国家自然科学基金(39660045)
- 作品数：2 被引量：9H指数：2
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- 抗冻蛋白-GUS基因诱导性融合表达载体转化烟草植株中GUS活性测定被引量：4
- 2006年
- 把修饰合成的带有甘薯信号肽序列的抗冻蛋白成串基因与β-葡萄糖醛酸苷酶(GU S)报道基因融合克隆在大豆热休克启动区下游构建了温度诱导型双元载体pBF 04,三亲株配对法转化根癌农杆菌,叶盘法导入烟草,获得了转基因烟草植株.将10株转基因烟草放置在40℃诱导不同时间,利用荧光光度分析法测定水解液中GU S活性,结果诱导18、24、48小时的4株中GU S活性明显高于对照组和诱导6、12小时组,说明我们修饰合成的抗冻蛋白与GU S基因融合构建的载体在热休克启动区控制下可以诱导表达.经组织化学法测定这些阳性植株的叶片和茎段切片细胞间隙显示GU S活性,提示甘薯信号肽可能起作用.
- 王文艳达来
- 关键词：抗冻蛋白转基因烟草
- 修饰合成冬鲽抗冻肽基因的设计和克隆被引量：5
- 2000年
- :动物界和植物界密码子使用频率不同 .冬鲽抗冻肽中丙氨酸占 60 %而且偏爱GCC ,3 8个Ala密码子中 2 3个为GCC .我们设计合成抗冻肽基因时采用了植物基因常用密码子 .用甘薯(Ipomoeabatatas)信号肽序列取代了抗冻肽的pre序列 ,省略了Pro序列 ,并构建了信号肽下游二、四、八拷贝正向串联的成熟肽的修饰基因 ,经测序证实与设计完全一致 .利用QIA表达系统 ,在大肠杆菌中实现了DHFR
- 达来朱晔荣马振毅王非阚锐
- 关键词：抗冻肽合成基因克隆
