国家自然科学基金(81370952)
- 作品数：15 被引量：49H指数：4
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- 可溶性Toll样受体2研究进展被引量：2
- 2017年
- Toll样受体2(Toll-like receptor 2,TLR2)是由胞内段、跨膜段和胞外段组成的单次跨膜受体,也是固有免疫中重要的模式识别受体(pattern recognition receptor,PRR)。可溶性Toll样受体2(soluble Tolllike receptor 2,s TLR2)是TLR2胞外段脱落生成的可溶性蛋白。s TLR2作为TLR2的特异性调节分子,充当诱饵受体与配体结合,抑制TLR2信号,进而减轻炎症,减少过度免疫造成的损伤。近年来,s TLR2在越来越广泛的体液中被检测出来,且在很多疾病中出现明显异常的表达,成为这些疾病潜在的诊断指标或治疗工具。本文简要综述了s TLR2的生成、结构、功能及其与疾病的关系等。
- 金碧伦蔡肖洁罗运成郭一铭刘玉皎李冬民
- 关键词：炎症固有免疫生物标记物
- 序贯治疗对获得性维生素K依赖性凝血因子缺乏症的临床疗效分析被引量：4
- 2014年
- 目的分析序贯治疗对获得性维生素K依赖性凝血因子缺乏症(ADVKCF)的临床疗效.方法选择获得性维生素K依赖性凝血因子缺乏症患者44例,随机分为对照组及观察组,分别有21例、23例.分别采用常规治疗及序贯治疗,对治疗后凝血常规、凝血因子、凝血酶原前体蛋白(PIVKA-Ⅱ)进行检测.结果观察组及对照组治疗后PT、INR、APTT、FⅡ、FⅦ、FⅨ、FX较治疗前有改善,差异有统计学意义(P<0.05),观察组治疗后PT、INR、APTT、FⅡ、FⅦ、FX较对照组有改善,差异有统计学意义(P<0.05).2组治疗后PIVKA-Ⅱ较治疗前有升高,差异有统计学意义(P<0.05),观察组患者接受维生素K4治疗后3周T2时较对照组有升高,差异有统计学意义(P<0.05).结论大剂量维生素K序贯疗法可有效治疗ADVKCF,对PIVKA-II及凝血常规、凝血因子进行监测有助于明确患者的病情变化.
- 王浩郭丽英宋艳萍胡凯李冬民
- 关键词：获得性维生素K依赖性凝血因子缺乏症凝血因子PIVKA-II序贯治疗
- 转录因子STAT1两个亚型STAT1α和STAT1β高表达载体的构建及鉴定
- 2016年
- 目的利用高表达载体pLJM1-EGFP构建并鉴定转录因子STAT1基因的2个亚型STAT1α和STAT1β的过表达重组质粒(简称为pLJM1-STAT1α和pLJM1-STAT1β)。方法以大鼠肝脏cDNA为模板,PCR获取目的片段(即STAT1α和STAT1β);用AgeⅠ和EcoRⅠ双酶切pLJM1-EGFP表达载体和PCR扩增的STAT1α和STAT1β基因片段后,用T4DNA连接酶连接酶切纯化后的载体及目的基因片段;将连接产物转化DH5α大肠杆菌感受态细胞、挑选阳性克隆,并通过PCR、双酶切和DNA测序鉴定构建的重组质粒。结果 PCR和双酶切证实pLJM1-STAT1α和pLJM1-STAT1β重组载体中分别成功插入了STAT1α和STAT1β基因片段。DNA测序结果表明插入的STAT1α和STAT1β基因片段的序列完全正确。结论成功构建了pLJM1-STAT1α和pLJM1-STAT1β高表达重组载体。
- 李靖伊静蓝茜李玥刘莉梁栋杜小娟武丽涛闫小飞杨旭东张富军吕社民李冬民
- 大鼠TLR2胞外段(405T-573Q)多克隆抗体的制备及活性鉴定
- 2015年
- 目的制备大鼠Toll样受体2胞外段(TLR2ex,405T-573Q)的多克隆抗体并鉴定其活性。方法用反转录PCR从大鼠肝细胞中扩增长507个碱基的TLR2部分胞外段,并构建重组表达载体p ET28a-TLR2ex。在大肠杆菌BL21(DE3)中表达TLR2ex-6×His融合蛋白,该蛋白经亲和层析纯化后免疫BALB/c小鼠,制备多克隆抗体。ELISA鉴定抗血清的效价,Western blot法检测抗血清的特异性。结果成功构建了原核表达载体p ET28a-TLR2ex,并成功表达纯化了TLR2ex-6×His融合蛋白,将该蛋白免疫BALB/c小鼠后获得抗血清;Western blot法结果显示该血清可以特异性地检出E3大鼠脾组织TLR2蛋白,ELISA测定该多克隆抗体的效价可以达到1∶76 800。结论成功制备了大鼠TLR2胞外段(405T-573Q)的多克隆抗体。
- 刘莉蓝茜李靖伊静王璇李玥张富军吕社民李冬民
- 关键词：TOLL样受体2胞外段多克隆抗体
- 谷胱甘肽过氧化物酶2、硒及莱菔硫烷在小鼠结肠癌中的相互作用被引量：1
- 2014年
- 慢性炎性和硒元素的缺乏被认为是结肠癌发病的危险因素。其中硒元素可能通过特异性硒蛋白介导发挥保护作用。通过给予野生型和GPx2基因敲除鼠不同硒含量的饮食,研究在不同硒水平以及防癌药物莱菔硫烷SFN的干预下GPx2基因敲除鼠和野生鼠对结肠癌的易感性。最终证实,尽管GPx2虽然促进肿瘤的生长,抑制炎性介导的肿瘤的发生,但是硒抑制肿瘤的保护作用不完全依赖GPx2的表达。同样的,SFN发挥保护作用需要硒的参与而不是GPx2。
- 王璇王君锋李冬民
- 关键词：硒莱菔硫烷结肠癌
- 氢过氧化物及谷胱甘肽过氧化物酶在肿瘤发生过程中的作用被引量：3
- 2015年
- 癌症细胞能产生高量的活性氧(ROS)且逃避凋亡,氢过氧化物在较低水平时能支持癌症细胞增殖、侵袭、迁移和血管生成,但在较高的水平时诱导细胞凋亡。谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidases,GPxs)通过调节氢过氧化物水平从而实现致癌和抗癌双重效果、使其在肿瘤发生过程中的作用变得更为复杂;不同亚型的GPxs在肿瘤发生过程的作用也不尽相同。
- 王璇张鹏李冬民
- 关键词：氢过氧化物谷胱甘肽过氧化物酶细胞凋亡
- miRNA-497在肿瘤中的研究进展被引量：9
- 2015年
- MicroRNA是一类内源性非编码小RNA,通过与靶mRNA结合而引起靶mRNA降解或翻译抑制而导致靶基因表达受抑。本文主要概述了miRNA-497在肿瘤中的作用及其机制。近年来,研究发现miRNA-497可以通过靶向调节细胞周期、PI3K-AKT-mTOR、MAPK/ERK等信号通路上的一些关键分子而促进细胞凋亡、抑制细胞增生、转移、侵袭等。有文献报道,在乳腺癌、胃癌、结直肠癌、肝癌、肺癌、神经细胞瘤、神经母细胞瘤、恶性星形细胞瘤、恶性黑色素瘤、膀胱癌、骨肉瘤、肾上腺皮质癌、视网膜母细胞瘤、原发性腹膜癌、恶性胸膜间皮瘤中,由于基因缺失、甲基化或组蛋白修饰等使miRNA-497呈低表达,因而miRNA-497对其靶基因的抑制作用减弱,最终导致上述肿瘤的发生发展、转移、侵袭等。由此可见,miRNA-497是一个非常重要的肿瘤抑制性microRNA,不但可以作为诊断肿瘤的标志物,而且还可以作为治疗肿瘤的新靶点,具有非常重要的临床应用前景和价值。
- 马沙蕊宋刘梅李冬民
- 关键词：肿瘤细胞凋亡靶基因
- 医学大学生创新性实验计划项目的实验室管理探索被引量：6
- 2013年
- 为适应21世纪医学发展以及培养创新医学人才的需要,保证校级、省级、国家级大学生创新性实验计划项目顺利进行,经过不断探索和实践,作者在大学生创新性实验计划项目的实验室管理方面做了一些有益探索,如:实验室注册、实验仪器使用前培训、使用预约及登记、实验经费、耗材和试剂规范管理、创新实验档案专人管理以及实验室安全管理等行之有效的管理措施。为各级科研创新实验项目的有序开展提供了一个良好的实验环境和研究平台,保证了它们的顺利完成,提高了教学质量。
- 韩燕张富军宁启兰王淑红吕社民李冬民
- 关键词：医学大学生实验室管理
- ABCA1敲低对小鼠巨噬细胞中Pam3CSK4引起的炎症反应的双向调节作用
- 2017年
- 目的检测ABCA1敲低对巨噬细胞中Pam3CSK4引起的炎症应答的影响。方法构建小鼠单核巨噬细胞RAW264.7的ABCA1敲低的稳定细胞系,以TLR2配体Pam3CSK4刺激该细胞系建立炎症反应细胞模型,在该细胞模型上检测相关促炎和抗炎细胞因子转录水平的表达变化。结果 ABCA1敲低的RAW264.7稳定细胞株在Pam3CSK4刺激后,IL-1β,TNF-α和IL-6表达发生显著上调(P<0.01),而转录抑制因子cAMP依赖性转录因子3(ATF3)也发生显著上调(P<0.01);与此同时,ATF蛋白家族中其它因子ATF1,ATF2,ATF4和ATF5转录水平没有发生显著变化。结论在巨噬细胞RAW264.7中,ABCA1敲低显著上调Pam3CSK4引起的促炎因子IL-1β,TNF-α和IL-6的表达的同时,也显著上调了具有抗炎效应的ATF3的表达,其对炎症反应的影响可能并非是单向的促炎作用,而是发生双向的调节,而ABCA1参与上调ATF3表达的机制可能也与其ATF蛋白家族其他成员的上游调节机制不同。
- 李玥李玥武丽涛蓝茜Ezra Kombo Osoro李冬民杜小娟
- 关键词：ABCA1ATF3
- 含miR-497野生及突变结合位点的胰岛素受体mRNA 3′UTR区报告基因载体的构建和鉴定
- 2014年
- 目的利用pmirGLO Dual-Luciferase miRNA Target Expression Vector(简称为pmirGLO报告基因载体)构建并鉴定含miR-497野生及突变结合位点的胰岛素受体mRNA 3′UTR区报告基因载体(pmir-Insr-3′UTR及pmirmutant-Insr-3′UTR)。方法以大鼠肝脏cDNA为模板,PCR获取目的片段(即含miR-497野生及突变结合位点的胰岛素受体mRNA 3′UTR区);用PmeI、XbaI双酶切pmirGLO报告基因载体和含miR-497野生及突变结合位点的胰岛素受体mRNA 3′UTR区,用T4 DNA连接酶连接纯化后的酶切产物;连接产物转化DH5α大肠杆菌感受态细胞并挑选阳性克隆,并通过PCR、双酶切、DNA测序鉴定构建的重组质粒。结果 PCR和双酶切证实pmir-Insr-3′UTR及pmir-mutant-Insr-3′UTR重组载体中均插入目的片段;DNA测序结果进一步证实pmir-Insr-3UTR重组载体中成功插入了胰岛素受体mRNA 3′UTR区,pmir-mutant-Insr-3′UTR重组载体中成功插入了在miR-497结合位点含有3个突变碱基的胰岛素受体mRNA 3′UTR片段。结论成功构建了含miR-497野生及突变结合位点的胰岛素受体mRNA 3′UTR报告基因载体pmir-Insr-3′UTR及pmir-mutant-Insr-3′UTR。
- 王美晨王璇蓝茜李玥刘莉伊静李靖宋刘梅马莎蕊宁启兰李冬民
- 关键词：胰岛素受体
