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“十五”国家科技攻关计划(2004BA519A05)

作品数:4 被引量:26H指数:3
相关作者:邵红霞秦爱建金文杰李娜刘岳龙更多>>
相关机构:扬州大学中国农业科学院哈尔滨兽医研究所更多>>
发文基金:国家科技重大专项江苏省“十五”科技攻关项目江苏省十五攻关项目更多>>
相关领域:农业科学更多>>

文献类型

  • 4篇期刊文章
  • 3篇会议论文

领域

  • 7篇农业科学

主题

  • 6篇禽流感
  • 6篇流感
  • 5篇病毒
  • 4篇禽流感病
  • 4篇禽流感病毒
  • 3篇单克隆
  • 3篇单克隆抗体
  • 3篇特异性单克隆...
  • 2篇血凝
  • 2篇抗体
  • 2篇克隆
  • 2篇ELISA诊...
  • 2篇ELISA诊...
  • 2篇H7亚型
  • 1篇蛋白
  • 1篇血凝素
  • 1篇血凝素基因
  • 1篇血凝抑制
  • 1篇血凝抑制试验
  • 1篇致病性禽流感

机构

  • 4篇中国农业科学...
  • 3篇扬州大学
  • 2篇国家动物疫病...

作者

  • 3篇金文杰
  • 3篇秦爱建
  • 3篇邵红霞
  • 2篇邓国华
  • 2篇刘岳龙
  • 2篇李娜
  • 1篇张立春
  • 1篇陈化兰
  • 1篇王桂芹
  • 1篇曲站红
  • 1篇田国彬
  • 1篇王桂军
  • 1篇刘振勇
  • 1篇于康震

传媒

  • 2篇中国畜牧兽医...
  • 1篇安徽农业科学
  • 1篇中国预防兽医...
  • 1篇扬州大学学报...
  • 1篇Agricu...

年份

  • 2篇2008
  • 1篇2007
  • 4篇2005
4 条 记 录,以下是 1-7
排序方式:
抗A型禽流感病毒核蛋白特异性单克隆抗体研究被引量:11
2007年
利用禽流感H9亚型病毒(AIV-H9)免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞进行融合,经免疫荧光试验(IFA)检测,以研制抗禽流感病毒(AIV)单克隆抗体。结果获得了5株特异性抗AIV核蛋白(NP)的单克隆抗体细胞株,分别命名为AIV-NP-2C3、AIV-NP-6A5、AIV-NP-3H9、AIV-NP-7B4、AIV-NP-2H4。这5株单克隆抗体能与所有试验的AIV-H9病毒反应,Western blotting方法鉴定结果表明,单克隆抗体仅识别60 ku的蛋白抗原,而不与新城疫病毒、禽网状内皮组织增殖症病毒、传染性法氏囊病毒等反应。初步应用结果显示,以这些单克隆抗体建立的间接免疫荧光试验或ELISA方法可迅速检测出禽流感病毒,这些单克隆抗体在禽流感的预防监测中将发挥重要的作用。
李娜秦爱建邵红霞金文杰刘岳龙
关键词:禽流感病毒核蛋白单克隆抗体间接免疫荧光试验
禽流感病毒H5N1亚型血凝素基因在昆虫细胞中的表达被引量:2
2008年
[目的]研究禽流感病毒H5N1亚型血凝素基因在昆虫细胞中的表达。[方法]将禽流感病毒H5N1亚型HA基因以BamHI和NotI双酶切插入pFastBacI载体构建pFast-H5HA转移载体质粒,然后将pFast-H5HA转入含有穿梭质粒的感受态DH10Bac中发生转座作用,在含有X-gal、IPTG、庆大霉素、卡那霉素和四环素的琼脂平板上筛选白色菌落,通过连续传代4次后获得稳定的重组质粒reBac-mid-H5HA。[结果]将重组质粒reBacmid-H5HA转染Sf9昆虫细胞,获得含有禽流感病毒H5N1亚型HA基因的重组杆状病毒,经间接免疫荧光和Western-blot证实HA基因在昆虫细胞中获得表达。重组杆状病毒表达产物能够凝集鸡红细胞,并能被抗H5N1 HA单抗所抑制。[结论]重组血凝素蛋白在杆状病毒中能获得正确表达,为研制AIVH5亚型检测抗原和亚单位疫苗奠定基础。
王桂军邵红霞金文杰秦爱建
关键词:禽流感病毒血凝素基因重组杆状病毒
具有HI活性的抗H5亚型流感病毒特异性单克隆抗体的研制被引量:6
2005年
以H5N1亚型禽流感病毒分离株A/Duck/Zhejiang/11/00(H5N1)(DZJ/1100)作为免疫原,浓缩纯化后免疫BALB/c小鼠,三次免疫后,取免疫小鼠脾细胞与SP2/O细胞融合,融合阳性细胞用血凝抑制(HI)方法进行检测,阳性细胞株经三代克隆纯化后,获得三株能稳定分泌抗血凝素特异性HI单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为DD7、FG10、CG12。三株杂交瘤细胞株产生的小鼠腹水和细胞培养液上清的HI滴度分别是213、215、211和278、、23。与其他具有血凝活性的禽类病毒以及其他14个HA亚型的禽流感病毒的交叉HI试验表明:这三株单抗具有良好的禽流感病毒亚型特异性;与其他H5亚型流感病毒分离株的HI试验和中和试验证实这三株单抗具有良好的交叉性(分别为7/8、8/8、8/8)和中和活性(6/8、8/8、8/8)。该亚型特异性单克隆抗体的研制成功为H5亚型禽流感病毒的疫情病原学快速诊断提供了坚实的物质保障。
张立春邓国华刘振勇田国彬于康震陈化兰
关键词:禽流感血凝抑制试验单克隆抗体
H7亚型高致病性禽流感病毒抗原捕获ELISA诊断方法的建立
用纯化的H7亚型禽流感病毒灭活后多次免疫山羊采血分离血清制备包被抗体,以自制的H7亚型特异性单克隆抗体作为一抗,建立了检测H7亚型流感病毒抗原的双抗体夹心ELISA方法。经实验证明ELISA最适工作条件的如下:羊血清1:...
王桂芹邓国华曲站红郝婧张立春李雁冰田国斌于康震陈化兰
关键词:H7亚型禽流感
文献传递
具有HI活性的抗H7亚型流感病毒特异性单克隆抗体的研制
以H7N2亚型禽流感病毒分离株A/Chicken/Hebei/01/03(H7N2)(HB103)作为免疫原,浓缩纯化后免疫BALB/C小鼠,三次免疫后,取免疫小鼠脾细胞与SP2/0细胞融合,融合阳性细胞用血凝抑制(HI...
邓国华张立春李雁冰王桂芹曲站红于康震陈化兰
关键词:禽流感HI单克隆抗体
文献传递
Development and Characterization of Monoclonal Antibody Specific to Nuclear Protein of Avian Influenza Virus Type A被引量:7
2008年
Five monoclonal antibodies(Mabs) to nuclear protein of avain influenza virus(AIV) were developed by syncretizing SP 2/0 and the spleen cells from BALB of mice immuized with H9 subtype AIV. Specificity of these Mabs were identified by immunofluorescent assay(IFA) and enzyme linked immunosorbent assay (ELISA). These five Mabs which were named as AIV-NP-2C3, AIV-NP-6A5, AIV-NP-3 H9, AIV-NP-7B4, AIV-NP-2H4 could react with all viruses of AIV-H9 strains in tests. The result of Western blotting showed that only the 60 ku protein antigen of AIV-H9 could be recognized by the Mabs but never recognized by New castle disease virus, REV and infectious bursa disease virus. The result of preliminary application showed that avian influenza viruses could be deetected bv Mabs in IFA and ELISA. All these Mabs will probably play important roles in preventing and monitoring avian influenza viruses.
李娜秦爱建邵红霞金文杰刘岳龙
关键词:NP
H5亚型高致病性禽流感病毒抗原捕捉ELISA诊断方法的建立
本实验利用已制备禽流感H5亚型的单抗,通过对ELISA反应各步最佳工作条件的确定,建立了以多抗作为包被抗体,单抗作为一抗的ELISA诊断方法,对各个工作组分的工作条件作了优化,各个工作组分的最佳工作条件为:羊血清:1:1...
曲站红邓国华王桂芹郝婧张立春田国斌于康震陈化兰
关键词:禽流感病毒H5亚型ELISA
文献传递
共1页<1>
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