国家自然科学基金(30330070)
- 作品数：5 被引量：6H指数：2
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- 棉铃虫组织蛋白酶B酶原在毕赤酵母中的表达被引量：2
- 2006年
- 棉铃虫组织蛋白酶B(Helicoverpa armigeraCathepsin B,HCB)属于半胱氨酸蛋白酶类,参与胚胎发育中卵黄蛋白水解供给胚胎发育的氨基酸。将HCB基因克隆到pPIC9K载体并转化毕赤酵母KM71菌株,经甲醇诱导,HCB表达并分泌到培养上清中。表达产物经SDS-PAGE测定分子量为38kDa,与HCB基因编码的蛋白质分子量一致。用HCB的特异性抗体检测表明重组表达产物为棉铃虫组织蛋白酶B,原位水解实验显示重组表达的蛋白酶具有蛋白水解活性,表明在毕赤酵母中表达了有活性的棉铃虫组织蛋白酶B,可用于组织蛋白酶B酶原活化机理研究及开发新蛋白酶产品。
- 董杜鹃扈进冬张新昌李子劲王金星赵小凡
- 关键词：毕赤酵母
- 从大豆中纯化棉铃虫组织蛋白酶B抑制因子HCB-SoyI被引量：2
- 2005年
- 棉铃虫组织蛋白酶B(Helicoverpa armigeracathepsin B,HCB)在胚胎发育过程中降解卵黄蛋白为氨基酸,供给胚胎发育必需的养料,是棉铃虫胚胎正常发育的重要因素。许多植物种子中存在蛋白酶抑制因子,如大豆和向日葵种子。用棉铃虫组织蛋白酶B为酶源,通过硫酸铵沉淀、排阻层析和离子交换层析等方法,从大豆中分离纯化到了一种对HCB有抑制活性的蛋白酶抑制因子,命名为HCB_SoyI。用牛血清白蛋白为底物进一步证明该抑制因子对HCB具有抑制作用。该抑制因子的纯化为进一步克隆其基因奠定了基础,为转基因抗虫作物研究提供了新的候选靶标。
- 张新昌刘杨王金星赵小凡
- 关键词：棉铃虫大豆组织蛋白酶B纯化
- 棉铃虫组织蛋白酶B在杆状病毒表达系统中的表达及鉴定被引量：1
- 2005年
- 以棉铃虫(helicoverpa armigera)组织蛋白酶B作外源基因重组构建克隆载体,自重组菌株HCB-DH10Bad、Histag-HCB-DH10Bac中提取穿梭质粒,脂质体法转染草地贪夜蛾卵巢细胞系Sf21细胞,转染液再感染细胞,收集感染3～4 d的上清液,提取芽生病毒的DNA,PCR法鉴定外源HCB基因,感染上清进行SDS-PAGE、Western-blotting、蛋白酶活性检测.结果:感染上清中的芽生病毒的DNA作模板扩增出预期的1 700bp片段,SDS-PAGE、Western-blotting检测均在28ku处有明显表达产物,且表达产物有蛋白水解活性.
- 邵红莲赵小凡董杜鹃扈进冬邵丁丁杨晓梅王金星
- 关键词：棉铃虫组织蛋白酶B转染
- 棉铃虫蜕皮时期同工酶表达模式被引量：3
- 2007年
- 同工酶广泛存在于不同种属生物的组织细胞中,在生物发育的不同阶段有着特定的表达模式和重要的生理功能。昆虫蜕皮是在促前胸腺激素(PTTH)、蜕皮激素和保幼激素共同控制下由一系列基因表达和调控的级联反应。阐明蜕皮发育过程中同工酶的表达模式,可以为研究蜕皮的分子机理提供新的分子靶标,为研制生长调节剂类杀虫剂提供检测的分子标记。该研究分析了棉铃虫Helicoverpa armigera蜕皮时期不同组织中过氧化物酶、乙醇脱氢酶和酯酶的表达模式,找到了3种蜕皮差异表达的过氧化物酶,2种蜕皮或变态差异表达的乙醇脱氢酶,3种蜕皮差异表达的酯酶。生长调节剂类化学杀虫剂非甾醇类蜕皮激素竞争物RH-2485可以诱导3种酯酶表达上调,可能与蜕皮有关。这些结果为进一步研究棉铃虫蜕皮的分子机理和检测促蜕皮生长调节剂类化学杀虫剂提供了新的分子靶标。
- 郑薇薇张玉宝王金星赵小凡
- 关键词：棉铃虫蜕皮同工酶分子靶标
- Reconstruction of HaSNPV with helicoverpa hormone receptor 3
- 2007年
- 扈进冬Shao HonglianZhang YubaoFu QiangSun ChenWang JinxingZhao Xiaofan
- 关键词：HASNPV激素受体棉铃虫鳞翅类
