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不同三叶草对二斑叶螨生长发育和繁殖的影响被引量：1: 2016年; 【目的】明确红三叶、白三叶和杂三叶3种寄主对二斑叶螨Tetranychus urticae Koch生长发育和繁殖的影响,以及3种寄主间二斑叶螨的生物学差异。【方法】在室内(25±1)℃条件下,采用离体叶片法研究了3种三叶草对二斑叶螨种群参数的影响。【结果】3种三叶草对二斑叶螨生长发育、雌成螨寿命以及繁殖力有显著影响(P<0.05)。在杂三叶上,二斑叶螨发育历期、产卵前期明显比红三叶和白三叶上要长,而且雌成螨寿命和产卵期也明显缩短。每雌产卵量在红三叶上最高(150.87粒),白三叶次之(139.43粒),而杂三叶上最低(86.95粒)。二斑叶螨在3种三叶草上的存活曲线均为Ⅰ型,存活率高低依次为红三叶、白三叶和杂三叶。净增殖率(R0)、内禀增长率(rm)和周限增长率(λ)在红三叶上最高、杂三叶上最低,而平均世代周期(T)和种群加倍时间(Dt)在杂三叶上最长、红三叶上最短。【结论】3种三叶草对二斑叶螨的适合度具有一定差异,红三叶和白三叶对二斑叶螨具有更高的适合度。; 张廷伟孙玺文刘长仲沈慧敏; 关键词：二斑叶螨红三叶白三叶繁殖

二斑叶螨内参基因的筛选及解毒酶基因的表达水平被引量：13: 2013年; 【目的】筛选二斑叶螨(Tetranychus urticae)敏感(SS)和抗甲氰菊酯品系(Fe-R)中合适的内参基因,并通过基因相对表达定量PCR研究二斑叶螨抗性品系解毒酶基因表达水平的变化。【方法】采用实时荧光定量PCR(quantitative real time PCR,RT-qPCR)技术,分析二斑叶螨5.8S rRNA、α-tubulin、β-actin、ELF、GAPDH、RPL13a、SDHA和TBP共8个候选内参基因mRNA表达水平的稳定性,并分析二斑叶螨酯酶(Carboxyl/cholinesterases,CCEs)、谷胱甘肽转移酶(Glutathione s-transferase,GSTs)及细胞色素P450单加氧酶(Cytocheome P450 monooxygenases,P450s)等主要解毒酶基因相对表达量。用GeNorm和NormFinder软件进行内参基因稳定性评估,通过比较Ct值的方法进行基因相对表达量计算。【结果】8个内参基因中稳定性最高的为α-tubulin;以α-tubulin为内参基因,二斑叶螨Fe-R品系GSTs基因TuGSTo1、TuGSTd1及P450s基因CYP3D2相对表达量均显著高于SS品系,而CCEs基因TuCCE1的表达量有所降低。【结论】在二斑叶螨SS和Fe-R品系中α-tubulin为理想的内参基因,RT-qPCR研究表明TuGSTo1、TuGSTd1和CYP3D2相对表达量的升高可能是二斑叶螨对甲氰菊酯产生高抗性的分子机理。; 岳秀利高新菊王进军吕娟娟沈慧敏; 关键词：内参基因 RT-QPCR CCES GSTS 二斑叶螨

截形叶螨对哒螨灵、阿维菌素和阿维·哒螨灵的抗性选育和抗性稳定性研究被引量：3: 2016年; 【目的】明确截形叶螨Tetranychus truncatus Ehara对哒螨灵、阿维菌素和阿维·哒螨灵3种田间常用药剂产生抗性的速率和稳定性,为叶螨的抗性综合治理提供一定的理论依据。【方法】采用室内生测法,对截形叶螨进行药剂的抗性筛选、衰退和再恢复规律研究。【结果】经过连续30代的药剂汰选,截形叶螨对哒螨灵、阿维菌素和阿维·哒螨灵3种药剂产生了不同程度的抗药性,抗性指数分别达到197.50、19.56和12.57;停止喷药后,其抗性都有所下降,其中截形叶螨对哒螨灵的抗性最不稳定,培育至30代后,抗性衰退率达到63.54%,对阿维菌素的抗性较为稳定,抗性衰退率为23.30%;再次恢复用药后,截形叶螨对哒螨灵、阿维菌素和阿维哒螨灵抗性再度回升,以抗哒螨灵品系的抗性恢复最快,药剂汰选30代后,增长率达到了58.47%,阿维·哒螨灵次之(增长率为38.67%),抗阿维菌素的品系抗性恢复最慢,增长率仅为22.86%。【结论】截形叶螨对哒螨灵抗性不稳定,停止用药后,敏感性易恢复,对阿维菌素和阿维·哒螨灵的抗性较稳定,一旦抗性产生不易衰退,故田间应用时应交替轮换用药。; 宋丽雯李妙雯沈慧敏; 关键词：截形叶螨哒螨灵阿维菌素抗药性

两种方法在二斑叶螨电压门控钠离子通道基因突变检测中的应用被引量：1: 2014年; 靶标突变是二斑叶螨对拟除虫菊酯类药剂产生高抗性的重要原因,而用于靶标突变检测的方法较多,有必要寻找一种经济、灵敏且有效的方法进行突变检测。本研究根据二斑叶螨电压门控钠离子通道(voltage-gated sodium channels,VGSCs)基因上已报道的3个点突变(L1022V、A1215D和F1538I),采用PCR产物直接测序和限制性片段长度多态性聚合酶链反应(polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)两种不同的方法对二斑叶螨田间种群(WW-R和LZ-R)进行靶标VGSCs基因突变检测。PCR产物直接测序结果显示,与SS种群相比,WW-R和LZ-R种群VGSCs基因均存在两种氨基酸突变A1215D和F1538I,但没有发现存在F1022V突变,其中A1215D突变发生在结构域ⅡS6-ⅢS1连接处,F1538I突变发生在结构域ⅢS6螺旋处,而采用PCR-RFLP方法只检测出A1215D突变。两种不同的方法对田间采集的二斑叶螨种群VGSCs基因突变位点检测的比较,为抗菊酯类药剂二斑叶螨种群抗性分子监测技术的建立和抗性治理奠定了基础。; 杨顺义岳秀利王进军沈慧敏郭金梅沈一凡周兴隆; 关键词：二斑叶螨甲氰菊酯直接测序法 PCR-RFLP法

二斑叶螨不同抗性品系最佳内参基因的筛选及CYP392E亚家族基因的表达分析被引量：7: 2013年; 【目的】筛选二斑叶螨Tetranychus urticae敏感品系(SS)、抗阿维菌素品系(Av-R)和抗螺虫乙酯品系(Sp-R)中合适的内参基因,研究二斑叶螨不同抗性品系CYP392E亚家族基因表达水平的变化。【方法】采用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)技术,对二斑叶螨α-tubulin,β-actin,ELFn,GAPDH,5.8S rRNA基因和SDHA共6个看家基因的表达稳定性进行分析以期筛选出合适的内参基因,并在此基础上进一步分析二斑叶螨不同品系P450酶系CYP392E亚家族基因的表达量差异。【结果】在二斑叶螨SS,Av-R和Sp-R品系中稳定性最高的内参基因为ELFn。以ELFn为内参基因,CYP392E7基因相对表达量在二斑叶螨Av-R品系中显著高于SS品系(P<0.05),为后者的2.18倍,而在Sp-R品系和SS品系中差异不显著;其余基因的相对表达量在2个抗性品系中均没有增加,Av-R品系的CYP392E4,CYP392E9和CYP392E10基因以及Sp-R品系的CYP392E1和CYP392E9基因相对表达量甚至显著下调,分别为SS品系的48%,74%,65%,63%和73%。【结论】在二斑叶螨SS,Av-R和Sp-R品系中ELFn为理想的内参基因,Av-R品系CYP392E4,CYP392E7,CYP392E9和CYP392E10基因相对表达量的显著变化可能与二斑叶螨对阿维菌素的抗性形成有关,Sp-R品系CYP392E1和CYP392E9基因也可能与二斑叶螨对螺虫乙酯的抗性形成有一定联系。; 杨顺义岳秀利王进军沈慧敏; 关键词：二斑叶螨螺虫乙酯抗性品系敏感品系内参基因

二斑叶螨混合抗性种群相对适合度的研究被引量：7: 2015年; 研究了二斑叶螨抗甲氰菊酯、阿维菌素、螺螨酯混合品系(R)和敏感品系(S)的生长发育与生殖情况,比较种群的生物适合度。结果表明:与敏感品系(S)相比,抗性品系各螨态发育历期和产卵量均存在不同程度的下降,抗性品系的净生殖率(R0=12.765 9)远低于敏感品系(R0=42.420 3),相对适合度为敏感品系的0.300 9倍,存在适合度缺陷;其他生命表参数无种群差异。; 周兴隆杨顺义沈慧敏; 关键词：二斑叶螨生命表

温度对截形叶螨抗哒螨灵种群和敏感种群发育与繁殖的影响被引量：2: 2014年; 为明确温度对截形叶螨抗哒螨灵种群和敏感种群的发育和繁殖的影响,本试验设置了16℃、20℃、24℃、28℃、32℃和36℃6个温度梯度,在光照16 h,相对湿度为60%±5%条件下,系统观察了敏感和抗哒螨灵实验种群在不同温度条件下的各螨态发育历期、平均寿命和产卵量情况,并根据计算出的生命参数净生殖率（R0）评价了抗性种群和敏感种群的生物相对适合度。结果表明：截形叶螨的抗性种群和敏感种群在设定的温度范围内均能完成世代发育,并且两个种群的发育历期和平均寿命均随温度的升高而缩短,如抗性种群和敏感种群在16~36℃范围内世代历期分别缩短了20.0 d和.18.7 d。在16~28℃下,即低温和适温条件下,抗性种群的各螨态发育历期、平均寿命和生殖力低于敏感种群;而在高温36℃下,除成螨期和若螨期外,与敏感种群相比,抗性种群的世代历期、平均寿命和产卵期明显延长,且平均每雌总产卵量为17.15粒,高于敏感种群（16.64粒）。以生命参数净生殖率（R0）来评价抗性种群和敏感种群的生物相对适合度,结果显示在16~28℃范围内,相对适合度Rf〈1,表明截形叶螨抗哒螨灵种群生物适合度下降,存在一定程度的生殖不利性;但在高温32℃和36℃下,Rf〉1（Rf=1.18和1.19）,具有生物适合度优势。说明截形叶螨经哒螨灵长期淘汰选择产生抗性后,对高温的适应能力增强,其存活能力和生殖力优于敏感种群。; 宋丽雯沈慧敏; 关键词：温度截形叶螨种群生物适合度

二斑叶螨抗甲氰菊酯种群解毒酶基因表达分析: 2015年; 基因 mRNA 水平相对表达量的显著变化是二斑叶螨对拟除虫菊酯类药剂产生抗性的重要机制。为了揭示二斑叶螨对甲氰菊酯抗性产生的解毒酶分子机理，本研究采用实时荧光定量 PCR（quantitative real time PCR，qRT－PCR）方法分析二斑叶螨实验室敏感（SS）和田间种群（LZ-R、GN-R、WW-R、TS-R 和 LX-R）主要解毒酶谷胱甘肽转移酶（glutathione s-transferases，GSTs）、细胞色素 P450单加氧酶（cytocheome P450 monooxygenases，P450s）及羧酸酯酶（carboxyl／cholinesterases，CCEs）基因 mRNA 水平相对表达量的差异。结果表明，二斑叶螨不同种群不同解毒酶基因的相对表达量不同。WW-R 和 TS-R 种群中 TuGSTd05以及 LX-R 种群中 TuGSTd01和 TuG-STd06基因表达量均显著上调，为 SS 种群的1．42～2．34倍，而 GN-R 种群中 TuGSTd04，LZ-R 种群中 TuGSTd05和 GSTd09表达量显著下调，为 SS 种群的0．41～0．70倍；P450s 基因 CYP406A1和 CYP4CL1表达量在 LZ-R、GN-R 以及 WW-R 种群中均显著上调，分别为 SS 种群的1．80～4．88倍，此外，CYP 387A1在 LZ-R 种群中显著上调2．19倍，而在 LX-R 种群中显著下调0．42倍；CCEs 基因 TuCCE-35表达量在 WW-R 和 TS-R 种群中显著上调，分别为 SS 种群的2．82和3．09倍，而 TuCCE-36基因在所有种群中的表达量均不显著。二斑叶螨不同种群中解毒酶基因 GSTs、P450s 和 CCEs 的显著上调或下调可能与甲氰菊酯的抗性形成有关。; 杨顺义岳秀利王进军刘长仲沈慧敏沈一凡郭金梅; 关键词：二斑叶螨甲氰菊酯解毒酶

截形叶螨抗哒螨灵种群抗性遗传方式的研究被引量：1: 2016年; 通过对室内选育出的截形叶螨敏感品系和抗哒螨灵品系的杂交和回交试验表明:所测得的截形叶螨正交F1SR(SS♀×RR♂)和反交F1RS(RR♀×SS♂)代的显性度DSR和DRS分别为0.40和0.60,表明抗性由不完全显性基因控制;两个D值(DRS和DSR)95%置信限有重叠,并且经t检验,两个D值不存在显著差异(P>0.05),证明截形叶螨对哒螨灵的抗性遗传为常染色体控制;回交F2代(BC1RS和BC1SR)的实际死亡率和期望值经χ2检验,无显著性差异(χ2=9.72,df=9,P>0.05),表明抗性遗传由单基因控制。; 宋丽雯张君霞杨顺义沈慧敏; 关键词：截形叶螨哒螨灵抗性

吡螨胺和哒螨灵亚致死剂量对截形叶螨的亚致死效应被引量：5: 2014年; 通过吡螨胺(tebufenpyrad)和哒螨灵(pyridaben)的亚致死剂量处理截形叶螨(Tetranychus truncatus Ehara)成螨和螨卵,研究了两药剂对实验种群的亚致死效应。结果表明:吡螨胺和哒螨灵处理后当代成螨的每雌日均产卵量均有不同程度的降低,日平均产卵量、卵孵化率均低于对照;F1的卵期、幼螨期、若螨期延长显著,净增殖率低于对照、内禀增长率和周限增长率与对照差异不大。两药剂处理卵后,卵期、幼螨期、若螨期延长,净增殖率低于对照。吡螨胺和哒螨灵的亚致死剂量处理截形叶螨成螨和螨卵都无刺激增殖的作用,能延缓种群的发育速度。; 郭金梅沈慧敏岳秀利沈一凡; 关键词：截形叶螨吡螨胺哒螨灵亚致死剂量亚致死效应

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国家自然科学基金(31260442)

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