宁夏回族自治区自然科学基金(Nz08150)
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
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- 相关机构：宁夏疾病预防控制中心宁夏回族自治区疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：宁夏回族自治区卫生厅科研项目宁夏回族自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人源细粒棘球蚴的RAPD分析体系建立被引量：1
- 2010年
- 目的建立PCR-RAPD反应体系,提升细粒棘球蚴随机扩增多态性DNA(RAPD)遗传多态性研究的稳定性,为研究细粒棘球蚴的分类学以及包虫病的分子流行病学奠定基础。方法采用改进的酚-氯仿抽提法提取细粒棘球蚴基因组DNA,用单因素筛选方法建立PCR-RAPD分析体系。结果采用改进的酚/氯仿抽提方法提取细粒棘球蚴基因组DNA质量高,适用于PCR-RAPD扩增分析;在25μL体系中,RAPD-PCR扩增反应各成分的最佳浓度为:dNTP 0.2-0.3 mmol/L、Taq酶2.5U、随机引物0.8-1.4μmol/L,模板为60ng。PCR扩增最佳条件为:95℃预变性5min;94℃变性30s、32℃退火45s、72℃延伸1min、共35个循环;最后72℃延伸10min;初步从20条引物中筛选出11条带型丰富的随机引物。结论酚-氯仿适用于提取细粒棘球蚴基因组DNA,优化的RAPD反应体系和筛选出的随机引物适合进行细粒棘球蚴RAPD遗传多态性分析。
- 马学平李丽秦迎旭高建炜田涛
- 关键词：基因组DNA提取
- RAPD技术在宁夏人源细粒棘球蚴基因分型中的应用被引量：1
- 2010年
- 目的建立RAPD分子分型技术并将其应用于人源细粒棘球蚴基因分型研究。方法用单因素筛选方法建立PCR-RAPD分析体系,并用建立的RAPD分析方法对分离自宁夏不同地区13例包虫病病人的细粒棘球蚴进行RAPD指纹图谱分析。结果采用20条随机引物对细粒棘球蚴DNA进行扩增,其中11条引物呈现良好的多态性和稳定性,共得到232条片段。根据RAPD指纹图谱将13株人源细粒棘球蚴分为Ⅰ型(53.85%)、Ⅱ型(23.08%)、Ⅲ型(7.69%)和Ⅳ型(15.38%)4个种内基因类群。结论宁夏地区人源细粒棘球蚴之间存在不同的种内遗传差异。
- 马学平李丽秦迎旭高建炜田涛
- 关键词：PCRRAPD基因分型
