核转位显著降低,产生明显的糖皮质激素抵抗(GCR),SRC-3基因敲除后可缓解其程度。SRC-3基因敲除对炎症反应中肝、脾组织GCR程度的不同影响,可能与SRC家族成员的不同补偿效应有关。
- 李军粟永萍王军平邹仲敏艾国平刘合年
- 关键词：基因敲除脂多糖糖皮质激素受体
- SRC-1蛋白缺失对严重烧伤小鼠肝脏NF-κB表达及核转位的影响被引量：1
- 2008年
- 目的研究类固醇受体辅活化子-1（SRC-1）基因敲除小鼠严重烧伤早期肝脏核因子-kB（NF-kB）表达及核转位的变化。方法以SRC1基因敲除小鼠为实验组，以野生型小鼠为对照组，以小鼠15％～20％TBSAⅢ度烧伤为实验模型，观察两组在严重烧伤前及烧伤后1、6、12h肝脏总蛋白NF-kB表达及伤后核转位的变化，同时提取致伤前、致伤后1、6h血清标本，观察炎性细胞因子TNF-a、IL-1β、IL-6的变化。结果与野生型小鼠相比，SRC-1基因敲除小鼠严重烧伤后肝脏总蛋白NF-kB水平有所增加，而野生型小鼠有所下降。从核转位的情况来看，SRC-1基因敲除小鼠致伤后NF-kB的入核能力明显强于野生型小鼠，6h差别最大。两组致伤后炎性细胞因子TNF-a、IL-1β、IL-6均升高，但SRC1基因敲除小鼠升高更为显著。结论SRC1蛋白对严重烧伤具应激性保护作用，缺失SRC1蛋白使NF—kB功能增强更显著，致炎性细胞因子TNF-a、IL-1β、IL-6更大量产生，使整体伤情征象更重。
- 杜智勇粟永萍杨天德陶军吴悦维唐棠冉新泽王峰超
- 关键词：NF-KB基因敲除
- 氯胺酮调节炎症反应中类固醇受体辅活化子的表达被引量：1
- 2007年
- 目的观察脂多糖(LPS)腹腔注射后类固醇受体辅活化子(SRC)家族蛋白表达的早期变化及氯胺酮的影响,探讨氯胺酮调节炎症反应的分子机制。方法将15只健康C57/129雄性小鼠随机分为正常对照组、LPS组、LPS+氯胺酮组,每组5只。LPS 5 mg/kg,腹腔注射；氯胺酮10 mg/kg,肌肉注射,LPS注射后15 min给予。LPS注射后4 h脱臼处死,取肝、脾、肺,采用Western blot测定SRC家族(SRC-1、GRIP-1、NCoA-3)在蛋白水平的变化。结果LPS组与正常对照组相比,肝组织SRC-1蛋向表达水平显著降低,GRIP-1、NCoA-3显著升高；肺组织SRC-1、NCoA -3显著增加,GRIP-1显著降低；脾组织GRIP-1显著降低,NCoA-3显著增加。LPS+氯胺酮组肝组织SRC-1显著高于LPS组,低于正常对照组,肺组织显著低于LPS组,与正常对照组相比明显升高；肝组织GRIP-1显著低于LPS组,高于正常对照组,而脾、肺组织显著增加,与正常对照组相比无显著差别；NCoA-3蛋白表达水平显著低于LPS组,脾、肺组织明显高于正常对照组,而肝组织相差不显著。结论LPS刺激下肝、脾、肺组织SRC家族成员的变化不同,氯胺酮可抑制LPS诱导的SRC表达变化,其对炎症反应的抑制可能是一种间接作用。
- 李军粟永萍王军平艾国平魏晓红刘合年
- 关键词：脂多糖氯胺酮
- 烧伤后小鼠类固醇受体辅活化子的表达变化被引量：3
- 2007年
- 目的 观察小鼠烧伤后早期类固醇受体辅活化子（SRC）蛋白表达的时相变化，初步探讨烧伤早期糖皮质激素抵抗的分子机制。方法 将30只健康C57／129雄性小鼠随机分为正常对照组与烧伤组，烧伤组给予背部TBSA15％～20％Ⅲ°烧伤。分别于伤后1、6、12、24小时采用Westernblot测定肝、脾组织SRC家族（SRC-1、GRIP-1、NC0A-3）蛋白表达水平的变化。结果 烧伤组肝组织SRC-1蛋白表达水平在烧伤后l小时即显著降低，6小时降至最低，以后逐渐恢复，至24小时与正常对照组相比无显著差异；正常脾组织SRC-1蛋白表达水平较低，测定结果无统计学意义。烧伤组肝组织GRIP-1、NC0A-3蛋白表达水平在烧伤后显著升高，12小时达到高峰，24小时仍显著高于正常对照组；烧伤组脾组织GRIP-1、NC0A-3在烧伤后1小时显著升高，GRIP-1在烧伤后6小时达到高峰，24小时与正常对照相比差异不显著；而NC0A-3在烧伤后12小时达到高峰，24小时显著高于正常对照组。结论 小鼠烧伤后早期SRC-1显著降低，GRIP-1、NC0A-3显著升高，烧伤后糖皮质激素抵抗的发生发展可能与SRC家族成员表达变化有关。
- 李军粟永萍王军平艾国平邹仲敏
- 关键词：烧伤糖皮质激素抵抗
- 严重烧伤对SRC-3基因敲除小鼠肝脏NF-κB表达及核转位的影响被引量：2
- 2006年
- 目的研究烧伤对SRC3基因敲除小鼠转录因子NFκB表达及核转位的影响。方法以SRC3基因敲除小鼠为实验组,以野生型小鼠为对照组,以小鼠15%～20%TBSAⅢ度烧伤为实验模型,观察两组在严重烧伤前、烧伤后1、6、12h肝脏总蛋白NFκB、IκBα表达及核蛋白NFκB转位情况。结果野生型小鼠致伤后肝脏总蛋白中NFκB各时相点除伤后6h有所下降外(P<0.05),其余相差不显著,而SRC3基因敲除小鼠致伤后肝脏总蛋白中NFκB有增加的趋势;野生型小鼠致伤后肝脏NFκB核转位明显增加(P<0.01),6h达到峰值,而SRC3基因敲除小鼠致伤后肝脏NFκB核转位亦有所增加,但明显低于野生型小鼠(P<0.01);野生型小鼠致伤后肝脏总蛋白中IκBα表达变化不明显(P>0.05),而SRC3基因敲除小鼠致伤后肝脏总蛋白中IκBα表达伤后1h明显下降(P<0.01),之后均高于正常(P<0.01)。结论严重创伤后SRC3基因敲除小鼠NFκB的表达及核转位与野生型小鼠有明显的差异,SRC3的缺失可能部分抑制了NFκB对创伤应激的调控作用。
- 杜智勇粟永萍徐建明廖岚冉新泽李军王峰超
- 关键词：核因子ΚB基因敲除
- 类固醇受体辅活化子-3基因敲除小鼠的繁殖与鉴定被引量：5
- 2009年
- 目的:繁殖并鉴定类固醇受体辅活化子(steroid receptor coactivator,SRC)-3基因敲除(SRC-3-/-)小鼠。方法:通过SRC-3-/-雄性小鼠与杂合子(SRC-3+/-)雌鼠杂交,繁殖出SRC-3+/-及SRC-3-/-两种基因型,提取每只小鼠尾部基因组DNA,用PCR法进行鉴定,并进一步提取肝、脾组织总蛋白,采用Western blot进行蛋白表型鉴定。结果:成功繁殖并准确鉴定出更多数目的SRC-3-/-小鼠。SRC-3+/+小鼠脾组织SRC-3蛋白表达水平显著高于肝组织,而SRC-3-/-小鼠的肝、脾组织均未见SRC-3蛋白表达。结论:雄性基因敲除小鼠与雌性杂合子杂交是获取大量SRC-3-/-小鼠的有效途径,PCR法是其子代简单准确的鉴定方法。
- 李军粟永萍王军平艾国平刘合年
- 关键词：基因敲除杂交
- Calpain inhibitorⅠ对糖皮质激素受体表达和转录激活作用的影响
- 2004年
- 目的 探讨CalpaininhibitorⅠ对糖皮质激素受体 (glucocorticoidreceptor ,GR)表达和转录激活作用的影响。方法 Raw 2 64 .7细胞经地塞米松、CalpaininhibitorⅠ或两者共同处理 12h ,观察糖皮质激素受体表达水平的变化。质粒PRsh GRα和报告质粒pMAMneo CAT转入COS 7细胞 ,观察CalpaininhibitorⅠ对糖皮质激素受体转录激活作用的影响。结果 Raw 2 64 .7细胞经地塞米松处理 12h后GR蛋白条带减弱 ,提示地塞米松可诱导GR表达下调 ,而CalpaininhibitorⅠ可以部分抑制此作用。共转染实验表明CalpaininhibitorⅠ可增强地塞米松对GR的转录激活作用。结论 CalpaininhibitorⅠ可抑制糖皮质激素受体 (激素依赖性受体 )下调 ,并可增强GR的转录激活作用。
- 程晓刚粟永萍罗成基刘晓宏王明海艾国平王军平蒋建新黄跃生
- 关键词：CALPAININHIBITOR糖皮质激素受体地塞米松转录激活
- 严重烧伤早期SRC-3基因敲除小鼠肝脏糖皮质激素受体表达变化的实验研究被引量：2
- 2006年
- 目的研究严重烧伤早期SRC-3基因敲除小鼠肝脏糖皮质激素受体表达及核转位的变化。方法以SRC-3基因敲除小鼠为实验组，以野生型小鼠为对照组，以小鼠15％-20％TBSAⅢ度烧伤为实验模型，观察两组在严重烧伤前、烧伤后1、6、12h肝脏GR表达及核转位的变化，同时提取致伤前、致伤后1h以及6h血清标本，观察炎性细胞因子TNF-d及抗炎细胞因子IL-10的变化。结果野生型小鼠致伤后肝脏总蛋白中GR1h即显著下降，6h仍明显低于正常，12h有所恢复。而SRC-3基因敲除小鼠致伤后肝脏总蛋白中GR无明显变化，野生型小鼠和SRC-3基因敲除小鼠致伤后肝脏GR核转位均增加，但SRC-3基因敲除小鼠GR核转位增加更为显著；两组致伤后炎性细胞因子TNF-α均升高，但野生型小鼠升高更为显著，而实验组抗炎细胞因子IL-10的升幅大于对照组。结论严重烧伤对野生型小鼠和SRC-3基因敲除小鼠肝脏GR的影响具有明显的差异，SRC-3的缺失可能减轻了严重创伤早期对GR功能的抑制作用。
- 杜智勇粟永萍徐建明廖岚冉新泽李军王峰超唐棠
- 关键词：糖皮质激素受体基因敲除
