河北省科技厅科技支撑计划项目(10276116D) 作品数:7 被引量:29 H指数:4 相关作者: 郝小惠 刘和亮 郭志义 李娟 田炜 更多>> 相关机构: 河北联合大学 华北理工大学 唐山市公安局 更多>> 发文基金: 河北省科技厅科技支撑计划项目 河北省教育厅课题 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
姜黄素对矽肺纤维化大鼠肺组织血小板源性生长因子及胶原表达影响 被引量:4 2013年 目的观察姜黄素对矽肺纤维化大鼠肺组织血小板源性生长因子(PDGF)和胶原表达的影响。方法无特定病原体级雄性Wistar大鼠40只,随机分为矽肺模型组、姜黄素治疗组、溶剂对照组、生理氯化钠组和正常对照组。前3组均一次性气管内给予质量浓度为50 g/L的矽尘混悬液1.0 ml制作矽肺模型,生理氯化钠组一次性气管内注入等体积的生理氯化钠溶液,正常对照组不进行气管注入处理。染尘后第2天,姜黄素治疗组给予用质量分数为0.5%羧甲基纤维素钠溶解的质量浓度为20 g/L的姜黄素300 mg/(kg体质量·d),溶剂对照组给予质量分数为0.5%羧甲基纤维素钠15 ml/(kg体质量·d)。给药第29天处死全部动物。采用马三松染色观察肺组织胶原分布情况,羟脯氨酸法检测肺组织总胶原水平,免疫印迹法、实时荧光定量聚合酶链反应法检测各组大鼠肺组织的Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原和PDGF蛋白及mRNA表达。结果与正常对照组和生理氯化钠组比较,矽肺模型组、溶剂对照组大鼠肺组织中羟脯氨酸水平、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原和PDGF-BB蛋白表达水平增高(P<0.01),Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原和PDGF的mRNA表达水平增高(P<0.01),而姜黄素治疗组上述指标表达水平均低于矽肺模型组和溶剂对照组(P<0.01)。结论姜黄素可通过抑制肺组织总胶原水平、PDGF及Ⅰ、Ⅲ型胶原的表达,降低矽肺纤维化程度,在矽肺的发病过程中具有一定的保护作用。 郝小惠 郭志义 李娟 刘和亮 张文丽关键词:姜黄素 矽肺 血小板源性生长因子 二氧化硅刺激A549细胞水通道蛋白4表达研究 2014年 目的探讨二氧化硅(Si O2)刺激的人肺泡上皮细胞系A549细胞水通道蛋白4(AQP-4)的表达及意义。方法将A549细胞分为0.5、1.0、2.0、4.0、8.0 h染尘组和抑制剂组,各染尘组分别以质量浓度为50 mg/L的Si O2混悬液刺激相应时间,抑制剂组先以浓度为100μmol/L的AQP-4抑制剂TGN-020孵育2.0 h,再以质量浓度为50mg/L的Si O2混悬液刺激1.0 h,另设不予任何处理的对照组;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测AQP-4 mRNA表达。同时,将A549细胞分为3.0、6.0、12.0、24.0 h染尘组和抑制剂组,各染尘组分别以质量浓度为50 mg/L的Si O2混悬液刺激相应时间,抑制剂组先以浓度为100μmol/L的TGN-020孵育2.0 h,再以质量浓度为50 mg/L的Si O2混悬液刺激6.0 h,另设不予任何处理的对照组;分别采用免疫印迹法和免疫细胞化学法检测AQP-4蛋白表达。结果 RT-PCR分析结果显示:与对照组比较,Si O2刺激后A549细胞AQP-4 mRNA相对表达水平呈现先升高后逐渐下降趋势,于刺激1.0 h后达到高峰值(P<0.05),于刺激8.0 h后趋于正常水平(P>0.05)。免疫印迹法和免疫细胞化学法分析结果均显示:与对照组比较,Si O2刺激后A549细胞AQP-4蛋白呈现先升高后逐渐下降趋势,于刺激6.0 h后达到高峰值(P<0.05),但于刺激24.0 h后仍未下降至正常水平(P<0.01)。抑制剂组AQP-4的mRNA相对表达水平和蛋白表达水平均低于Si O2刺激相同时间的染尘组(P<0.01)。结论 Si O2刺激使A549细胞AQP-4的表达增高,其特异性抑制剂可抑制Si O2刺激引起的AQP-4表达增高,推测AQP-4可能参与了矽肺的发生发展过程。 喻昌利 张芳 郝小惠 刘和亮关键词:水通道蛋白4 二氧化硅 A549细胞 矽肺 免疫印迹法 免疫细胞化学法 姜黄素对矽肺大鼠肺组织PDGF及ERK1/2表达的影响 被引量:7 2014年 将雄性Wistar大鼠40只,随机分为正常对照组、生理氯化钠溶液组、模型组、溶剂对照组、姜黄素组。采用免疫印迹法、实时荧光定量聚合酶链反应法检测各组大鼠肺组织的血小板源性生长因子(PDGF)和磷酸化细胞外信号调节激酶1/2(p-ERK1/2)蛋白及mRNA表达。结果显示,矽肺模型组、溶剂对照组大鼠肺组织中PDGF、p-ERK1/2蛋白及mRNA表达较正常对照组和生理氯化钠溶液组增高(P<0.05),姜黄素组大鼠肺组织PDGF、p-ERK1/2蛋白及mRNA表达较模型组降低(P<0.05)。提示姜黄素可降低矽肺模型组大鼠肺组织中PDGF、p-ERK1/2蛋白及mRNA表达,并可能通过影响PDGF、p-ERK1/2的表达在矽肺发病中起到一定的保护作用。 郝小惠 李娟 郭志义 刘和亮 张丽娟关键词:姜黄素 矽肺 血小板源性生长因子 细胞外信号调节激酶 溺死大鼠肺组织AQP-1、AQP-4的表达 被引量:3 2016年 目的观测生前溺死与死后抛入河水中大鼠肺组织水通道蛋白-1(aquaporin-1,AQP-1)、AQP-4的表达变化。方法将30只健康雄性Wistar大鼠随机分为河水溺死组、抛尸入水组及脱颈致死组。HE染色观察各组大鼠肺组织形态学变化,实时荧光定量PCR法检测各组大鼠肺组织AQP-1、AQP-4 m RNA的表达,免疫组织化学、Western印迹法检测其蛋白表达。结果免疫组织化学法和Western印迹法检测河水溺死组AQP-1蛋白的表达高于抛尸入水组和脱颈致死组(P<0.05)。免疫组织化学法显示河水溺死组AQP-4蛋白的表达高于抛尸入水组和脱颈致死组(P<0.05),而Western印迹法未检测出三者的差别(P>0.05)。河水溺死组大鼠肺组织的AQP-1、AQP-4 m RNA表达高于抛尸入水组(P<0.05)。结论河水溺死组的大鼠在急性肺损伤时肺组织AQP-1、AQP-4 mRNA及蛋白表达增高可能对生前溺死与死后抛尸的鉴别有一定意义。 赵兵 姚士强 郝小惠关键词:法医病理学 溺水 姜黄素对矽肺大鼠肺组织水通道蛋白-1表达影响 被引量:7 2012年 目的探讨姜黄素对矽肺大鼠肺组织水通道蛋白-1(AQP-1)表达的影响及意义。方法雄性Wistar大鼠40只,随机分为正常对照组、生理氯化钠溶液组、矽肺模型组、姜黄素组和溶剂对照组。后3组均一次性气管内给予质量浓度为50 g/L的矽尘混悬液1 ml,生理氯化钠溶液组一次性气管内注入等体积的生理氯化钠溶液。染尘第2天,姜黄素组给予质量浓度为20 g/L姜黄素300 mg.kg-1.d-1(0.5%羧甲基纤维素钠溶解),溶剂对照组给予质量分数为0.5%羧甲基纤维素钠15 ml.kg-1.d-1。于第29天处死动物,采用免疫组织化学、免疫印迹法、实时荧光定量聚合酶链反应法检测大鼠肺组织AQP-1及mRNA表达。结果矽肺模型组、溶剂对照组肺组织中AQP-1表达较正常对照组和生理氯化钠溶液组减低(P<0.05),姜黄素组肺组织AQP-1表达较矽肺模型组增强(P<0.05)。结论姜黄素可使大鼠矽肺模型肺组织中AQP-1表达增强,提示姜黄素可能通过影响AQP-1的表达,在矽肺的发病过程中具有一定的保护作用。 郝小惠 王宏丽 刘和亮 张丽 李艳辉关键词:姜黄素 二氧化硅 矽肺 水通道蛋白-1 二氧化硅刺激A549细胞水通道蛋白-1表达:体外研究 被引量:2 2015年 [目的]研究二氧化硅(Si O2)粉尘刺激对人肺泡上皮A549细胞水通道蛋白-1(AQP-1)的表达及意义。[方法]将A549细胞分为对照组、染毒组及抑制剂组。其中染毒组细胞利用50 mg/L的Si O2混悬液刺激细胞,Si O2分别刺激0.5、1、2、4、8 h后检测m RNA表达;Si O2分别刺激3、6、12、24 h后检测蛋白表达。抑制剂组则先加入AQP-1特异性的通道抑制剂氯化汞(Hg Cl2)孵育3 min后再加Si O2刺激2 h检测m RNA,刺激6 h检测蛋白表达。各组采用实时聚合酶链反应法检测AQP-1 m RNA表达水平,Western blot、免疫细胞化学检测AQP-1蛋白表达水平。[结果]AQP-1m RNA表达:与对照组相比,Si O2刺激后的0.5、1、2、4 h A549细胞AQP-1 m RNA的表达量分别是对照组的2.78、3.52、3.85、1.98倍,8 h时回到对照组水平(P<0.01);抑制剂组的表达水平为相同刺激时间Si O2染毒组的65%。AQP-1蛋白表达:1免疫印迹检测结果显示,与对照组相比,Si O2刺激后的3、6、12、24 h A549细胞的表达量分别为对照组的1.44、2.56、1.93、1.35倍(P<0.05或P<0.01);抑制剂组的表达水平低于相同刺激时间Si O2染毒组,为其70%(P<0.01)。2免疫细胞化学结果显示,与对照组相比,Si O2刺激后的3、6、12、24 h A549细胞的表达量分别为对照组的1.17、1.49、1.29、1.07倍(P<0.05或P<0.01)。抑制剂组的表达水平低于相同刺激时间Si O2染毒组,为其71%(P<0.01)。[结论]Si O2刺激使A549细胞的AQP-1表达增高,其特异性抑制剂氯化汞可抑制Si O2刺激引起的AQP-1的表达增高,推测AQP-1可能参与了矽肺的发生发展过程。 郝小惠 郭志义 张芳 刘嘉祺 孙悦 刘和亮关键词:水通道蛋白-1 二氧化硅 A549细胞 肺上皮细胞 矽肺 姜黄素对人肺成纤维细胞凋亡及细胞周期的影响 被引量:9 2011年 目的研究姜黄素对人肺成纤维细胞(human lung fibroblasts,HLFs)体外生长、细胞周期及凋亡的影响。方法应用CCK-8、Annexin-V/PI、PI流式细胞分析术、免疫印迹法,检测姜黄素对细胞的增殖、凋亡、细胞周期和Bax蛋白表达的影响。结果姜黄素对HLFs的增殖有抑制作用,可促进HLFs的早期凋亡,对细胞周期可产生G2/M期阻滞,增加HLFs的Bax蛋白的表达。结论姜黄素可抑制HLFs的增殖并能诱导其凋亡,其机制可能与细胞的G2/M期阻滞及凋亡相关蛋白的表达增强有关。 郝小惠 郭志义 张银红 刘和亮 田炜 裴鑫关键词:姜黄素 成纤维细胞 细胞周期 细胞凋亡