广东省科技计划工业攻关项目([2006]119)
- 作品数：5 被引量：16H指数：3
- 相关作者：刘冬梁世中孙海燕方科伟杨汝德更多>>
- 相关机构：深圳职业技术学院华南理工大学更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生化学工程生物学更多>>
- 基因工程法高效表达降血压肽的稳定性及降压效果被引量：6
- 2008年
- 背景：分离纯化生物活性肽的方法主要是酶解法,分离产物为多肽混合物,易受微生物侵染,发生变质,分离过程复杂,产量较低;而采用化学合成方法成本又很高。目的：观察以基因工程法高效表达的降血压肽在不同外界条件下的稳定性和活性,及其在体内的降压效果。设计、时间及地点：对比观察实验,2007-11/2008-04在深圳职业技术学院生物技术实验室完成。材料：10周龄雄性原发性高血压模型Wistar大鼠40只,10周龄雄性正常Wistar大鼠10只。原发性高血压模型大鼠收缩压在180mmHg（1mmHg=0.
- 方科伟孙海燕刘冬杨汝德
- 关键词：降血压肽稳定性血管紧张素转换酶反相高效液相色谱法生物材料
- 降血压肽基因工程菌的构建及高效表达策略
- 2008年
- 降血压肽具有很好的降血压效果而且天然无毒副作用,是目前基因工程研究的热点之一。阐述了降血压肽基因工程菌构建的重要性,综述了国内外关于降血压肽及各种小肽表达方面的研究进展。探讨了降血压肽基因工程菌在构建过程中目的片段的选择、串联连接的方式、串联体的获得及表达载体的选择等方面采用的策略和依据,重点介绍了各种不同表达类型载体的优缺点。旨在能对今后做降血压基因工程菌的多肽表达提供参考,以方便实验设计。
- 王小莉刘冬梁世中
- 关键词：降血压肽基因工程
- 胰蛋白酶水解工程菌表达产物制备重组降血压肽被引量：5
- 2008年
- 本实验研究了胰蛋白酶对工程菌E.coliBL21表达产物的酶解作用,以酶解产物降血压多肽VLPVPR含量为指标,分析pH值、酶解温度、酶浓度和酶解时间等因素对酶解反应的影响。结果表明,最佳酶解条件为:酶解温度37℃,pH8.0,酶浓度90U/mL,酶解时间4h。在此条件下酶解产物VLPVPR含量为211.1mg/L。
- 卢真保刘冬李世敏喇文军梁世中
- 关键词：胰蛋白酶酶解
- 多肽及蛋白类药物微囊制剂研究的特点被引量：7
- 2008年
- 学术背景:多肽及蛋白类药物稳定性差、易被酶降解,口服给药的生物利用低,如将其包埋成微囊制剂,不仅能有效防止药物在体内很快被降解,还能够提高药物的稳定性,实现缓释或控释。目的:介绍几种常用的多肽及蛋白类药物微囊制备方法,并比较各种方法的优缺点,以及常用的药用辅料。检索策略:由第一、二作者应用计算机检索Proquest和Elsevier数据库1993-01/2008-01文献,检索词为"microcapsule",限定语言种类为"English";同时检索维普中文期刊数据库、万方数据库1996-01/2008-01文献,检索词为"微囊",限定语言种类为中文。纳入与多肽及蛋白类药物微囊制备方法、工艺优化及壁材选择有关文献,排除较陈旧的文献及重复研究。文献评价:共收集到140篇相关文献,30篇符合标准,其中22篇介绍多肽及蛋白类药物微囊制备方法,8篇关于常用的药用辅料。资料综合:①多肽及蛋白类药物微囊化的常用制备方法主要有复相乳液法、超临界流体法、喷雾干燥法,具体制备过程中应根据药物的理化性质选择合适的方法。②用于制备多肽或蛋白类药物的壁材主要有可生物降解聚合物和生物黏附材料。结论:多肽及蛋白类药物微囊制备应根据其不同的理化性质选择合适的制备方法和壁材,以获得最理想的实验结果。同时,多肽及蛋白质类药物的稳定性将是制备过程中需要重点考察的内容。
- 方科伟刘冬孙海燕杨汝德
- 关键词：多肽药物微囊喷雾干燥法生物材料
- 重组降血压肽表达系统的构建及表达多肽的鉴定
- 2009年
- 通过对降血压肽结构和功能的分析,设计合成了一条小肽VPVLPK。通过测定其对ACE酶的抑制活性,发现此肽具有很好的降血压活性IC50为4.2μmol/L。根据大肠杆菌偏爱密码子人工合成此肽的6拷贝片段,将其克隆至表达载体pET-15b并转化到宿主菌E.coli BL21(DE3)中。筛选阳性克隆,通过双酶切、PCR及测序表明,本研究已成功构建出重组降血压肽质粒pET-15b-ACEIP的表达系统。IPTG诱导表达后的菌体通过Tricne-SDS-PAGE小分子多肽电泳检测在5.8～7.8kDa之间出现目的蛋白条带,这与理论蛋白分子量6.2kDa相符,且目的蛋白主要存在于超声破碎的上清液中。上清液用胰蛋白酶酶切后,通过HPLC鉴定证实为目的多肽,且多肽的含量达130mg/L。
- 王小莉刘冬梁世中
- 关键词：降血压肽
