国家自然科学基金(30671429)
- 作品数：12 被引量：56H指数：5
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- 甘蓝自交不亲和决定因子的体外表达和相互作用的检测被引量：9
- 2009年
- S位点受体激酶(SRK)和S位点富含半胱氨酸蛋白/S位点蛋白11(SCR/SP11)分别为甘蓝自交不亲和(self-incom patibility,SI)信号传导的雌雄决定因子。为了深入研究两者的作用机理和进行人工调控,本研究以结球甘蓝ZQ为材料,利用pET.NusA融合蛋白表达系统,将包含SRK胞外域和跨膜域的mSRK蛋白和SCR蛋白在大肠杆菌BL21中融合表达,经SDS-PAGE电泳检测表达出融合蛋白大小分别约为116kD和74kD。进一步将两融合蛋白进行体外相互作用的检测,结果表明mSRK与SCR蛋白能够相互结合形成稳定的复合体,这为下一步实现SRK-SCR复合体聚合与解离的人为调控提供了技术平台。
- 杨洋高启国宋明牛义汤青林朱利泉王小佳
- 关键词：结球甘蓝自交不亲和
- 酵母菌的倍性及其鉴定方法(英文)被引量：2
- 2011年
- [目的]鉴别单、二倍体酵母菌株。[方法]分析了2种倍性酵母菌的特征及其联系,对酵母菌体进行美兰染色、产孢后子囊孢子的番红染色以及低温特殊处理试验,对单、二倍体酵母进行区分与鉴定。[结果]酵母菌株经美兰染色后能清晰观察到两者的活性及其菌体大小的差异;产孢后的二倍体菌株,子囊孢子被染成红色,菌体为蓝色,而单倍体菌株只有蓝色的菌体;低温特别处理后,在长有单、二倍体混合菌株的平板上,二倍体的菌落明显大于单倍体。[结论]单、二倍体酵母菌在形态上、遗传上和生理上存在很大差异,可以借助一些辅助试验很好地把它们区分开来。
- 洪玉杨永军常登龙朱利泉
- 关键词：酵母菌单倍体二倍体
- 芸薹属自交不亲和功能因子及分子机制研究进展被引量：6
- 2007年
- 芸薹属的自交不亲和性受S位点基因控制,其上的SRK基因和SCR/SP11基因是自交不亲和反应中的两个关键因子,另外所发现的其他因子也对自交不亲和发挥了重要作用。文章介绍了影响自交不亲和的功能因子及其分子结构特征和功能,对自交不亲和反应的分子机制作了进一步阐述,同时对这些功能基因在芸薹属植物甘蓝染色体组上的定位研究作出展望。
- 卢军李乐玉陈晓丹朱利泉王小佳
- 关键词：芸薹属自交不亲和分子机制
- 甘蓝中期、粗线期染色体及DNA纤维制片技术的优化研究
- 以甘蓝根尖、花蕾、叶等为材料,对甘蓝等小染色体植物有丝分裂前中期染色体、减数分裂粗线期染色体以及伸长DNA纤维的制片技术进行了优化。研究表明:前中期染色体敲前加染液烘烤再敲法明显较直接敲片烘烤法为优,明显增加核的大小,染...
- 吴志刚朱利泉
- 关键词：染色体制片
- 文献传递
- 甘蓝自交不亲和基因MLPK与SSP的FISH定位被引量：7
- 2009年
- 利用FISH技术,对自交不亲和基因MLPK与SSP在甘蓝有丝分裂前中期染色体、减数分裂早粗线期染色体以及伸长DNA纤维等3种分辨率水平的靶DNA载体上进行物理定位。结果表明,在有丝分裂前中期,MLPK探针信号位于一对近中着丝粒同源染色体的短臂中部,距着丝粒的百分距离约为53.41±3.16;SSP探针信号位于一对具有随体的近端着丝粒同源染色体的长臂端部,距着丝粒的百分距离约为78.36±4.26。综合3种载体上的FISH结果表明,MLPK与SSP在甘蓝染色体组中可能都只有一个同源序列座位,具有在单倍体基因组中的单拷贝性。重复FISH杂交表明,MLPK与5SrDNA位于同一对染色体。依据Armstrong的核型分析标准,初步判断MLPK与SSP可能分别位于甘蓝的2号和7号染色体,与S位点不存在连锁关系。另从比较基因组学角度对定位结果进行了讨论。
- 荣小营朱利泉王永高启国陈晓丹杨洋王小佳
- 关键词：甘蓝荧光原位杂交自交不亲和性
- 酵母菌的倍性及其鉴定方法被引量：2
- 2011年
- [目的]鉴别单、二倍体酵母菌株。[方法]分析了2种倍性酵母菌的特征及其联系,对酵母菌体进行美兰染色、产孢后子囊孢子的番红染色以及低温特殊处理,对单、二倍体酵母进行区分与鉴定。[结果]酵母菌株经美兰染色后能清晰观察到两者的活性及其菌体大小的差异;产孢后的二倍体菌株,子囊孢子被染成红色,菌体为蓝色,而单倍体菌株只有蓝色的菌体;低温处理后,在长有单、二倍体混合菌株的平板上,二倍体的菌落明显大于单倍体。[结论]单、二倍体酵母菌在形态上、遗传上和生理上存在很大差异,可以借助一些辅助试验很好地把它们区分开来。
- 洪玉杨永军常登龙朱利泉
- 关键词：酵母菌单倍体二倍体
- 甘蓝2号染色体的高分辨率5S rDNA荧光原位杂交被引量：3
- 2009年
- 【目的】羽衣甘蓝5SrDNA的染色体定位和拷贝数分析,为进一步利用FISH进行2号染色体基因定位和细胞遗传图谱构建奠定基础。【方法】以羽衣甘蓝为材料,采用荧光原位杂交技术将DIG标记的5SrDNA探针定位于不同分辨率的绒毡层细胞中期染色体、粗线期染色体以及伸长DNA纤维上。【结果】在中期染色体和粗线期染色体上,都同时获得3个杂交信号位点(a、b、c),且位于2号染色体的长臂近着丝粒区域,其信号强度为b>a>c;而在伸长DNA纤维上,出现了3种不同长度的念珠状长链(a、b、c),其物理大小分别为257、359和134kb,这3种长链分别与3个信号位点形成一一对应关系。【结论】在羽衣甘蓝2号染色体上存在3个串联重复位点,粗略估算出3个5SrDNA位点的拷贝数分别为510、712和266。
- 王永朱利泉荣小营陈晓丹唐章林王小佳
- 关键词：羽衣甘蓝RDNA荧光原位杂交
- 甘蓝染色体及伸长DNA纤维制备技术的研究被引量：2
- 2009年
- 以甘蓝根尖、花药、黄化苗等为材料,初步建立了甘蓝有丝分裂前中期染色体、减数分裂粗线期染色体以及伸长DNA纤维等3种具有不同空间分辨率的靶DNA载体的制备技术.结果表明:通过变温处理可以有效提高前中期染色体分裂相比率;采用0.002 mol/L 8-羟基喹啉20℃预处理1 h、2%纤维素酶和2%果胶酶混合液37℃酶解约2 h、0.075 mol/L氯化钾25℃低渗30 min,制备的前中期染色体效果最佳;2%纤维素酶和2%果胶酶混合液37℃酶解约3 h,可获得伸展良好、背景干净的粗线期染色体;分子梳理法与移动界面法相比,前者制备的伸长DNA纤维效果较好.此方法的建立为荧光原位杂交技术在甘蓝相关研究领域的应用打下了坚实的基础.
- 荣小营朱利泉王永王小佳
- 关键词：甘蓝染色体制片
- 一种高效稳定的甘蓝染色体制片新方法被引量：3
- 2008年
- 介绍一种高效稳定的甘蓝根尖染色体制片新方法,该方法结合传统的压片法和去壁低渗法优点,制片取得了良好的结果:染色体中期分裂相多,染色体分散良好,形态特征清晰,背景干净。制片可应用于染色体核型分析、分带、荧光原位杂交,以及显微切割等细胞遗传学操作。
- 卢军李乐玉朱利泉王小佳
- 关键词：甘蓝染色体制片
- 芸薹属A基因组DNA封阻下的C染色体组核型分析
- 为了探索一种高效可靠的芸薹属植物核型分析方法,本文以甘蓝和白菜为实验材料,分别提取甘蓝基因组 DNA 用地高辛标记为探针,提取白菜基因组 DNA 作为封阻剂,对甘蓝有丝分裂中期染色体进行原位杂交,每对同源染色体上显示出了...
- 陈晓丹王永卢军朱利泉王小佳
- 关键词：甘蓝基因组原位杂交核型分析
