国家攀登计划(95--10)
- 作品数：33 被引量：303H指数：6
- 相关作者：韩忠朝张洹吴秀丽李扬秋王震更多>>
- 相关机构：暨南大学中国医学科学院北京协和医学院中国医学科学院中国协和医科大学更多>>
- 发文基金：国家攀登计划广东省自然科学基金天津市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 自体外周血干细胞移植治疗下肢动脉硬化性闭塞症被引量：184
- 2003年
- 目的 评价动员后自体外周血干细胞移植治疗下肢动脉硬化性闭塞症 (ASO)的临床疗效及部分影响因素。方法 确诊严重ASO患者 1例 ,予rhG CSF 30 0 μg皮下注射 ,每日 2次 ,进行外周血干细胞动员 ,第 5天用血细胞分离机单采干细胞 ,配成干细胞混悬液。将干细胞混悬液肌肉注射进行双下肢移植 (3× 10 9细胞 肢 )。 4 4d后给病情较重的左下肢第 2次移植相同的细胞数。观察 3个月 ,进行各项指标综合评估。结果 外周血干细胞移植后 ,患者疼痛、患肢冷感、间歇性跛行、溃疡明显好转 ,左右足踝压指数 (ABI)分别由 0 .4 9,0 .6 9升为 0 .5 0 ,0 .85。移植后 1个月末梢血流波幅 [(11.90± 10 .95 )mm]和激光多谱勒扫描血流灌注量 [(0 .4 9± 0 .16 )PU]较移植前 [分别为 (1.70± 1.95 )mm ,(0 2 7± 0 .0 8)PU]显著改善 (P <0 .0 1)。数字减影下肢动脉造影结果显示新侧支血管形成明显增加 (评分结果为 3)。未出现并发症和不良反应。结论 采用动员后的外周血干细胞移植治疗ASO患者 ,方法简单、安全、有效 ,值得推广应用和深入研究。
- 黄平平李尚珠韩明哲肖志坚杨仁池邱录贵钱冠清付仁敏郑亚丽刘春华徐秀强李君凡韩忠朝
- 关键词：自体外周血干细胞移植下肢动脉硬化性闭塞症疗效观察
- 腺病毒介导的凝血酶敏感蛋白1抗血管新生衍生物基因转移抑制K562细胞裸鼠体内生长被引量：4
- 2003年
- 目的 探讨腺病毒介导的凝血酶敏感蛋白 1(thrombospondin 1,TSP1)抗血管新生衍生物(TSP1f)基因转移对人白血病细胞株K5 6 2裸鼠移植瘤的抑制活性及作用机制。方法 应用RT PCR方法从正常人外周血单个核细胞扩增TSP1fcDNA序列 ;采用AdEasy系统构建TSP1f 重组腺病毒ADV TSP1f;用Western印迹方法检测ADV TSP1f 介导的TSP1f 在K5 6 2细胞中的表达 ;18只皮下移植瘤模型小鼠分为 3组 ,分别于移植瘤内注射 10 9pfuADV TSP1f、10 9pfuADV LacZ及PBS观察对K5 6 2裸鼠体内生长的抑制作用 ;用免疫组化方法比较移植瘤内微血管密度 (MVD)。结果 K5 6 2细胞经ADV TSP1f感染可高效表达 /分泌TSP1f 多肽 ;治疗后 3周ADV TSP1f 治疗组移植瘤体积为 ( 110 8mm3± 179mm3) ,远小于ADV LacZ组 ( 45 18mm3± 45 2mm3)及PBS组 ( 46 6 6mm3± 45 8mm3) ,(P <0 0 1) ;每× 2 0 0倍视野中 ,ADV LacZ、PBS及ADV TSP1f 治疗组组织切片内CD31阳性血管内皮细胞平均数分别为 36± 7,34± 9和 14± 4。结论 ADV TSP1f可显著抑制K5 6 2细胞裸鼠体内生长 ,有望成为治疗恶性肿瘤包括造血系统恶性肿瘤有效的基因治疗药物。
- 刘澎王一杨仁池蔡英林韩忠朝
- 关键词：凝血酶敏感蛋白1基因转移K562细胞
- Neuropilin-1及其配体SemaphorinIII在AML和正常人骨髓中的表达初探被引量：5
- 2002年
- 目的 :了解neuropilin_1基因及其配体semaphorinIII在急性髓性白血病 (AML)骨髓中的表达情况。方法 :利用逆转录_聚合酶链反应扩增20例急性髓性白血病病人骨髓单个核细胞中的neuropilin_1基因及其配体semaphorinIII基因 ,了解其表达情况。14例非血液病患者的骨髓标本作为对照。结果 :急性髓性白血病骨髓单个核细胞中的neuropilin_1基因表达率为15 0% ,semaphorinIII基因表达率为60 0% ,分别与相应正常对照(7 1 % ,57 1% )相比较无显著性差异。结论 :参与调控骨髓基质细胞的neuropilin_1基因及其配体semaphorinIII可表达于AML和正常人的骨髓细胞中 。
- 吴秀丽王震李扬秋陈少华杨力建韩忠朝
- 关键词：NEUROPILIN-1配体SEMAPHORIN急性髓性白血病
- 胚胎干细胞定向分化为神经细胞的研究进展
- 2003年
- 最近研究表明胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESC)在体内外均可以发育分化出神经组织细胞,这对于了解神经发育的机制和研究神经组织退化性或者脑组织损伤性疾病的治疗具有重要的意义。本文就胚胎干细胞定向分化为神经组织细胞及其基因表达特点作一综述。
- 刘革修张洹
- 关键词：胚胎干细胞定向分化神经细胞
- 环氧化酶-2及COX-2m RNA在脑膜瘤中的表达及意义被引量：4
- 2005年
- 目的观察环氧化酶-2(COX-2)蛋白及COX-2mRNA在人脑膜瘤组织中的表达,探讨COX-2基因表达与脑膜瘤病理分型的相关性.方法收集1995年3月～2003年4月在我院住院的56例脑膜瘤病人经手术治疗切除的肿瘤标本,另选颅脑损伤内减压手术切除的脑组织标本8例作为正常对照标本.石蜡包埋切片后,用免疫组化的方法检测COX-2蛋白在脑膜瘤中的表达,用原位杂交的方法检测COX-2mRNA在脑膜瘤中的表达.结果脑膜瘤的COX-2蛋白和COX-2mRNA的阳性表达率分别为53.57%和58.93%;正常对照组不表达.恶性脑膜瘤的COX-2蛋白和COX-2mRNA表达率明显高于良性脑膜瘤(P＜0.01).结论COX-2和COX-2mRNA在脑膜瘤中高度表达,且与脑膜瘤的病理分型有关;从蛋白水平和基因分子水平阐明COX-2可能在脑膜瘤的发生、发展过程中起重要作用.
- 马超袁先厚江普查陈卫国文志华吴涛吴志敏
- 关键词：环氧化酶-2原位杂交脑膜瘤恶性
- 干细胞白血病基因在再障和正常骨髓基质细胞中的表达被引量：4
- 2005年
- 目的了解白血病干细胞(SCL)基因在再生障碍性贫血(AA)骨髓基质细胞(BMSC)及骨髓细胞中的表达情况。方法收集9例AA和33例正常骨髓标本。体外长期培养扩增BMSC,并收集悬浮细胞。运用反转录聚合酶链反应酶联免疫吸附测定(RT-PCR-ELISA)检测SCL基因在BMSC和悬浮细胞中的表达,分析表达率,并以管家基因β2微球蛋白(β2M)为内参照进行半定量分析。结果SCL基因在AA的BMSC中的表达率(222%)低于正常对照组(697%,P<005)。SCL基因在AA的悬浮细胞中的表达率(875%)高于其对应的BMSC(P<005)。PCR-ELISA半定量分析结果显示,SCL基因在正常对照组悬浮细胞中的表达水平高于其对应的BMSC(P<005)。结论SCL基因在AA的BMSC中的相对低表达状态提示可能与AA造血调控异常有关。
- 王震李扬秋吴秀丽陈少华杨力建张洹朱康儿韩忠朝
- 关键词：基因表达
- 血管内皮生长因子基因反义核酸体外抑制K562细胞生长及机理研究被引量：4
- 2004年
- 目的 :探讨血管内皮生长因子 (VEGF)反义核酸抑制K5 6 2细胞生长的机理 ;以及反义药物的量效和时效关系 ,揭示VEGF基因新的功能。方法 :用反义核酸X7,2 0 -mer,全硫代修饰 ;以脂质体介导进行转染 ,细胞培养72h ,用MTT法计算细胞生长抑制率 ,采用台盼蓝拒染法每 2 4h观察细胞存活情况并计数 ,用Giemsa染色观测细胞形态学改变 ,用流式细胞仪检测细胞凋亡百分数。结果 :反义药物对K5 6 2细胞生长有明显抑制作用 ,呈剂量依赖关系 ,并且下调VEGF蛋白的表达 ,反义药物对K5 6 2细胞的凋亡无影响。结论 :VEGF反义药物抑制K5 6 2细胞生长的机理是抑制细胞增殖 ,而不是促进细胞凋亡 ,内源性VEGF蛋白具有促进K5 6
- 费嘉张洹韩忠朝
- 关键词：血管内皮生长因子K562细胞寡核苷酸类反义
- 胚胎干细胞向造血细胞分化研究被引量：2
- 2003年
- 胚胎干(cmbryonic stem,ES)细胞是来源于囊胚的内细胞团(inner cell mass,ICM),具有发育的全能性或多能性,能嵌合到早期胚胎,在体内可以参与各种组织发育甚至包括生殖细胞;在体外分化培养条件下,可以顺序分化出各种组织细胞,与体内完整胚胎发育过程相符合,而且可以通过调节ES细胞某些基因的表达而调节其分化。因此,ES细胞是研究哺乳动物早期胚胎发育、细胞分化及其关键基因鉴定的理想模型。另外,胚胎生殖脊(embryonic germ,EG)细胞系也具有同样的生物学特性,它是由早期胚胎的原始生殖脊(primordial germ:PG)细胞建株而来。最近研究显示:ES细胞在体外不但可以分化为所有造血细胞系,而且还可以分化为具有长期增殖能力的造血干细胞。作者就胚胎干细胞向造血细胞和造血干细胞分化及其诱导因子和调控基因的表达作一综述。
- 刘革修张洹
- 关键词：胚胎干细胞分化造血造血细胞
- 成体干细胞及其可塑性的研究进展
- 2003年
- 自从1998年第一次从内细胞团分离到人的胚胎干细胞,人们很快认识到胚胎干细胞在再生医学中的潜在应用价值.
- 郭虹赵春华
- 关键词：成体干细胞骨髓干细胞造血干细胞
- Neuropilin-1基因在急性非淋巴细胞白血病骨髓基质细胞中的表达被引量：2
- 2004年
- 目的 :了解neruophlin 1(NP 1)基因在急性非淋巴细胞白血病 (ANLL)骨髓基质细胞中的表达情况。方法 :收集 12例ANLL和 2 0例正常对照骨髓标本 ,分离单个核细胞。进行体外长期培养 ,收集贴壁细胞 (骨髓基质细胞 )。利用逆转录 -聚合酶链反应扩增两组骨髓基质细胞中的cDNA ,了解NP 1基因表达情况。结果 :建立了ANLL和正常人骨髓基质细胞培养方法 ,NP 1基因在ANLL骨髓基质细胞中的表达率为 (4 7.1% ) ,明显低于正常对照 (85 % )P <0 .0 5。结论 :参与调控骨髓基质细胞的NP 1基因可表达于部分ANLL和大部分正常人的骨髓基质细胞中 ,NP 1在ANLL患者骨髓基质细胞中的低表达 ,可能与其调节造血功能异常有关。
- 宿颖陈少华黄梅娟杨力建韩素芳王震吴秀丽李扬秋
- 关键词：急性非淋巴细胞白血病RT-PCR
