广东省科技计划工业攻关项目(2012B031800140)
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
- 相关作者：胡旭初陈红武李婷杨梅陈金桃更多>>
- 相关机构：中山大学南方医科大学南方医院广东省中医院更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 华支睾吸虫硫氧还蛋白过氧化物酶的表达定位及其酶活性的研究被引量：3
- 2014年
- 目的克隆和表达有酶活性的华支睾吸虫硫氧还蛋白过氧化物酶（CsTPx）,并进行组织定位研究,为进一步研究其功能奠定基础。方法利用生物信息学方法从华支睾吸虫基因组文库中识别硫氧还蛋白过氧化物酶（TPx）基因,并对蛋白的结构特征和相关生物学和免疫学功能进行预测。从华支睾吸虫成虫cDNA中扩增目的基因,克隆到原核表达载体pET-30a（＋）中,进行蛋白纯化,免疫印迹鉴定、组织定位及其酶活性的检测。结果华支睾吸虫TPx基因全长2 175 bp,有一大一小的两个内含子,其编码区序列长度为636 bp,编码212个氨基酸;该蛋白第1~17位氨基酸为其信号肽序列,第51-74位氨基酸为跨膜区,属于经典的2-Cys过氧化物还原酶。重组蛋白可被感染了华支睾吸虫的大鼠血清识别,免疫组化结果表明该蛋白定位于成虫的皮层、肠支、卵黄腺、虫卵和囊蚴的体壁中。酶活性检测结果表明,在一定范围内,CsTPx还原H2O2呈剂量和时间依赖性。抗体对酶活性有影响,在合适的抗体水平可以促进酶活性。结论 CsTPx可在大肠杆菌中进行功能性表达,其产物具有良好的免疫学和生物学活性。
- 李婷杨梅陈金桃宋天章余新炳陈红武胡旭初
- 关键词：华支睾吸虫酶活性
- 华支睾吸虫CsTMP63o基因的克隆、表达及感染者抗体亚类分析
- 2016年
- 目的:对华支睾吸虫跨膜蛋白63c基因进行克隆、表达,并通过感染者抗体亚类分析评价其免疫学诊断效果。方法:根据Cs TMP 63c(Gen Bank序列号:AF093242)基因序列,拼接其多个跨膜区片段,人工合成新基因Cs TMP 63o,制备抗原免疫小鼠,检测抗体效价,建立抗体检测系统,初步分析感染者针对Cs TMP 63o的特异性抗体亚类。结果 :从Cs c DNA文库中筛选出Cs TMP 63c基因,全长2 013 bp,由大肠杆菌表达、纯化,得到分子量为38 k D的重组蛋白。免疫大鼠后,抗体效价较低;感染者的抗体亚类分布以IgG4类为主,与各项常规生化和血液指标未发现有显著相关性。结论 :Cs TMP 63o在大肠杆菌中高效表达,具有较好的免疫原性,但血清诊断价值不理想。
- 苑林钟伟国尹红玲宋天章胡旭初
- 关键词：华支睾吸虫跨膜蛋白免疫应答
- 重组人硫氧还蛋白对大鼠内毒素肺损伤保护作用
- 2015年
- 目的:探讨重组人硫氧还蛋白1(rh Trx-1)对新生SD大鼠急性内毒素肺损伤的保护作用.方法:制备、鉴定rh Trx-1;将新生SD大鼠分为对照组、脂多糖(LPS)实验组和LPS+rh Trx-1干预组.腹腔注射LPS(质量分数为5 mg/kg),制备急性内毒素肺损伤模型,干预组于LPS注射前30 min腹腔注射rh Trx-1(质量分数为10 mg/kg),观察注射后24 h各组新生SD大鼠的一般情况以及死亡率;重复实验,每组分别于实验后的2、8 h随机处死大鼠,提取肺组织用于病理切片观察.结果:(1)成功制备rh Trx-1;(2)LPS组大鼠表现出活动少,反应差,精神萎靡,毛发无光泽,口周发绀等全身炎症反应症状,濒死状态时表现为毛色青灰,呼吸浅表;LPS+h Trx-1干预组动物症状明显减轻;阴性对照组、LPS实验组和LPS+rh Trx-1干预组大鼠24 h死亡率分别为0%,67%、17%(2=14.400,P=0.001);(3)LPS组肺组织损伤严重,可见肺组织结构不完整,肺泡间隔明显增宽,肺泡腔内有红细胞、炎症细胞及浆液渗出,血管周围组织可见白细胞浸润,毛细血管有明显充血及扩张表现,随时间延长有加重趋势,LPS+rh Trx-1干预组病理改变较内毒素组明显减轻,肺泡结构尚正常,轻度肺水肿,肺泡间隔稍增宽,红细胞渗出明显减少,肺泡及肺间质中白细胞浸润减少.结论:重组人硫氧还蛋白1对急性内毒素肺损伤的新生大鼠具有保护作用.
- 陈红武赵海燕胡旭初
- 关键词：急性肺损伤新生SD大鼠
