广东省科技计划工业攻关项目(c1221020700008)
- 作品数:3 被引量:2H指数:1
- 相关作者:马文霞张庆玲贺莉许志军徐家辉更多>>
- 相关机构:南方医科大学南方医院南方医科大学中国人民解放军更多>>
- 发文基金:广东省科技计划工业攻关项目国家自然科学基金山西省自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 白藜芦醇用于预防和治疗结直肠癌的研究进展被引量:2
- 2016年
- 近年来研究显示,白藜芦醇具有抗氧化、抗炎的特性,能够调节细胞内糖和神经酰胺的代谢,激活转录激活因子3和过氧化物酶体增殖物激活受体γ等抑癌因子,又可下调鼠类肉瘤病毒癌基因的表达,抑制癌细胞上皮间质转化的发生等,使得白藜芦醇在预防和治疗结直肠癌方面发挥重要作用.另外,白藜芦醇在联合治疗中显示出广阔的应用前景.
- 徐家辉刘德英许志军马文霞张庆玲
- 关键词:结直肠肿瘤白藜芦醇
- 应用重组慢病毒表达载体建立抑癌基因WTX稳定高表达结直肠癌SW620细胞系
- 2015年
- 目的构建WTX CDS区全长重组慢病毒表达载体,感染结直肠癌SW620细胞,建立WTX稳定高表达结直肠癌SW620细胞株。方法将WTX基因全长CDS区插入GV287慢病毒质粒载体,重组载体与包装载体共转染人胚肾293T细胞,收集上清、浓缩得到表达WTX的重组慢病毒。慢病毒感染结直肠癌SW620细胞,荧光显微镜初步观察感染效率,G418进一步筛选得到稳定感染细胞株。QPCR及Western blotting检测WTX过表达效率。每部分均设立相应对照。结果载体片段测序结果示成功构建了WTX重组表达载体;包装病毒滴度检测适中,提示WTX表达慢病毒包装成功;慢病毒感染结直肠癌SW620细胞后,WTX基因m RNA以及蛋白表达水平明显增高,有统计学意义,提示SW620结直肠癌细胞WTX高表达稳定株构建成功。结论建立慢病毒感染方法的结直肠癌SW620细胞WTX过表达稳定细胞株,为进一步研究WTX对结直肠癌发生、发展的作用机制提供分子生物学工具。
- 马文霞贺莉刘椿张庆玲丁彦青
- 关键词:CHROMOSOME慢病毒载体稳定转染结直肠癌
- CDC42沉默对结直肠癌细胞形态的影响
- 2016年
- 目的根据CDC42蛋白二级结构,设计CDC42 si RNA干扰片段,构建CDC42稳定干扰sh RNA载体。观察CDC42有效沉默对结直肠癌SW480细胞形态的影响。方法根据CDC42基因CDS区序列,设计4条si RNA片段。Western blot筛选最有效沉默片段,酶切插入真核表达载体,将构建的sh RNA质粒载体,瞬时转染结直肠癌SW480细胞,QPCR及Western blot验证CDC42沉默效率;观察转染前后,SW480细胞形态变化。结果 4条si RNA转染细胞后,验证结果显示si RNA-3沉默效率大于50%,沉默效果最好,将此片段插入真核表达载体,测序结果提示CDC42 sh RNA构建成功,转染SW480细胞后,CDC42基因m RNA及蛋白水平表达明显下降,差异有统计学意义;显微镜观察CDC42沉默后,SW480细胞周边伪足伸出减少,细胞变光滑,细胞整体体积明显减小。结论成功根据基因序列设计有效沉默片段,构建CDC42稳定沉默载体,证实CDC42沉默可以逆向改变结直肠癌细胞高侵袭性形态,为研究CDC42对结直肠癌的发生、发展提供分子工具。
- 贺莉马文霞张庆玲
- 关键词:CDC42结直肠癌细胞形态