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新生霉素抑制HL-60／Bcr-Abl细胞增殖与阻断Hsp90伴侣功能的关系被引量：1: 2008年; 目的研究新生霉素(novobiocin,NB)对HL-60/Bcr-Abl细胞的作用,并探讨该作用是否与Bcr-Abl水平和热休克蛋白90(Hsp90)分子伴侣的功能有关。方法用蛋白免疫印迹法检测Bcr-Abl的含量,采用免疫共沉淀的方法研究Hsp90分子伴侣的功能。先将Bcr-Abl与其分子伴侣共沉淀下来,然后用免疫印迹法检测沉淀物中与Bcr-Abl结合的Hsp90和Hsp70含量变化。应用蛋白酶体抑制剂ALLnL研究Bcr-Abl降解的途径。结果NB能降低HL-60/Bcr-Abl细胞中Bcr-Abl的蛋白水平,NB使Bcr-Abl与Hsp90和Hsp70的结合减少,促进蛋白酶体降解Bcr-Abl蛋白,ALLnL处理后NP-40insoluble部分Bcr-Abl蛋白水平提高。结论该研究证明NB通过干扰Hsp90伴侣功能,减少Bcr-Abl与Hsp90和辅伴侣的结合,从而促进蛋白酶体降解Bcr-Abl蛋白,最终抑制HL-60/Bcr-Abl细胞增殖。; 吴丽贤许建华张昆仲温彩霞黄秀旺; 关键词：新生霉素热休克蛋白90 分子伴侣

新生霉素抑制K562细胞增殖与阻断Hsp90伴侣功能的关系: 2007年; 目的研究新生霉素(novobiocin,NB)对K562细胞的作用,并探讨该作用是否与热休克蛋白90(Heat shock protein90,Hsp90)分子伴侣的功能有关。方法用蛋白免疫印迹法检测Bcr-Abl的含量,采用免疫共沉淀的方法研究Hsp90分子伴侣的功能。先将Bcr-Abl与其分子伴侣共沉淀下来,然后用免疫印迹法检测沉淀物中与Bcr-Abl结合的Hsp90和Hsp70含量变化。结果NB能降低K562细胞中Bcr-Abl的蛋白水平,使Bcr-Abl与Hsp90和Hsp70的结合减少。结论本研究首次证明干扰Hsp90伴侣功能,减少Bcr-Abl与Hsp90和辅伴侣的结合与NB抑制慢性粒细胞白血病(chronic myelogenous Leukemia,CML)相关。; 吴丽贤许建华张昆仲温彩霞黄秀旺; 关键词：新生霉素热休克蛋白90 分子伴侣

Hsp90抑制剂新生霉素诱导HL-60细胞凋亡及其机制被引量：8: 2007年; 目的研究Hsp90抑制剂新生霉素(novobiocin,NB)诱导HL-60细胞凋亡的作用,探讨该作用与线粒体凋亡途径的关系,并进一步研究NB对Hsp90客户蛋白(clientprotein)AKT和ERK2功能的影响。方法细胞用NB处理后,采用AO/EB染色后荧光显微镜观察凋亡形态,采用AnnexinV-FITC/PI双染后流式细胞仪检测细胞凋亡率,分光光度法检测Caspase-9和Caspase-3的活性,用蛋白免疫印迹法检测细胞色素C的含量,以及procaspase-3、p-AKT(Ser473)和p-ERK2的蛋白水平。结果NB能明显抑制HL-60细胞增殖,IC50是0.3546mmol.L-1;NB能促进细胞色素C释放入胞质,激活Caspase-3/9的活性,触发HL-60细胞凋亡;NB能抑制AKT和ERK的功能,使细胞内p-AKT(Ser473)和p-ERK2的蛋白含量减少。结论NB可通过线粒体途径诱导HL-60细胞凋亡,还可干扰Hsp90伴侣功能阻断增殖信号通路,抑制HL-60细胞生长。; 吴丽贤许建华张昆仲温彩霞黄秀旺; 关键词：新生霉素凋亡分子伴侣 HL-60细胞

新生霉素对STI571耐药K562/G01细胞的作用被引量：1: 2007年; 目的研究热休克蛋白90(Hsp90)抑制剂新生霉素(novobiocin,NB)对STI571耐药K562/G01细胞生长的抑制作用,并研究NB和STI571联合应用对STI571敏感和耐药细胞的作用,并进一步探讨该作用与Bcr-Abl蛋白水平和Bcr-Abl激酶水平的关系。方法用MTT法检测NB对K562和K562/G01细胞生长的抑制作用,用金氏公式评价药物合用体外是否有协同作用,用蛋白免疫印迹法检测Bcr-Abl蛋白水平和p-Tyrosine水平。结果NB能抑制K562和K562/G01细胞增殖,IC50分别是0.4353mmol.L-1和0.3490mmol.L-1;NB和STI571联合应用对STI571敏感和耐药细胞均有协同作用;NB能使K562和K562/G01细胞内Bcr-Abl和p-Tyrosine蛋白含量减少。结论NB通过减少Bcr-Abl和p-Tyrosine蛋白含量,抑制STI571耐药细胞K562/G01的增殖,NB和STI571有协同效应。; 吴丽贤许建华张昆仲温彩霞黄秀旺; 关键词：新生霉素热休克蛋白90

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福建省自然科学基金(C0610025)