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科研院所技术开发研究专项资金(2011EG34219): 作品数：17 被引量：142H指数：7; 相关作者：王印庚廖梅杰荣小军张正陈贵平更多>>; 相关机构：中国水产科学研究院黄海水产研究所中国海洋大学大连海洋大学更多>>; 发文基金：科研院所技术开发研究专项资金国家自然科学基金山东省农业良种工程项目更多>>; 相关领域：农业科学生物学环境科学与工程更多>>

养殖刺参“腐皮综合征”致病菌--灿烂弧菌的原位杂交检测方法的建立与应用被引量：7: 2013年; 以养殖刺参"腐皮综合征"的重要致病菌——灿烂弧菌Vibrio splendidus的16S～23S间隔区序列,设计特异性引物,用PCR方法制备地高辛(DIG)标记探针,建立了原位杂交技术检测感染刺参体内灿烂弧菌的技术方法,并利用该方法对人工感染刺参和健康刺参各组织进行检测。结果显示,感染刺参的体壁结缔组织、肌肉组织、肠粘膜上皮、辐水管等组织的原位杂交检测呈阳性,而与健康刺参组织无交叉反应。在感染组织中,阳性信号(显色)强弱清晰,能准确反映出灿烂弧菌的侵染部位及感染程度,这为探明灿烂弧菌的感染途径、感染病程等致病机理研究奠定了基础,也为养殖刺参疾病预防和健康管理提供了技术支撑。; 王印庚荣小军张凤萍王岚廖梅杰邹安革; 关键词：刺参腐皮综合征原位杂交

一株刺参益生菌的发酵配方及其发酵条件优化被引量：4: 2012年; 以健康刺参肠道的益生菌——枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)为研究对象,以豆粕、葡萄糖和氯化钠为基础发酵培养基,通过单因素和正交试验,确定该菌株适用于工业生产的最佳发酵培养基配方;通过单因素试验,确定最佳发酵条件;同时在生物反应器中进行扩大培养试验,得到其最佳种龄和发酵时间。试验确立该菌株的最佳培养基配方为:氯化钠10 g/L,葡萄糖2.5 g/L,豆粕20 g/L;最佳发酵条件为:培养温度28℃,初始pH 7.5,转速170 r/min,菌种接种量5%。以最佳发酵条件和培养基,在10 L生物反应器中进行扩大培养试验,得到最佳种龄为24 h、最佳发酵时间为32 h,菌体细胞浓度最高达到8.5×109cfu/mL,芽孢生成率达到91%。研究结果为刺参微生态制剂的工业化生产提供基础数据,为海水养殖专用微生态制剂的开发提供参考。; 元福杰王印庚廖梅杰张正潘鲁青张述智; 关键词：刺参益生菌枯草芽孢杆菌发酵工艺

浒苔营养成分分析与投喂刺参试验被引量：22: 2011年; 进行了浒苔(Enteromorpha prolifera)的营养成分测定及投喂刺参(Apostichopus japonicus)的生长试验观察。营养成分检测结果显示,浒苔是一种高蛋白、低脂肪、矿物元素含量丰富的安全藻类食品。另外,分别以浒苔、海泥、浒苔∶海泥(质量比3∶7)、配合饵料∶海泥(质量比3∶7)4种饲料投喂刺参30 d。试验结果:浒苔∶海泥(3∶7)组既有最好的增重率,也有良好的成活率和健康状况;配合饵料∶海泥(3∶7)组次之;而单独投喂浒苔组或海泥组则表现较差。研究结果表明,浒苔具有良好的营养作用,可替代马尾藻、鼠尾藻、海带等作为一种优质的刺参养殖用饵料源。; 廖梅杰郝志凯尚德荣姜燕陈贵平王印庚; 关键词：浒苔营养成分刺参生长率

一种中草药复方对刺参苗期玻璃海鞘的杀除效果被引量：2: 2013年; 用使君子、雷丸、茶籽饼、川楝子、大蒜素、矿物质分散剂组成中草药复方，分别以0、5、6、8、10、15、20和25mg·L-1的浓度对刺参苗期玻璃海鞘（Ciona intestinalis）进行杀除效果和对刺参苗种的毒性试验，以研究中草药复方对海参苗期玻璃海鞘的杀除效果。结果表明：：果用该中草药复方，浓度为10～15mg·L-1时，药浴24h，既能有效杀灭玻璃海鞘，又对稚参无毒副作用，对养殖水体各指标也基本无影响，是刺参养殖系统中杀灭玻璃海鞘的最适浓度。进一步的生产性应用实践表明，在刺参育苗池中采用“3＋7”模式（用药后第3d倒池、第7d倒板）施用浓度10—15mg·L-1的中草药复方，可达到杀除玻璃海鞘的良好效果，且与海参容易分离。在上述药物浓度作用下，刺参苗种伸展、附着和摄食正常，健康状况良好。该中草药复方适合在生产实践中应用推广。; 王印庚陈宗阳廖梅杰陈霞陈贵平范瑞用邹安革蔡生力; 关键词：刺参苗种玻璃海鞘中草药

饲料中适宜的蛋白质和氨基酸水平对刺参生长的影响被引量：6: 2012年; 利用单因素设计,以初始体重为4.5～4.8g的刺参Apostichopus japonicus为研究对象,分别配制以鱼粉、马尾藻和酒糟等为主要成分的配合饲料(蛋白含量为14.7%、17.7%、19.1%及21.5%)喂养刺参70d。实验表明,实验刺参的增重率和对配合饲料的消化率随着饲料中蛋白含量的增加而增加。配合饲料中粗蛋白的含量为21.49%时,试验幼参的增重率及蛋白质消化率达到最大。另一组试验对5种含有不同种类和数量的氨基酸配合饲料进行了饲喂对比试验,实验进行了40d。结果表明,饲喂富含甘氨酸、蛋氨酸、赖氨酸和精氨酸饲料的刺参增重率最高。; 李素红梁萌青孙慧玲燕敬平; 关键词：幼参配合饲料增重率消化率氨基酸

不同类型附着基对刺参栖息趋向性的影响分析被引量：7: 2012年; 利用单位体积平均聚集数量(Average Gathered Number of Unit Volume,AGNUV)和平均聚集率(Mean Attractive Rate,MAR)统计分析了刺参对10种附着基(石块、三角瓦、U形瓦、遮阳网、网笼附着基、竹制附着基、三孔砖、涡流式异形瓦、大多棱瓦、小多棱瓦)和8种栖息分布区域(池壁面、池棱角、池底面、附着基上、附着基下、附着基棱角凹槽处、附着基内、附着基外)的选择趋向差异性。结果表明,不同类型附着基诱集刺参的效果为:大多棱瓦>石块>三孔砖>小多棱瓦>U形瓦>涡流式异形瓦>三角瓦>网笼附着基>遮阳网>竹制附着基,且大多棱瓦集参效果与三角瓦、网笼附着基、遮阳网、竹制附着基、涡流式异形瓦差异极显著。本研究还发现刺参在水泥池棱角处的MAR(21.02%)高于池壁面MAR(8.23%)和池底面的MAR(15.68%);刺参在附着基下方和附着基内部的MAR分别高于在附着基上方和附着基外部的MAR。此外,实验结果也表明,1)大多棱瓦附着基对刺参具有最佳诱集效果;2)刺参对栖息位置具有选择趋向性,且不同时间刺参对栖息位置的选择存在显著性差异;3)石块、网笼附着基、遮阳网不宜作为附着基。; 管敏王印庚陈贵平廖梅杰潘鲁青薛太山; 关键词：刺参附着基栖息

仿刺参微卫星标记的筛选及群体遗传结构分析被引量：5: 2012年; 采用FIASCO(Fast Isolation by AFLP Sequences Containing Repeats)方法构建了仿刺参基因组富集CA微卫星序列的基因组短片段文库,筛选得到118条微卫星DNA序列。根据重复单元的排列特点,完美型共83个,占70.4%;非完美型共30个;占25.4%;复合型标记5个,占4.2%。选取其中20条微卫星序列设计引物进行多态性检测,并利用这20对引物对采自中国、韩国(西海岸及东海岸)、俄罗斯和日本沿海的野生仿刺参以及美国沿海的具疣拟刺参进行遗传多样性水平和遗传结构分析。结果表明,所设计的20对引物的扩增产物均具有多态性,其中16个位点为高度多态(PIC>0.5)。遗传多样性分析结果显示,20个微卫星座位的平均观察杂合度(Ho)和平均期望杂合度(He)分别为0.39和0.69,共检测到231个等位基因(102个有效等位基因),在每个座位上获得3～20个等位基因,平均等位基因数为11.6个,20个位点在6个群体中不同程度偏离遗传平衡(P<0.05),所有群体在整体上均表现为杂合子缺失(Fis>0);5个仿刺参群体间的遗传相似系数在0.71以上,相似性较高,而仿刺参群体与具疣拟刺参的相似性则较低。聚类分析结果表明,中国群体与韩国西海岸群体聚类成一支,而俄罗斯群体、韩国东海岸群体和日本群体聚类成另外一支,聚类的先后与它们在地理分布上的海域位置有一定的相关性。; 潘传燕臧云鹏廖梅杰王印庚荣小军张正李彬陈贵平; 关键词：刺参微卫星标记 FIASCO

基于gyrB基因的SYBR Green I实时定量PCR检测病原灿烂弧菌被引量：7: 2014年; 灿烂弧菌Vibrio splendidus是多数海水养殖动物的主要致病菌,对养殖业危害较大。本研究根据灿烂弧菌gyrB基因的保守序列设计特异性引物,建立了SYBR Green I实时定量PCR检测灿烂弧菌的方法。构建含gyrB基因的重组质粒作为标准品,进行SYBR Green I实时定量PCR,在Tm为62℃时,扩增产物的熔解曲线仅有一个单特异峰,扩增所得标准曲线为y=-3.338x+37.67,相关系数为0.999,扩增效率为0.99,最低能检测到20个拷贝。实验结果表明,该检测技术具有较高的特异性、敏感性和重复性,对灿烂弧菌病的快速诊断和流行病学调查有重要意义。; 于永翔王印庚刘智超廖梅杰张正荣小军李彬战文斌; 关键词：灿烂弧菌实时定量PCR SYBR

刺参池塘养殖系统中发酵饲料的制作与投喂被引量：19: 2012年; 将海带粉、扇贝边粉、豆粕、虾粉、马尾藻粉按照40∶18∶20∶7∶15的配比混合,经浸泡、研磨等预处理后,加入0.25%～0.5%的水产诱食酵母,发酵72h。SDS-PAGE凝胶电泳结果显示,经过发酵处理后,饲料中的大分子蛋白发生降解。按照刺参体重3%的投喂量进行为期50d的投喂实验,结果表明,发酵饲料组刺参的生长明显优于普通饲料组(未发酵饲料),可见发酵饲料能够更好地满足刺参健康、快速生长的需要,具有良好的市场潜力。; 姜燕王印庚薛太山邹安革廖梅杰张正朱建新陈贵平麦康森张文兵; 关键词：刺参发酵饲料

盐度和溶解氧对刺参非特异性免疫酶活性的影响被引量：21: 2014年; 测定了不同盐度（20、25、30、35、40）和不同溶氧水平（充空气,DO 7～9 mg/L）充纯氧,DO15～20 mg/L;不充气,DO 2～5 mg/L）对刺参体腔液中酸性磷酸酶（ACP）、碱性磷酸酶（AKP）、溶菌酶（LZM）和超氧化物歧化酶（SOD）活性变化的影响.盐度试验结果表明,盐度急性变化会引起刺参体腔液ACP、AKP、LZM活性的升高和SOD活性降低,其中第10天时盐度对酶活性的影响最大.溶氧试验显示,过饱和溶氧（DO 15～20 mg/L）可使刺参体腔液ACP、AKP、LZM、SOD活性维持在较高水平,不充气组（DO 2～5 mg/L）刺参体腔液中ACP、AKP、LZM活性出现短暂升高.恢复性试验中,盐度20、25组对AKP活性和盐度20、40组对SOD活性的影响未恢复到初始水平,其余实验组均能恢复至初始水平,说明低盐对刺参免疫力的影响较大.充纯氧组刺参的AKP活性显著高于充空气组,表明高溶解氧水平在一定程度上提高了刺参免疫力.; 郑慧李彬荣小军廖梅杰陈贵平张正王岚王印庚邹安革; 关键词：溶解氧盐度非特异性免疫

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