江西省教育厅青年科学基金(GJJ10067)
- 作品数:3 被引量:6H指数:2
- 相关作者:胡欣春喻东亮徐建军魏益平彭金华更多>>
- 相关机构:南昌大学第二附属医院江西省胸科医院南昌大学更多>>
- 发文基金:江西省教育厅青年科学基金国家自然科学基金国家重大科学仪器设备开发专项更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- miR-21抑制物对A549细胞球增殖的影响及机制被引量:3
- 2014年
- 目的研究miR-21抑制物在A549细胞球增殖的作用及其相关机制。方法在无血清培养基中培养A549细胞球,形成细胞球后进行CD133+CD44+表达检测。实验分为A549细胞球组:未经处理;IHN组:miR-21抑制物转染A549细胞球组;IHN-NC组:miR-21抑制物阴性对照物转染A549细胞球组。Western印迹检测A549细胞和A549细胞球中DKK2、β-catenin蛋白以及QPCR检测miR-21在两种细胞中的表达;合成miR-21抑制物和阴性对照,分别转染A549细胞球48 h后,应用QPCR检测转染前后miR-21的表达变化,以及使用Western印迹分析DKK2、β-catenin蛋白的表达变化,利用噻唑蓝(MTT)检测12、24、48 h细胞的增殖能力。结果流式细胞术检测A549细胞球中CD133+CD44+阳性率为65.800%;IHN组miR-21的表达以及β-catenin蛋白的表达较A549细胞球组和IHN-NC组显著下调(P<0.05),而DKK2蛋白表达显著升高(P<0.05);MTT结果示IHN组和IHN-NC组在12、24、48 h时抑制率显著高于A549 sphere组(P<0.05),IHN组在24、48 h时相点抑制率明显高于IHN-NC组(P<0.05)。结论miR-21抑制物可有效抑制A549 sphere的增殖,其可能成为治疗肺癌的潜在靶点。
- 胡欣春魏益平喻东亮彭金华徐建军
- 关键词:MIR-21抑制物肺癌
- miR-4686对A549细胞球增殖的调控作用及其机制研究被引量:1
- 2014年
- 目的研究miR-4686对A549细胞球增殖的调控作用及其相关机制。方法培养A549细胞,从中分选出CD133+CD44+A549细胞并置于无血清培养基中培养,形成细胞球后进行CD133+CD44+表达检测。Western blot检测A549细胞和A549细胞球中Wnt5a、Wnt2蛋白的表达;合成miR-4686抑制物和阴性对照,分别转染A549细胞球48 h后,应用Real-time PCR检测转染前后miR-4686的表达变化后,使用Real-time PCR和Western blot分析Wnt5a、Wnt2以及β-catenin mRNA和蛋白的表达变化,利用MTT检测12、24、48 h细胞的增殖能力。结果流式细胞术检测A549细胞球CD133+CD44+表达为69.800%;A549细胞球分别转染miR-4686抑制物和阴性对照物后,miR-4686的表达以及Wnt5a、Wnt2和β-catenin mRNA和蛋白的表达较对照组和miR-4686阴性对照物组显著下调(P<0.05);A549细胞球转染miR-4686抑制物后12、24、48 h,其OD值显著低于对照组和miR-4686对照物干预组(P<0.05)。结论 miR-4686介导Wnt信号通路发挥调控A549细胞球增殖的作用,其可成为治疗肺癌的潜在靶点。
- 胡欣春魏益平彭金华喻东亮徐建军
- 关键词:MICRORNA抑制物CD133
- 肺腺癌组织微RNA表达谱及在CD133^+肺癌细胞中的表达研究被引量:2
- 2014年
- 目的探讨肺癌组织中微RNA(miRNA)的表达谱以及在CD133+A549中的表达。方法取肺腺癌患者的肺癌组织标本和癌旁组织标本,进行miRNA表达芯片分析。利用流式细胞术(FCM)分选并培养CD133+A549细胞2周,检测CD133+、CD44+表达分析并应用实时荧光定量PCR检测miRNA-892b和miRNA-4686在CD133+A549细胞中的表达情况。结果肺癌组织中有27个miRNA表达较癌旁组织中的表达上调(P<0.05),6个miRNA的表达较癌旁组织中的表达下调(P<0.05)。CD133+A549细胞CD133+、CD44+双阳性表达率为75.0%。CD133+A549细胞中miRNA-892b和miRNA-4686的表达显著高于A549细胞(P<0.01)。结论肺腺癌组织中miRNA存在异常表达谱,miRNA-892b和miRNA-4686可能在维持CD133+肺癌细胞生物学特性中发挥着一定的作用。
- 胡欣春徐建军喻东亮彭金华魏益平
- 关键词:微RNASCD133