国家教育部博士点基金(20030246060)
- 作品数：4 被引量：4H指数：2
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- 重组色素上皮细胞衍生因子的制备及其对脑胶质瘤血管新生的影响被引量：2
- 2005年
- 目的 用大肠杆菌表达色素上皮细胞衍生因子(PEDF),及评价其在脑胶质瘤血管新生中的作用。方法 构建pET41 /PEDF表达载体,用金属亲和层析(HisTag)和阴离子交换层析纯化重组蛋白,并以管腔形成试验验证重组蛋白活性。同时,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血管内皮细胞生长因子(VEGF)与血小板反应素1 (TSP- 1)的变化。结果 用基因工程手段获得终产量为3 8mg/L,可抑制内皮细胞管腔形成的PEDF蛋白; PEDF可下调VEGF(减少1 8倍)和上调TSP -1(增高5 3倍)的表达。结论 PEDF可能是抑制脑胶质瘤新生血管形成的主要因素。
- 张弢关明吕元
- 关键词：色素上皮细胞衍生因子脑胶质瘤血管新生PEDF血小板反应素管腔形成
- 色素上皮细胞衍生因子与胶质瘤侵袭的相关性
- 2008年
- 目的评价色素上皮细胞衍生因子（PEDF）对胶质瘤侵袭的抑制作用。方法将PEDF（100ng／m1）加入胶质瘤细胞U87中（U87PEDF），以未加PEDF蛋白的胶质瘤细胞作对照组（U87com），同时在U87PEDF中加入0．25μg／ml的促血管生成因子（VEGF，U87PEDF＋VEGF）。细胞迁徙实验检测PEDF抑制胶质瘤细胞侵袭性；实时荧光定量逆转录（RT）-PCR检测层粘连蛋白Laminin-8表达。结果迁徙实验结果表明，对照组胶质瘤细胞穿透数明显多于PEDF处理组细胞，加入VEGF后，胶质瘤细胞迁徙率的抑制率仍减少38％；实时荧光定量RT-PCR结果显示，U87对照组Laminin-8α4、β1、γ1mRAN表达分别为（1．043±0．090）、（0．823±0．012）、（0．762±0．005）拷贝／μl，明显高于U87mF组[（0．633±0．004）、（0．442±0．005）、（0．424±0．002）拷贝／μl，P〈0．05]。结论在VEGF存在的条件下，PEDF能有效抑制胶质瘤细胞的迁徙，表明其可能由下调Laminin-8基因的表达所致。
- 张弢关明吕元
- 关键词：神经胶质瘤肿瘤侵润舍平类
- 色素上皮细胞衍生因子对脑胶质瘤细胞凋亡的影响被引量：3
- 2008年
- 目的 本研究试图通过检测人脑胶质瘤U87细胞中色素上皮细胞衍生因子（PEDF）以及凋亡相关蛋白的表达，探讨其表达在胶质瘤的增殖和细胞凋亡调控中的作用。方法将100μg/ml的PEDF加入U87细胞中（PEDF处理组），同时以未加PEDF蛋白的胶质瘤细胞作对照组（U87con），采用四甲基偶氮唑蓝法检测PEDF对胶质瘤细胞U87增殖率的影响；流式细胞术检测胶质瘤细胞是否凋亡；Western-blot（免疫印迹）检测PEDF处理组凋亡相关蛋白p16的变化。结果 实验数据显示：与对照组相比，当PEDF浓度为100μg/ml时，对U87的抑制率为（54．29±0．62）％，PEDF处理组胶质瘤细胞的增殖明显减慢（t=2．63，P〈0．05）；PEDF处理过的凋亡细胞产生明显增多，annexin V^＋和PI-的细胞为（21．84±0．36）％，提示胶质瘤细胞处于凋亡早期（t=2．86，P〈0．05）；PEDF诱导的发生凋亡的胶质瘤细胞中，p16蛋白的表达量明显增加（0．82±0．09），与对照组相比（0．43±0．03），差异具有统计学意义。结论 PEDF与p16协同作用，可能在胶质瘤细胞凋亡的调控中起着重要的作用，从而抑制胶质瘤细胞增殖。
- 张弢关明吕元
- 关键词：神经胶质瘤舍平类蛋白质P16细胞凋亡
- 色素上皮细胞衍生因子对脑胶质瘤抑制作用的研究被引量：1
- 2006年
- 目的评价重组色素上皮细胞衍生因子(rPEDF)对与胶质瘤有关的血管活性因子、增殖和侵袭的影响。方法采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测血管内皮细胞生长因子(VEGF)与血小板反应素-1(TSP-1)的变化;四甲基偶氮唑蓝[3-(4,5-dimthy-2-2thiazoly)2,5-dipheny-2H-tetrazoliunbromide,MTT]法检测胶质瘤细胞增殖率;细胞侵袭实验检测rPEDF抑制胶质瘤细胞侵袭性。结果实验数据显示:A172PEDF组(将rPEDF加入胶质瘤细胞A172中)中VEGF表达量为0·29±0·03,与未加PEDF蛋白的胶质瘤细胞作对照组(A172con组,1·31±0·02)相比,减少4·4倍,(P<0·05),同时TSP-1的表达量A172PEBF组为1585±105·67,与A172con组的,351±20·65相比,表达上调4·5倍(P<0·01);侵袭实验结果表明:胶质瘤细胞穿透数为88·67±3·32明显多于rPEDF处理过的细胞(44·41±13·81,2·0倍),加入促血管生成因子—VEGF后,细胞穿透数仍减少至69·4%(69·42±6·35,P<0·05),表明rPEDF能有效抑制胶质瘤细胞的体外侵袭性,至少部分是在血管生成因子调节的作用下。结论rPEDF是抑制胶质瘤增殖和侵袭的主要因素。
- 张弢关明吕元
- 关键词：色素上皮细胞衍生因子胶质瘤增殖
