国家教育部博士点基金(20110001110016)
- 作品数：1 被引量：1H指数：1
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- VSTM1多克隆抗体的制备和鉴定被引量：1
- 2012年
- 目的:制备VSTM抗体,鉴定其性能。方法:VSTM1有两种主要的剪接体VSTM-v1和VSTM-v2。前者为膜分子,后者为分泌蛋白,与前者相比后者仅缺少穿膜区。构建VSTM-v2的原核表达载体,诱导表达并纯化带两种不同标签的VSTM-v2重组蛋白,Trx-His-S-VSTM1-v2和GST-VSTM1-v2。用前者免疫家兔制备VSTM1抗血清,ELISA检测效价;后者偶联Sepharose 4B制备免疫亲和层析柱对抗血清进行纯化。通过Western blot法和免疫荧光细胞化学技术,鉴定该抗体的特异性与适用范围。结果:免疫得到兔抗人VSTM1抗血清,效价达到1∶106。纯化后的抗体用于Western blot可特异识别过表达和内源性的VSTM1,并可用于免疫荧光细胞化学技术检测细胞膜表面过表达的VSTM-v1。结论:成功制备了兔抗人VSTM1抗体,具有较高的效价及特异性,可以识别内源性VSTM1并可用于免疫荧光细胞化学技术。
- 李婷郭晓欢王平章宋泉声马大龙韩文玲
- 关键词：细胞因子白细胞分化抗原多克隆抗体
