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辽宁省大学生创新创业训练计划项目(201211258012)
作品数:
1
被引量:1
H指数:1
相关作者:
葛高顺
胡学军
张立超
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相关机构:
大连大学
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发文基金:
辽宁省教育厅高等学校科学研究项目
辽宁省大学生创新创业训练计划项目
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相关领域:
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大连大学
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张立超
1篇
胡学军
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葛高顺
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生物技术
年份
1篇
2013
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融合蛋白ELP30-Trx的表达及PEG8000对其相变温度的影响
被引量:1
2013年
目的:研究不同浓度的PEG8000对融合蛋白ELP30-Trx相变温度的影响。方法:将硫氧还蛋白(Thioredoxin,Trx)基因克隆到pET28-ELP30-Trx表达载体中,经IPTG诱导在宿主菌E.coli BLR(DE3)中表达ELP30-Trx,通过可逆相变循环(Inverse transition cycling,ITC)纯化融合蛋白。测量相变温度(T t),并检测不同浓度的PEG8000对ELP30-Trx T t的影响。结果:经酶切及测序鉴定证实成功构建了ELP30-Trx表达载体,经Westen-Blot检测表明成功表达ELP30-Trx融合蛋白。经ITC纯化后的ELP30-Trx纯度可达95%以上。5%、10%、15%、20%的PEG8000(W/V)使终浓度为25μmol/L ELP30-Trx的T t从37.9℃分别降低至34.6℃、28.5℃、14.0℃、6.0℃。结论:成功构建、表达融合蛋白ELP30-Trx,PEG8000能显著降低ELP30-Trx相变温度。通过对类弹性蛋白的研究,为类弹性蛋白的扩大应用提供理论依据。
张立超
葛高顺
胡学军
关键词:
融合蛋白
硫氧还蛋白
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