辽宁省“百千万人才工程”资助项目(2008063)
- 作品数：2 被引量：0H指数：0
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- 大鼠血栓调节蛋白基因的克隆及在原核细胞中的表达
- 2009年
- 目的研究大鼠血栓调节蛋白基因的扩增、克隆及在原核细胞中的表达。方法以大鼠基因组DNA为模板,进行PCR扩增,用pMD18-Tsimple vector进行T克隆并测序。经EcoRⅠ和SalⅠ双酶切,将目的基因克隆到pET-28a(+)表达载体质粒中,转化E.coliBL21(DE3)表达重组蛋白,通过SDS-PAGE分析表达产物。结果含有大鼠血栓调节蛋白基因的PCR产物约为1850bp。重组pMD18-Tsimple vector质粒和重组pET-28a(+)质粒经EcoRⅠ和SalⅠ双酶切后,有相应大小的目的片段,测序结果正确。经IPTG诱导,重组pET-28a(+)质粒在E.coliBL21(DE3)中有相对分子质量约为72000的融合蛋白表达。结论成功克隆了大鼠血栓调节蛋白基因,并成功表达了该基因编码的蛋白。
- 陈秋晨王琳陈再兴王岩孟繁浩SUN Xue-long张岐山
- 关键词：血栓调节蛋白克隆PCR
- 大鼠血栓调节蛋白基因引物的设计与研究
- 2009年
- 设计了大鼠血栓调节蛋白基因PCR扩增引物,并对引物与模板的加入量及退火温度等进行了研究,优化了PCR反应。结果表明,PCR反应所得产物电泳条带清晰,位置正确,无非特异性扩增带;用该方法设计得到的基因引物能够高效、特异性地进行PCR反应。
- 陈秋晨王琳陈再兴朱旭张岐山孟繁浩
- 关键词：血栓调节蛋白PCR反应
