国家自然科学基金(81070414)
- 作品数：5 被引量：8H指数：2
- 相关作者：奚晓东黄建松周玉兰崔雄鹰施小凤更多>>
- 相关机构：上海交通大学医学院附属瑞金医院上海交通大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市科学技术委员会资助项目上海市科委国际合作基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 整合素β3胞浆段尾部序列对αvβ3介导的细胞行为的影响被引量：1
- 2012年
- 目的:探讨在与整合素αv复合的模式下,整合素β3亚基胞浆段序列在肿瘤细胞的黏附、伸展和迁移中所起的作用,从而为寻找干扰肿瘤进展的分子靶点提供思路。方法:利用中国仓鼠卵巢(CHO)细胞模型,建立共表达整合素αv与整合素β3全长及其T758、Y759位截短体的稳定细胞株,检测各稳定细胞株在固相化的αvβ3配体玻璃黏连蛋白上的黏附、伸展功能,运用transwell观察各细胞株的迁移能力。结果:稳定表达整合素αvβ3全长的CHO细胞具有在固相化玻璃黏连蛋白上的黏附、伸展和迁移能力。相较于CHO-αvβ3全长细胞株,CHO-αvβ3△758截短体细胞株的黏附、伸展以及迁移能力均明显受损;而CHO-αvβ3△759截短体细胞株仍保留着黏附能力,但伸展能力减弱,并且迁移能力受损明显。结论:整合素β3胞浆尾端YRGT和RGT氨基酸序列在αvβ3介导的细胞黏附和迁移方面发挥不同的作用,提示β3亚基胞内段参与调控肿瘤细胞的重要细胞行为,是潜在的肿瘤治疗靶点。
- 周玉兰黄建松刘萍施小凤崔雄鹰阮铮奚晓东
- 关键词：整合素ΑVΒ3
- 整合蛋白β3近膜端α螺旋中的E726Q突变影响细胞膜与肌动蛋白皮质层相互作用继而诱导细胞膜形成突起小泡被引量：2
- 2011年
- 整合蛋白β亚基胞浆段近膜端α螺旋在与诸多蛋白如踝蛋白(talin)、α-辅肌动蛋白(α-actinin)或者骨架蛋白(skelemin)等的结合上发挥着重要的功能。本研究的目的是通过对α螺旋上5个保守的带电荷氨基酸(R724,K725,E726,E731和E733)的研究,采用定点突变的方法,从而明确其在介导β3与骨架蛋白结合中的作用。实验结果表明,表达有突变型整合蛋白αⅡbβ3E726Q的CHO细胞株在固相化的纤维蛋白原上伸展不良,表型最显著。除此之外,E726Q突变可以诱导CHOαⅡbβ3E726Q细胞株在固相化的纤维蛋白原上的细胞膜起泡现象,且这种突起小泡(blebs)可以被肌凝蛋白轻链ATPase抑制剂blebbistatin所抑制。结论:整合蛋白β3亚基近膜端α螺旋在将细胞膜锚定到膜下肌动蛋白皮质层(submembraneous actin cortex)方面发挥重要作用。
- 孔永奎张玥林明辉奚晓东
- 血友病B的基因治疗
- 2013年
- 血友病B是一种x染色体连锁隐性遗传病，因编码基因的改变而导致凝血因子Ⅸ（FⅨ）的缺乏。在男性中发病率约为1／25000，依据血浆FⅨ活性（FIX：c）分为重型（FIX：c〈1％）、中间型（FIX：C1％～5％）和轻型（FlX：C〉5％，≤40％）。目前该病主要治疗手段为替代治疗（输注血浆提取物或重组FIX制剂），
- 龙章彪章国卫奚晓东
- 关键词：基因治疗血友病B输注血浆编码基因发病率
- 利用显性负模型研究整合素β3胞浆段RGT序列对信号转导的调控机制被引量：2
- 2012年
- 该研究探讨整合素β3胞浆段RGT序列在整合素信号转导中的作用。利用IL-2R胞外段和跨膜段(Tac)与整合素β3胞浆段全长或截短序列构建Tac-β3嵌合体,即Tac-β3和Tac-β3Δ759,使其分别在表达GPIbIX、整合素αIIbβ3的CHO细胞株(IbIX/IIbIIIa-CHO细胞株)中稳定表达(即IbIX/IIbIIIa-CHO/Tac-β3、IbIX/IIbIIIa-CHO/Tac-β3Δ759细胞株)。利用竞争酶联免疫法对Tac-β3嵌合体进行定量,观察IbIX/IIbIIIa-CHO/Tac-β3、IbIX/IIbIIIa-CHO/Tac-β3Δ759细胞株在固相化纤维蛋白原上的伸展情况(代表外向内的信号转导);Co-IP研究Tac-β3嵌合体、β3与下游信号分子Src的结合情况。结果发现:竞争酶联免疫法证实了两个细胞株的Tac-β3嵌合体表达都高于野生型β3,保证了Tac-β3嵌合体对内源性β3在结合胞内分子中的显性负效应;IbIX/IIbIIIa-CHO/Tac-β3细胞株在固相化纤维蛋白原上的黏附伸展能力受到抑制,而IbIX/IIbIIIa-CHO/Tac-β3Δ759细胞株在固相化纤维蛋白原上的黏附伸展能力并未受到明显影响。Co-IP结果显示:Tac-β3能结合内源性Src,而胞浆段RGT序列缺失的Tac-β3Δ759则不与内源性Src结合。选择性地破坏Tac-β3的Src结合能力即足以去除其对外向内信号转导的显性负效应,从而表明:整合素β3尾端RGT序列与Src的相互作用在这一信号转导通路中起决定性的作用。
- 陶岚岚黄建松吕媛靖周玉兰崔雄鹰阮铮奚晓东
- 关键词：蛋白质相互作用信号转导
- 剪切力对血栓形成作用的研究进展被引量：3
- 2013年
- 随着人民生活水平的提高,心脑血管动脉血栓性疾病致残率和死亡率逐年升高,居各类疾病死亡率的前两位,血小板在心血管疾病中起着重要的作用[1].血小板可黏附聚集到受损的血管,这一过程因剪切力的存在变得异常复杂.剪切力使血小板在黏附聚集时受到血液动力学作用,同时血小板也进化产生了具有特殊功能的黏附受体,从而能在剪切力的环境下黏附到血管壁上.近几年因为体外微流控高剪切力模拟仪的开发和高分辨力实时成像技术的发展,人们对剪切力下血栓的形成有了新的认识.本综述拟结合近几年的最新研究进展,从剪切力和剪切率的定义、剪切力对血栓形成的双重作用、剪切力下血栓形成的过程、急性冠状动脉综合征等病理状态下剪切力对血栓形成的影响及病理性高剪切力下抗血栓药物的选择等几个方面对剪切力与血栓形成之间的关系做一阐述.
- 施小凤黄建松周玉兰崔雄鹰刘萍奚晓东
- 关键词：血栓形成剪切力急性冠状动脉综合征动脉血栓性疾病疾病死亡率心脑血管
