国家自然科学基金(30872208)
- 作品数：5 被引量：11H指数：2
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- 相关机构：山东省医学科学院山东省寄生虫病防治研究所复旦大学更多>>
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- 脑实质型囊虫病的CT表现及其临床意义
- 2009年
- 目的探讨脑实质型囊虫病患者脑内囊尾蚴的cT影像表现及其临床意义。方法搜集经手术和临床证实的脑实质型囊虫病患者438例，根据其脑cT影像表现进行分型，并对各型患者抗囊治疗的临床意义进行对比分析。结果438例脑囊虫病的cT表现如下：急性脑炎型21例、单发小囊型47例、多发小囊型98例、大囊与小囊并存型23例、小脓肿型63例、肉芽肿型85例，钙化型34例和混合型67例。脑囊虫病患者经三个疗程的抗囊治疗，80．1％（351／438）患者已治愈，18．5％（81／438）患者已明显好转，但各型患者的疗效存在显著性差异（x2=58．4，P〈0．01）。脑内囊尾蚴处于急性期的单发小囊型、急性脑炎型、多发小囊型和大囊与小囊并存型患者抗囊治疗效果较好；而脑内囊尾蚴处于退变期的肉芽肿型和混合型患者抗囊治疗期间虽给予积极的辅助治疗，但治疗效果相对较差；脑内囊尾蚴处于死亡钙化期的患者仅需进行对症治疗。结论脑cT可直接显示囊尾蚴在患者脑组织存在的病理状态，对脑囊虫病的定位、定性或定量判定和病人预后以及指导临床治疗都具有重要意义。
- 贾凤菊
- 关键词：脑囊虫病CT影像疗效
- 猪囊尾蚴排泄分泌抗原Ts8B2基因的原核表达、纯化以及免疫反应性分析
- 2019年
- 目的原核表达猪囊尾蚴排泄分泌抗原Ts8B2基因,分析重组蛋白的免疫反应性。方法参照GenBank中Ts8B2基因序列设计引物,以合成基因为模板获得预期DNA片段,双酶切后连接至原核表达载体pGEX-4T-1。将重组质粒转化入大肠埃希菌DH5α(E.coli DH5α),PCR、双酶切筛选阳性质粒,测序确认后转化至E.coli Rosstea,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测表达产物。尿素法提取重组蛋白,然后以脑囊虫病患者血清为一抗,Western blot分析其免疫反应性。结果 Ts8B2基因PCR扩增产物为258 bp,与理论值一致。双酶切和测序鉴定重组表达质粒构建成功,SDS-PAGE分析重组质粒转化菌表达相对分子质量为3.5×10~3,以包涵体形式存在目的蛋白,Western blot分析尿素法提取的重组蛋白能被脑囊虫患者血清识别。结论成功构建Ts8B2基因重组表达质粒表达的重组蛋白具有免疫反应性,为进一步研究该蛋白在抗体检测中的应用奠定了基础。
- 陈静梅陈静梅李瑾孙慧肖婷魏庆宽贾凤菊
- 关键词：猪囊尾蚴原核表达免疫反应性
- 猪囊尾蚴排泄分泌抗原Ts8B3基因的原核表达、纯化以及免疫反应性分析被引量：8
- 2018年
- 目的将猪囊尾蚴排泄分泌抗原Ts8B3基因进行原核表达,分析重组蛋白的免疫反应性。方法根据Ts8B3基因序列设计引物,以囊尾蚴RNA反转录的cDNA为模板PCR扩增Ts8B3基因,扩增产物经BamHⅠ/XhoⅠ双酶切后连接至原核表达载体pGEX-4T-1,将重组质粒转化入大肠埃希菌DH5α(E.coli DH5α),PCR、双酶切筛选阳性质粒,测序确认后转化至E.coli BL21,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测表达产物。纯化重组蛋白,以囊虫病人血清为一抗,采用Western blot分析其免疫反应性。结果 PCR扩增Ts8B3基因片段为201bp,双酶切和测序显示重组表达质粒构建成功。重组质粒转化BL21后经IPTG诱导4h,以包涵体的形式表达相对分子质量单位(Mr)为33×103的目的蛋白。纯化的重组蛋白能被囊虫病患者血清识别。结论成功构建Ts8B3基因重组质粒,表达的重组蛋白具有免疫反应性,为进一步研究该蛋白在抗体检测中的应用奠定了基础。
- 李瑾肖婷孙慧魏庆宽贾凤菊黄炳成
- 关键词：猪囊尾蚴原核表达免疫反应性
- 抗猪囊尾蚴IgG4抗体的特异性抗原筛选被引量：3
- 2017年
- 将囊液抗原蛋白采用双向凝胶电泳分离,经考马斯亮蓝染色后用双向电泳图像分析软件分析蛋白点,以脑囊尾蚴病患者血清为一抗进行蛋白质印迹分析(Western blotting),选取阳性蛋白点进行质谱分析,获取肽质量指纹图谱,采用Mascot软件在NCBI中搜寻、比对,筛选出抗猪囊尾蚴IgG4特异性抗原。囊液抗原经双向电泳检测到(201±5)个蛋白斑点,相对分子质量(M_r)为10 000~170 000,等电点(pI)为3.0~10.0。Western blotting分析显示,与患者血清中特异IgG4抗体结合的抗原以小分子量蛋白为主,从中筛选出51个(抗原)点进行质谱分析,其中有21个点峰值大于39。对比分析显示,高峰值点与10种囊尾蚴蛋白有关,其中最为密切相关的为4种蛋白,按分值高低排序分别为Ts8B2、Ts8B3、10ku抗原和Sequence 3。
- 李瑾王燕魏庆宽贾凤菊肖婷孙慧于振华黄炳成
- 关键词：猪囊尾蚴IGG4双向电泳
- 囊虫病免疫诊断候选抗原研究进展被引量：1
- 2011年
- 猪囊尾蚴免疫诊断抗原的研究是囊虫病免疫诊断的基础。猪囊尾蚴抗原成分复杂,特别是虫体粗抗原,与多种寄生虫存在明显的交叉抗原成分,影响检测的特异性。近年来随着分子生物学的发展,重组抗原制备简单,检测效果良好,已成为囊虫病免疫诊断研究的热点。本文对近年来囊虫病免疫诊断抗原的分子生物学研究进展进行了综述。
- 王燕黄炳成
- 关键词：猪囊尾蚴重组抗原免疫诊断
