国家自然科学基金(30901716)
- 作品数：6 被引量：10H指数：2
- 相关作者：徐晓峰张征宇高建平周秀敏侯建全更多>>
- 相关机构：南京军区南京总医院苏州大学华中科技大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中央高校基金更多>>
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- 下调PAR基因表达对前列腺癌PC3细胞周期及Cdc25C蛋白表达的影响被引量：2
- 2012年
- 背景与目的:前列腺雄激素调节基因(prostate androgen regulated gene,PAR)在雄激素非依赖性前列腺癌中特异性高表达,可能与细胞恶性转化相关。本研究用RNA干扰技术下调PAR基因表达,并探讨其对前列腺癌PC3细胞细胞周期及调节因子Cdc25C表达的影响。方法:针对PAR基因的siRNA转染PC3细胞,以RT-PCR验证其对PAR基因表达抑制的有效性,用流式细胞术检测细胞周期,Western blot检测Cdc25C表达水平。结果:siRNA转染可抑制PC3细胞PAR基因表达,同时G2/M期细胞及凋亡细胞比例分别由(23.79±3.16)%及(1.49±0.13)%增加至(29.95±3.25)%和(20.61±2.73)%,Cdc25C蛋白表达水平明显下降。结论:PAR基因表达下调可诱导细胞G2/M期阻滞和凋亡,抑制细胞周期调节因子Cdc25C的表达。
- 徐晓峰周秀敏董杰张征宇葛京平周文泉魏武程文位志峰侯建全高建平
- 关键词：前列腺癌细胞周期
- 乙肝病毒X基因阻断降低肝癌细胞HepG2.215与纤维连接蛋白的黏附被引量：1
- 2010年
- 目的探讨乙肝病毒X基因(HBX)在肝细胞癌(HCC)侵袭转移中的作用。方法利用psiRNA-hH1neo质粒,构建针对HBX的shRNA表达载体psiRNA1、psiRNA2、psiRNA3,转染肝癌细胞株HepG2.215,用荧光定量PCR仪检测siRNA对HBX mRNA表达的抑制作用,用Western blot法检测siRNA对HBX蛋白表达的抑制作用。以Transwell小室测定HepG2.215细胞与纤维连接蛋白(Fn)的体外黏附能力。结果成功构建shRNA表达载体,shRNA表达载体均可不同程度地抑制HBX的表达,其中psiRNA1对HBX的抑制作用最强,对HBX mRNA抑制率达80.27%,对HBX蛋白的抑制率为65.59%;细胞体外黏附能力受到明显抑制,在培养至48、72h后,对照组和转染组跨膜细胞数分别为442.6±57.1vs376.4±55.2和588.2±70.1vs513.6±68.5,两时相点均有明显差异(P<0.05)。结论阻断HBX的表达可明显抑制肝癌细胞HepG2.215的体外侵袭性生长。
- 周秀敏陶敏徐红李大鹏
- 关键词：乙肝病毒X基因RNA干扰肝细胞癌
- 下调PAR基因表达对前列腺癌PC3细胞凋亡及凋亡相关蛋白Bcl-2/Bax的影响被引量：2
- 2012年
- 目的:本研究以RNA干扰技术下调PAR(prostate androgen regulated)基因表达,探讨其对前列腺癌PC3细胞增殖、凋亡及其相关蛋白Bcl-2/Bax表达水平的影响。方法:PC3细胞转染靶向PAR基因的siRNA,MTT法检测细胞增殖,用流式细胞术检测细胞凋亡,Western印迹检测Bcl-2和Bax蛋白表达水平。结果:PC3细胞PAR基因表达水平下调,此时处于G2-M期的细胞增加,为(29.95±3.25)%;细胞凋亡率亦明显增加,为(20.61±2.73)%,与对照组比较差异有显著性意义(P<0.01),同时Bcl-2蛋白表达下降,Bax表达水平升高,Bax/Bcl-2比值升高。结论:PAR基因表达下调可诱导细胞G2-M期阻滞和凋亡,其机制为抑制凋亡相关蛋白Bcl-2表达,同时促进Bax表达。
- 徐晓峰周秀敏位志峰张征宇葛京平魏武周文泉程文侯建全高建平
- 关键词：前列腺癌BCL-2BAX
- 采用表面阵列电极的神经肌肉电刺激系统设计与优化被引量：3
- 2013年
- 表面阵列电极在改进刺激选择性和控制能力方面具有优越性能,其中电极设计和刺激波形对于神经肌肉电刺激效果具有重要影响。针对手功能康复需求,采用大小电极触点交叉排列的表面阵列电极,对人体前臂组织实施直流阴极刺激;基于人体前臂的简化层次模型,通过有限元法仿真人体前臂组织的电场分布,使用神经纤维激励函数表征外加电场对神经轴突电活动的影响。在此基础上,选择前臂深层神经纤维激励函数的峰值和半宽度乘积之比作为靶向性能评价函数,利用粒子群算法对表面阵列电极的触点尺寸和间距进行优化设计。结果发现,当大、小触点尺寸分别为9.80和10.72 mm时,阵列电极的靶向性能最优,靶向性能评价函数最大值为11 252.68 V/m4。对比不同刺激波形作用下随时间变化的人体前臂深层神经纤维激励函数最大值,发现矩形波刺激下神经纤维激励函数最大值可达3.448 V/m2,稍高于其他刺激波形,有利于神经纤维的激活,从而为表面阵列电极设计和制定刺激处方提供理论指导。
- 徐琦胡能宇周厚纶王熠钊
- 关键词：激励函数优化设计粒子群算法
- 不同类型肿瘤抗原致敏的树突状细胞体外诱导前列腺癌特异性CTL的研究被引量：1
- 2010年
- 目的:研究肿瘤冻融抗原及弱酸洗脱提取的肿瘤抗原肽分别冲击致敏树突状细胞(dendritic cells,DCs)体外诱导前列腺癌特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的效应。方法:采用反复冻融法和弱酸洗脱法,分别获取前列腺癌细胞株PC-3的肿瘤抗原,应用重组人GM-CSF、IL-4体外培养诱导外周血单个核细胞获得DC,并分别负载两种前列腺癌肿瘤抗原,检测其体外激活肿瘤特异性CTL的能力,用LDH释放法检测其对PC-3的体外杀伤效应。结果:用枸橼酸-磷酸盐缓冲液洗脱或反复冻融PC-3(2×107)后获得的肿瘤抗原蛋白含量分别为(312.2±7.9)μg和(963.0±25.3)μg,负载两种前列腺癌细胞抗原的DCs致敏的CTL对PC-3细胞有明显的杀伤作用,而且负载弱酸洗脱提取的肿瘤抗原肽的DCs致敏的特异性CTL具有更明显的杀伤作用[(60.4±5.52)%vs(43.7±4.11)%,P<0.01)]。结论:弱酸洗脱和反复冻融方法都可以有效获取前列腺癌抗原,用于体外致敏DCs后,均具有活化CTL的能力,而且弱酸洗脱提取的肿瘤抗原肽更为有效。
- 薛松孙颖浩高建平徐晓峰张征宇许传亮朱学军范振芳
- 关键词：肿瘤抗原树突状细胞细胞毒性T淋巴细胞前列腺癌
- 青梅萃取液有效成分提取及其对肾细胞的毒理性作用被引量：1
- 2013年
- 目的青梅具备防治泌尿系结石的潜在作用,但其有效成分及作用机制尚未明确。本研究旨在筛选青梅提取液的有效成分,并了解其对肾细胞株的体外毒性作用,为进一步的药理学研究提供基础。方法应用高分辨率电喷雾飞行时间质谱对从青梅的石油醚、氯仿、乙酸乙酯、乙醇、正丁醇、水等6种不同极性溶剂中萃取出的有效成分进行质谱分析,同时观察不同极性的青梅萃取液对犬肾上皮(Madin-Darby canine kidney,MDCK)细胞体外增殖活性的影响。结果青梅萃取液主要成分涵盖了酮、酸、酸酐、醛和酯。常见的有机酸为枸橼酸,常见的醛为糠醛。各种浓度的中性青梅萃取液对MDCK细胞存活率无明显影响,而酸性青梅萃取液有一定影响;各部位的萃取物中,0.5%正丁醇和水部位以及0.16%正丁醇提取物对MDCK细胞存活率显著低于不加药物的对照剂对照(P<0.05),其余浓度及其余部位萃取物对MDCK细胞存活率影响无明显影响。结论青梅拥有丰富多样的营养和生物活性成分,具备潜在的生活保健和医学应用价值,值得进一步对其进行深入研究,但在将青梅及其萃取物应用于人体时,高浓度(酸性)有可能损害肾小管细胞。
- 周水根吕建林徐晓峰朱怀军曹晓梅张征宇
- 关键词：青梅萃取物活性成分肾细胞
