广东省科技计划工业攻关项目(2010B020309009)
- 作品数:3 被引量:25H指数:3
- 相关作者:吴灶和简纪常黄郁葱王蓓陈贺更多>>
- 相关机构:广东海洋大学仲恺农业工程学院中国海洋大学更多>>
- 发文基金:广东省科技计划工业攻关项目国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 罗非鱼无乳链球菌DNA疫苗的构建及免疫效果研究被引量:5
- 2013年
- 为研究罗非鱼源无乳链球菌重组DNA疫苗对鱼体的免疫保护作用,将Sip基因克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+)构建重组质粒pcDNA-Sip,并以肌肉注射方式免疫吉富罗非鱼(Oreochromis niloticus)。免疫后第7、28天取样,采用PCR及RT-PCR方法检测pcDNA-Sip在各个组织(包括肌肉、脾脏、头肾、鳃及肝脏)中的表达情况;分别于免疫后第7、14、21、28天采集血清,使用ELISA方法检测抗体效价;免疫28d后进行攻毒实验,计算疫苗的免疫保护率。结果表明,重组质粒pcDNA-Sip可以在上述各组织中被检测到;免疫21d后抗体效价出现峰值达1∶5 120;免疫保护率为90%。由此证实,pcDNA-Sip重组质粒可以转染到罗非鱼组织细胞,并可在鱼体中持续表达,同时有较高的免疫保护率。
- 王蓓简纪常蔡双虎黄郁葱汤菊芬吴灶和
- 关键词:无乳链球菌免疫罗非鱼
- 罗非鱼源无乳链球菌培养基及培养条件的优化被引量:8
- 2012年
- 研究无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)ZQGY08的培养与生长特性,探讨脑心浸液(Brian Heart Infusion,BHI)培养基的营养因子、初始pH值、溶氧、温度等因素对无乳链球菌生长的影响,并采用正交实验法对无乳链球菌培养基营养因子添加量进行优化。结果表明,无乳链球菌生长的最适初始pH为7~8,培养温度为28~37℃,振荡转速为180~200 r/min。在BHI培养基中添加20 mg/mL的酵母粉和2 mg/mL的葡萄糖即可在对数期获得最大细菌量。
- 陈贺吴灶和王蓓黄郁葱鲁义善简纪常
- 关键词:无乳链球菌培养基
- 无乳链球菌灭活疫苗对罗非鱼的免疫效果被引量:13
- 2012年
- 制备无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)临床分离株ZJ02的灭活疫苗,采用注射和浸泡2种方法,研究疫苗对吉富罗非鱼(Oreochromisniloticus)的免疫保护效果和血清抗体效价。注射组以4个不同浓度的白油佐剂灭活疫苗免疫罗非鱼,浸泡组以相同免疫剂量的灭活疫苗分别与消旋山莨菪碱、脂肪醇聚氧乙烯醚和氯化钠3种佐剂免疫罗非鱼。结果显示,无乳链球菌疫苗对罗非鱼具有较强的免疫原性,与对照组相比,免疫组血清中的抗体效价水平均显著性提高(P〈0.05),注射组和浸泡组的抗体效价最高分别达到1:256和1:128;注射组中不同剂量的疫苗免疫组免疫保护率较高,高浓度组可达到95%,浸泡组中使用3种佐剂的免疫组免疫保护率分别为59%、64%、55%。表明无乳链球菌灭活疫苗对罗非鱼具有很好的免疫保护性,免疫剂量在5×10^8~4×10^8cfu/mL之间对注射免疫效果有显著性影响,消旋山莨菪碱、脂肪醇聚氧乙烯醚和氯化钠对浸泡免疫效果具有不同的免疫保护率。
- 陈贺吴灶和王蓓鲁义善黄郁葱简纪常
- 关键词:无乳链球菌疫苗罗非鱼免疫保护率